| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第1章 绪论 | 第15-22页 |
| 1.1 木聚糖的概述 | 第15-16页 |
| 1.2 木聚糖酶的概述 | 第16-17页 |
| 1.2.1 木聚糖酶的分类 | 第16页 |
| 1.2.2 木聚糖酶的分子结构 | 第16-17页 |
| 1.2.3 木聚糖酶的理化性质 | 第17页 |
| 1.2.4 木聚糖酶的生产菌株 | 第17页 |
| 1.3 常压室温等离子体(ARTP)诱变 | 第17-18页 |
| 1.4 微生物发酵产木聚糖酶 | 第18页 |
| 1.4.1 液态深层发酵 | 第18页 |
| 1.4.2 固态发酵 | 第18页 |
| 1.5 木聚糖酶的分离纯化 | 第18-20页 |
| 1.5.1 粗酶液的提取浓缩 | 第19页 |
| 1.5.2 粗酶液的进一步分离纯化 | 第19-20页 |
| 1.6 木聚糖酶的应用简介 | 第20页 |
| 1.6.1 木聚糖酶在饲料行业中的应用 | 第20页 |
| 1.6.2 木聚糖酶在造纸工业中的应用 | 第20页 |
| 1.6.3 木聚糖酶在食品行业中的应用 | 第20页 |
| 1.7 本论文的研究内容及意义 | 第20-22页 |
| 第2章 ARTP诱变筛选匍枝根霉高产木聚糖酶突变菌株 | 第22-32页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 实验材料 | 第22页 |
| 2.2.1 主要试验仪器 | 第22页 |
| 2.2.2 菌株与试剂 | 第22页 |
| 2.2.3 培养基 | 第22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.3.1 孢子悬浮液的制备 | 第22-23页 |
| 2.3.2 ARTP诱变和筛选方法 | 第23页 |
| 2.3.3 木糖的标准曲线测定 | 第23-24页 |
| 2.3.4 1%的木聚糖溶液的制备 | 第24页 |
| 2.3.5 粗酶液的制备 | 第24页 |
| 2.3.6 木聚糖酶活力的测定 | 第24页 |
| 2.3.7 匍枝根霉产木聚糖酶遗传稳定性实验 | 第24页 |
| 2.3.8 光学显微镜和扫描电镜检测诱变前后菌体形态 | 第24-25页 |
| 2.3.9 诱变菌株和原始菌株的比较 | 第25页 |
| 2.4 结果与分析 | 第25-31页 |
| 2.4.1 木糖的标准曲线 | 第25页 |
| 2.4.2 致死率曲线 | 第25-26页 |
| 2.4.3 初筛 | 第26页 |
| 2.4.4 复筛 | 第26-27页 |
| 2.4.5 遗传稳定性实验 | 第27页 |
| 2.4.6 ARTP诱变处理引起匍枝根霉菌落形态、色泽变化 | 第27-28页 |
| 2.4.7 400倍光学显微镜下观察诱变前后匍枝根霉孢子囊形态变化 | 第28-29页 |
| 2.4.8 扫描电镜下观察匍枝根霉菌体诱变前后形态变化 | 第29-30页 |
| 2.4.9 突变菌株与原始菌株发酵对比 | 第30-31页 |
| 2.5 小结 | 第31-32页 |
| 第3章 匍枝根霉液态发酵培养基的优化 | 第32-45页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 实验材料 | 第32-33页 |
| 3.2.1 仪器与设备 | 第32页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第32-33页 |
| 3.2.3 菌种 | 第33页 |
| 3.2.4 培养基 | 第33页 |
| 3.3 实验方法 | 第33-35页 |
| 3.3.1 菌种斜面培养 | 第33页 |
| 3.3.2 匍枝根霉液态发酵单因素实验 | 第33-34页 |
| 3.3.3 匍枝根霉TZD-01响应面优化实验 | 第34-35页 |
| 3.3.3.1 Plackett-Burman实验 | 第34页 |
| 3.3.3.2 最陡爬坡实验 | 第34页 |
| 3.3.3.3 Box-Behnken试验设计 | 第34-35页 |
| 3.3.4 优化后培养基验证 | 第35页 |
| 3.4 结果与分析 | 第35-45页 |
| 3.4.1 种子液生物量测定 | 第35-36页 |
| 3.4.2 液态发酵产木聚糖酶的条件优化 | 第36-39页 |
| 3.4.2.1 碳源单因素实验 | 第36-37页 |
| 3.4.2.2 氮源单因素实验 | 第37-38页 |
| 3.4.2.3 无机盐单因素实验 | 第38-39页 |
| 3.4.3 Plackett-Burman实验结果 | 第39-40页 |
| 3.4.4 最陡爬坡试验 | 第40-41页 |
| 3.4.5 最优产酶培养基响应面实验 | 第41-44页 |
| 3.4.6 最优产酶培养基验证 | 第44页 |
| 3.4.7 小结 | 第44-45页 |
| 第4章 匍枝根霉产木聚糖酶的发酵分批发酵动力学研究 | 第45-52页 |
