| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 第一章 前言 | 第13-27页 |
| 1.1 果胶质 | 第13页 |
| 1.2 果胶酶 | 第13-18页 |
| 1.2.1 果胶酶分类 | 第14-15页 |
| 1.2.2 果胶酶来源 | 第15-16页 |
| 1.2.3 果胶酶发酵 | 第16页 |
| 1.2.4 果胶酶应用 | 第16-18页 |
| 1.3 Genome shuffling技术 | 第18-22页 |
| 1.3.1 Genome shuffling原理 | 第18页 |
| 1.3.2 Genome shuffling技术路线 | 第18-20页 |
| 1.3.3 Genome shuffling技术特点 | 第20-21页 |
| 1.3.4 Genome shuffling应用 | 第21-22页 |
| 1.4 碱性果胶酶的研究进展 | 第22-23页 |
| 1.5 rpsL基因 | 第23-24页 |
| 1.6 研究意义、研究内容及技术路线 | 第24-27页 |
| 1.6.1 研究意义 | 第24-25页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第25页 |
| 1.6.3 技术路线 | 第25-27页 |
| 第二章 枯草芽孢杆菌ZGL14诱变选育 | 第27-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 菌种 | 第27页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第27页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第27页 |
| 2.1.4 培养基 | 第27-28页 |
| 2.1.5 主要溶液配置 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-32页 |
| 2.2.1 对数期种子液制备 | 第28-29页 |
| 2.2.2 筛选方法 | 第29页 |
| 2.2.3 遗传稳定性研究 | 第29页 |
| 2.2.4 紫外(UV)诱变效果研究 | 第29页 |
| 2.2.5 抗生素诱变效果研究 | 第29-30页 |
| 2.2.6 紫外—链霉素_(20)复合诱变 | 第30页 |
| 2.2.7 ~(60)Co-γ—链霉素_(20)复合诱变 | 第30页 |
| 2.2.8 种子液、发酵液培养方法 | 第30页 |
| 2.2.9 碱性果胶酶酶活测定 | 第30-31页 |
| 2.2.10 致死率与正突变率 | 第31-32页 |
| 2.3 结果和分析 | 第32-36页 |
| 2.3.1 葡萄糖标准曲线 | 第32页 |
| 2.3.2 紫外诱变结果分析 | 第32-33页 |
| 2.3.3 氨苄青霉素钠诱变结果分析 | 第33-34页 |
| 2.3.4 氯霉素诱变结果分析 | 第34-35页 |
| 2.3.5 链霉素抗性诱变结果分析 | 第35页 |
| 2.3.6 紫外—链霉素_(20)复合诱变 | 第35页 |
| 2.3.7 ~(60)Co-γ—链霉素_(20)复合诱变 | 第35-36页 |
| 2.4 讨论 | 第36-37页 |
| 2.5 小结 | 第37-39页 |
| 第三章 原生质体制备、再生与灭活条件研究 | 第39-51页 |
| 3.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 3.1.1 菌种 | 第39页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 3.1.3 培养基 | 第39页 |
| 3.1.4 主要试剂配置 | 第39-40页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第40页 |
| 3.2 实验方法 | 第40-42页 |
| 3.2.1 菌种的活化 | 第40页 |
| 3.2.2 枯草芽孢杆菌ZGL14生长曲线的测定 | 第40页 |
| 3.2.3 原生质体制备的影响因素 | 第40-41页 |
| 3.2.4 原生质体再生的影响因素 | 第41页 |
| 3.2.5 原生质体灭活条件的研究 | 第41-42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-49页 |
| 3.3.1 枯草芽孢杆菌ZGL14生长曲线 | 第42-43页 |
| 3.3.2 原生质体制备条件的研究 | 第43-47页 |
| 3.3.3 原生质体再生条件的研究 | 第47-48页 |
| 3.3.4 原生质体灭活条件的研究 | 第48-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-50页 |
| 3.5 小结 | 第50-51页 |
| 第四章 基因组改组选育碱性果胶酶高产菌株及发酵条件优化 | 第51-67页 |
| 4.1 实验材料 | 第51-52页 |
| 4.1.1 菌种 | 第51页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第51页 |
| 4.1.3 培养基 | 第51-52页 |
| 4.1.4 主要试剂配置 | 第52页 |
| 4.1.5 主要仪器 | 第52页 |
| 4.2 实验方法 | 第52-55页 |
| 4.2.1 原生质体制备 | 第52-53页 |
| 4.2.2 原生质体灭活 | 第53页 |
| 4.2.3 原生质体融合 | 第53页 |
| 4.2.4 基因组改组 | 第53页 |
| 4.2.5 重组菌发酵条件优化 | 第53-54页 |
| 4.2.6 响应面优化 | 第54-55页 |
| 4.2.7 种子液、发酵液培养方法 | 第55页 |
| 4.2.8 碱性果胶酶酶活测定 | 第55页 |
| 4.3 结果分析 | 第55-65页 |
| 4.3.1 基因组重排结果 | 第55-57页 |
| 4.3.2 高产重组菌株105发酵条件优化 | 第57-60页 |
| 4.3.3 重组菌株105发酵响应面优化 | 第60-65页 |
| 4.4 讨论 | 第65-66页 |
| 4.5 小结 | 第66-67页 |
| 第五章 核糖体S12蛋白基因序列分析 | 第67-75页 |
| 5.1 实验材料 | 第67-68页 |
| 5.1.1 菌种 | 第67页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第67页 |
| 5.1.3 主要仪器 | 第67页 |
| 5.1.4 培养基 | 第67-68页 |
| 5.2 实验方法 | 第68-69页 |
| 5.2.1 培养方法 | 第68页 |
| 5.2.2 引物设计 | 第68页 |
| 5.2.3 ZGL14和重组菌105基因组DNA提取 | 第68页 |
| 5.2.4 核糖体S12蛋白基因PCR扩增 | 第68-69页 |
| 5.3 结果分析 | 第69-72页 |
| 5.3.1 ZGL14和重组菌株105基因组与rpsL基因电泳结果分析 | 第69页 |
| 5.3.2 rpsL基因序列和蛋白序列结果分析 | 第69-72页 |
| 5.4 讨论 | 第72-73页 |
| 5.5 小结 | 第73-75页 |
| 第六章 结论与展望 | 第75-77页 |
| 6.1 结论 | 第75页 |
| 6.2 展望 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-85页 |
| 致谢 | 第85-87页 |
