黑曲霉产糖化酶合成培养基优化及代谢轮廓分析方法的初步探索
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-24页 |
| 1.1 糖化酶结构 | 第10-12页 |
| 1.2 培养基的优化 | 第12-13页 |
| 1.3 代谢组学的定义及发展 | 第13-14页 |
| 1.4 分析微生物代谢组学的流程 | 第14-20页 |
| 1.4.1 样品的预处理 | 第15-16页 |
| 1.4.2 分析平台 | 第16-19页 |
| 1.4.3 数据分析 | 第19-20页 |
| 1.5 代谢流分析 | 第20-22页 |
| 1.6 课题研究的目的、意义 | 第22-23页 |
| 1.7 研究的主要内容 | 第23-24页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第24-28页 |
| 2.1 菌种 | 第24页 |
| 2.2 培养基 | 第24-25页 |
| 2.2.1 摇瓶培养基 | 第24-25页 |
| 2.2.2 5L发酵罐培养基 | 第25页 |
| 2.3 实验仪器 | 第25-27页 |
| 2.3.1 5L发酵罐 | 第25-26页 |
| 2.3.2 其它设备 | 第26-27页 |
| 2.4 测定方法 | 第27-28页 |
| 2.4.1 pH的测定 | 第27页 |
| 2.4.2 葡萄糖的测定 | 第27页 |
| 2.4.3 菌体浓度 | 第27页 |
| 2.4.4 糖化酶 | 第27-28页 |
| 第3章 全合成培养基的构建及优化 | 第28-36页 |
| 3.1 引言 | 第28页 |
| 3.2 实验设计 | 第28-29页 |
| 3.2.1 不同种类的氮源 | 第28页 |
| 3.2.2 不同的碳氮比 | 第28页 |
| 3.2.3 不同浓度的磷源 | 第28页 |
| 3.2.4 金属离子的影响 | 第28-29页 |
| 3.3 培养方法 | 第29页 |
| 3.4 实验结果与分析 | 第29-34页 |
| 3.4.1 不同的氮源对糖化酶的影响 | 第29-30页 |
| 3.4.2 不同的碳氮比对糖化酶的影响 | 第30-31页 |
| 3.4.3 不同的磷浓度对糖化酶的影响 | 第31-32页 |
| 3.4.4 不同的金属离子对产酶的影响 | 第32-34页 |
| 3.5 本章小结 | 第34-36页 |
| 第4章 基于GC-MS代谢轮廓方法的探索 | 第36-52页 |
| 4.1 引言 | 第36页 |
| 4.2 实验方法 | 第36-38页 |
| 4.2.1 培养方法 | 第36页 |
| 4.2.2 标准样品溶液的制备 | 第36页 |
| 4.2.3 标准曲线的建立 | 第36-37页 |
| 4.2.4 样品的溶解方法 | 第37页 |
| 4.2.5 样品的衍生方法 | 第37页 |
| 4.2.6 灭活方法 | 第37页 |
| 4.2.7 提取方法 | 第37页 |
| 4.2.8 淬灭过程中的代谢物泄露 | 第37-38页 |
| 4.2.9 GC-MS分析条件 | 第38页 |
| 4.2.10 代谢物鉴定 | 第38页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第38-51页 |
| 4.3.1 溶解剂的选择 | 第38-39页 |
| 4.3.2 衍生剂的选择 | 第39-41页 |
| 4.3.3 不同灭活方法的影响 | 第41-43页 |
| 4.3.4 不同提取方法的影响 | 第43-44页 |
| 4.3.5 代谢物的泄露 | 第44-48页 |
| 4.3.6 方法的验证 | 第48-51页 |
| 4.4 本章小结 | 第51-52页 |
| 第5章 野生株和突变株的差异性研究 | 第52-64页 |
| 5.1 引言 | 第52页 |
| 5.2 实验方法 | 第52-53页 |
| 5.2.1 培养方法 | 第52-53页 |
| 5.2.2 胞内代谢物的测定 | 第53页 |
| 5.2.3 胞外有机酸的测定 | 第53页 |
| 5.3 实验结果与讨论 | 第53-63页 |
| 5.3.1 发酵过程 | 第53-55页 |
| 5.3.2 比速率的研究 | 第55-57页 |
| 5.3.3 代谢轮廓分析 | 第57-61页 |
| 5.3.4 代谢流的分析 | 第61-63页 |
| 5.4 本章小结 | 第63-64页 |
| 第6章 结论与展望 | 第64-66页 |
| 6.1 结论 | 第64-65页 |
| 6.2 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 附录1 | 第74-75页 |
| 附录2 | 第75-77页 |