| 4.1 实验材料 | 第45-47页 |
| 4.1.1 实验主要仪器 | 第45-46页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第46页 |
| 4.1.3 菌种 | 第46页 |
| 4.1.4 培养基 | 第46-47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47页 |
| 4.2.1 匍枝根霉培养方法 | 第47页 |
| 4.2.2 菌体生物量的测定 | 第47页 |
| 4.2.3 木聚糖酶酶活力测定 | 第47页 |
| 4.2.4 总糖的测定 | 第47页 |
| 4.2.5 模型求解计算方法 | 第47页 |
| 4.3 结果与分析 | 第47-51页 |
| 4.3.1 匍枝根霉分批发酵过程 | 第47-48页 |
| 4.3.2 菌体生长动力学模型 | 第48-49页 |
| 4.3.3 木聚糖酶合成动力学模型 | 第49-50页 |
| 4.3.4 基质消耗动力学模型建立 | 第50-51页 |
| 4.4 小结 | 第51-52页 |
| 第5章 匍枝根霉固态发酵培养基的优化 | 第52-69页 |
| 5.1 引言 | 第52页 |
| 5.2 实验材料 | 第52-54页 |
| 5.2.1 仪器与设备 | 第52-53页 |
| 5.2.2 试剂 | 第53页 |
| 5.2.3 菌种 | 第53页 |
| 5.2.4 培养基 | 第53-54页 |
| 5.3 实验方法 | 第54-59页 |
| 5.3.1 匍枝根霉固态发酵最佳因子确定 | 第54-56页 |
| 5.3.1.1 单一碳源实验 | 第54-55页 |
| 5.3.1.2 单一氮源实验 | 第55页 |
| 5.3.1.3 加水量单因子实验 | 第55-56页 |
| 5.3.1.4 接种量单因子实验 | 第56页 |
| 5.3.2 匍枝根霉固态发酵优化 | 第56-59页 |
| 5.3.2.1 碳源添加量实验 | 第56-57页 |
| 5.3.2.2 氮源比例实验 | 第57页 |
| 5.3.2.3 响应面实验 | 第57-59页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第59-69页 |
| 5.4.1 菌种观察和固态发酵 | 第59-60页 |
| 5.4.1.1 斜面观察 | 第59-60页 |
| 5.4.1.2 固态发酵观察 | 第60页 |
| 5.4.2 单因素实验结果 | 第60-63页 |
| 5.4.2.1 碳源单因素实验 | 第60-61页 |
| 5.4.2.2 氮源单因素实验 | 第61-62页 |
| 5.4.2.3 加水量对产酶的影响 | 第62-63页 |
| 5.4.2.4 接种量对产酶的影响 | 第63页 |
| 5.4.3 响应面实验结果分析 | 第63-68页 |
| 5.4.3.1 响应面实验结果分析 | 第63-66页 |
| 5.4.3.2 因素间的交互作用分析 | 第66-68页 |
| 5.4.4 小结 | 第68-69页 |
| 第6章 木聚糖酶的分离纯化及酶特性研究 | 第69-80页 |
| 6.1 实验材料 | 第69-70页 |
| 6.1.1 菌株 | 第69页 |
| 6.1.2 试剂 | 第69-70页 |
| 6.1.3 溶液配制 | 第70页 |
| 6.1.3.1 硫酸铵饱和溶液的配制 | 第70页 |
| 6.1.3.2 蛋白质纯化及SDS-PAGE电泳试剂配方 | 第70页 |
| 6.1.3.3 主要仪器 | 第70页 |
| 6.2 实验方法 | 第70-72页 |
| 6.2.1 蛋白质标准曲线的建立及蛋白质含量的测定 | 第70-71页 |
| 6.2.2 木聚糖酶粗酶液的制备 | 第71页 |
| 6.2.3 木聚糖酶的分离纯化 | 第71-72页 |
| 6.2.3.1 硫酸铵分级盐析 | 第71-72页 |
| 6.2.4 木聚糖酶酶活特性研究 | 第72页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第72-76页 |
| 6.3.1 BSA标准曲线的绘制 | 第72-73页 |
| 6.3.2 木聚糖酶的分离纯化 | 第73-76页 |
| 6.3.2.1 硫酸铵分级盐析曲线 | 第73页 |
| 6.3.2.2 木聚糖酶的进一步分离纯化 | 第73-76页 |
| 6.4 酶学特性分析 | 第76-79页 |
| 6.4.1 木聚糖酶的最适温度及稳定性 | 第76-77页 |
| 6.4.2 木聚糖酶的最适pH及pH稳定性 | 第77-78页 |
| 6.4.3 金属离子对木聚糖酶的影响 | 第78-79页 |
| 6.5 小结 | 第79-80页 |
| 第7章 结论与展望 | 第80-82页 |
| 7.1 结论 | 第80-81页 |
| 7.2 展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-90页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91页 |
