| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-16页 |
| 1.1 海藻糖的概述 | 第9-12页 |
| 1.1.1 海藻糖的结构与性质 | 第9页 |
| 1.1.2 海藻糖的功能 | 第9-10页 |
| 1.1.3 海藻糖的应用 | 第10-11页 |
| 1.1.4 海藻糖的制备途径 | 第11-12页 |
| 1.2 MTSase和MTHase的概述 | 第12-14页 |
| 1.2.1 MTSase和MTHase的来源与性质 | 第12-13页 |
| 1.2.2 MTSase和MTHase的结构 | 第13-14页 |
| 1.2.3 MTSase和MTHase的制备 | 第14页 |
| 1.3 立题依据及意义 | 第14-15页 |
| 1.4 本论文的主要研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 菌种、质粒与基因 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第16-17页 |
| 2.1.4 培养基 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-25页 |
| 2.2.1 重组大肠杆菌的构建 | 第17-20页 |
| 2.2.2 发酵方法 | 第20-21页 |
| 2.2.3 分析方法 | 第21-23页 |
| 2.2.4 双酶法制备海藻糖的酶转化工艺优化 | 第23-25页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第25-45页 |
| 3.1 Arthrobacter ramosus S34 MTSase、MTHase在E.coli BL21(DE3)中的异源表达和酶学性质研究 | 第25-30页 |
| 3.1.1 重组蛋白在E.coli BL21(DE3)中的异源表达 | 第25-27页 |
| 3.1.2 重组蛋白的酶学性质研究 | 第27-30页 |
| 3.2 重组E.coli BL21(DE3)/pET-24a-treY 3L罐发酵优化 | 第30-33页 |
| 3.2.1 诱导温度对E.coli BL21(DE3)/pET-24a-treY 3L罐发酵的影响 | 第30-31页 |
| 3.2.2 乳糖流加速度对E.coli BL21(DE3)/pET-24a-treY 3L罐发酵的影响 | 第31-33页 |
| 3.3 重组E.coli BL21(DE3)/pET-24a-treZ 3L罐发酵优化 | 第33-34页 |
| 3.3.1 诱导温度对E.coli BL21(DE3)/pET-24a-treZ 3L罐发酵的影响 | 第33页 |
| 3.3.2 乳糖流加速度对E.coli BL21(DE3)/pET-24a-treZ 3L罐发酵的影响 | 第33-34页 |
| 3.4 重组MTSase、MTHase制备海藻糖的研究 | 第34-37页 |
| 3.4.1 反应温度对底物转化率的影响 | 第34-35页 |
| 3.4.2 底物DE值对底物转化率的影响 | 第35页 |
| 3.4.3 初始pH对底物转化率的影响 | 第35-36页 |
| 3.4.4 加酶量对底物转化率的影响 | 第36-37页 |
| 3.4.5 底物浓度对底物转化率的影响 | 第37页 |
| 3.5 MTSase、MTHase在E.coli BL21(DE3)中的共表达 | 第37-45页 |
| 3.5.1 重组菌E.coli BL21(DE3)/pETDuet1treYtreZ与E.coli BL21(DE3)/pETDuet-1-treZtreY的构建与对比 | 第38-41页 |
| 3.5.2 E.coli BL21(DE3)/pETDuet1treYtreZ 3L罐发酵优化 | 第41-43页 |
| 3.5.3 共表达产物制备海藻糖的研究 | 第43-45页 |
| 主要结论与展望 | 第45-47页 |
| 主要结论 | 第45-46页 |
| 展望 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 附录A: 优化后treY、treZ基因序列 | 第53-55页 |
| 附录B: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55页 |
