| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第一部分 理论基础与研究现状 | 第14-28页 |
| 1. 黄连在2型糖尿病中应用的理论依据 | 第14-17页 |
| 1.1 病因病机依据 | 第14-15页 |
| 1.2 论治依据 | 第15页 |
| 1.3 现代药理学依据 | 第15-17页 |
| 1.3.1 降血糖 | 第16页 |
| 1.3.2 降血脂 | 第16页 |
| 1.3.3 抗炎作用 | 第16-17页 |
| 2. 脂肪免疫细胞与胰岛素抵抗关系的研究进展 | 第17-24页 |
| 2.1 巨噬细胞 | 第17-18页 |
| 2.1.1 巨噬细胞募集 | 第17-18页 |
| 2.1.2 巨噬细胞极化 | 第18页 |
| 2.2 肥大细胞 | 第18-19页 |
| 2.2.1 肥大细胞募集及炎性介质释放 | 第18-19页 |
| 2.2.2 肥大细胞调节脂肪组织血管生成 | 第19页 |
| 2.3 中性粒细胞 | 第19-20页 |
| 2.4 树突状细胞 | 第20页 |
| 2.5 嗜酸性粒细胞 | 第20页 |
| 2.6 B细胞 | 第20-21页 |
| 2.7 T细胞 | 第21-24页 |
| 2.7.1 CD8+T细胞 | 第21-22页 |
| 2.7.2 CD4+T细胞 | 第22-23页 |
| 2.7.3 调节性T细胞 | 第23页 |
| 2.7.4 自然杀伤T细胞 | 第23-24页 |
| 3. SIRT1与2型糖尿病的研究进展 | 第24-28页 |
| 3.1 SIRT1和糖代谢 | 第24-25页 |
| 3.2 SIRT1和脂代谢 | 第25-26页 |
| 3.3 SIRT1和胰岛素分泌 | 第26页 |
| 3.4 SIRT1和炎症反应 | 第26-28页 |
| 第二部分 实验部分 | 第28-52页 |
| 一、小檗碱对LPS诱导RAW264.7巨噬细胞炎症因子表达的影响 | 第28-36页 |
| 1. 材料 | 第28-29页 |
| 1.1 细胞 | 第28页 |
| 1.2 主要仪器 | 第28页 |
| 1.3 主要试剂 | 第28-29页 |
| 1.4 主要溶液的配制 | 第29页 |
| 2. 方法 | 第29-32页 |
| 2.1 药物及细胞培养基的配制 | 第29页 |
| 2.2 RAW264.7细胞复苏、培养及传代 | 第29页 |
| 2.3 MTT法测定不同浓度的小檗碱对RAW264.7的细胞毒性 | 第29-30页 |
| 2.4 荧光定量PCR检测炎症因子TNF-α,IL-6,MCP-1 | 第30-31页 |
| 2.4.1 炎症模型建立与实验分组处理 | 第30页 |
| 2.4.2 荧光定量PCR操作步骤 | 第30-31页 |
| 2.5 统计分析 | 第31-32页 |
| 3. 结果 | 第32-35页 |
| 3.1 细胞生长情况 | 第32页 |
| 3.2 不同浓度小檗碱对RAW264.7巨噬细胞毒性的影响 | 第32-33页 |
| 3.3 不同浓度小檗碱对巨噬细胞促炎因子TNF-α,IL-6和趋化因子MCP-1表达的影响 | 第33-35页 |
| 4. 小结 | 第35页 |
| 5. 讨论 | 第35-36页 |
| 二、小檗碱在不同状态下对RAW264.7巨噬细胞中SIRT1表达的影响 | 第36-41页 |
| 1. 材料 | 第36-37页 |
| 1.1 细胞 | 第36页 |
| 1.2 主要仪器 | 第36页 |
| 1.3 主要试剂 | 第36页 |
| 1.4 主要溶液的配制 | 第36-37页 |
| 2. 方法 | 第37-39页 |
| 2.1 药物及细胞培养基的配制 | 第37页 |
| 2.2 RAW264.7细胞培养及传代 | 第37页 |
| 2.3 炎症模型建立与实验分组处理 | 第37页 |
| 2.4 荧光定量PCR检测巨噬细胞中SIRT1基因的表达 | 第37-38页 |
| 2.5 蛋白免疫印迹法检测巨噬细胞中SIRT1蛋白的表达 | 第38-39页 |
| 2.6 统计分析 | 第39页 |
| 3. 结果 | 第39-40页 |
| 3.1 小檗碱在不同状态下对巨噬细胞中SIRT1基因表达的影响 | 第39-40页 |
| 3.2 小檗碱在不同状态下对巨噬细胞中SIRT1蛋白表达的影响 | 第40页 |
| 4. 小结 | 第40-41页 |
| 5. 讨论 | 第41页 |
| 三、小檗碱对SIRT1抑制的巨噬细胞促炎因子表达的影响 | 第41-52页 |
| 1. 材料 | 第41-42页 |
| 1.1 细胞 | 第41页 |
| 1.2 主要仪器 | 第41-42页 |
| 1.3 主要试剂 | 第42页 |
| 1.4 主要溶液的配制 | 第42页 |
| 2. 方法 | 第42-44页 |
| 2.1 药物及细胞培养基的配制 | 第42页 |
| 2.2 RAW264.7细胞培养及传代 | 第42页 |
| 2.3 炎症模型建立与实验分组处理 | 第42-43页 |
| 2.4 RNA干扰技术 | 第43页 |
| 2.5 荧光定量PCR检测巨噬细胞中SIRT1基因的表达 | 第43-44页 |
| 2.6 蛋白免疫印迹法检测巨噬细胞中SIRT1蛋白的表达 | 第44页 |
| 2.7 统计分析 | 第44页 |
| 3. 结果 | 第44-49页 |
| 3.1 小檗碱对抑制剂EX527预处理的巨噬细胞促炎因子和趋化因子表达的影响 | 第44-46页 |
| 3.2 小檗碱对SIRT1敲低的巨噬细胞促炎因子和趋化因子表达的影响 | 第46-49页 |
| 4. 小结 | 第49-50页 |
| 5. 讨论 | 第50-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附录 | 第59-60页 |
| 攻读硕士期间取得的学术成果 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
