假单胞菌Lip35低温脂肪酶分离纯化及酶学性质研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 引言 | 第9-23页 |
| ·低温微生物研究进展概述 | 第9-11页 |
| ·低温微生物的来源和分布 | 第9-10页 |
| ·低温微生物的特点 | 第10页 |
| ·低温微生物国内外研究现状及应用前景 | 第10-11页 |
| ·低温酶研究简介 | 第11-13页 |
| ·低温酶的来源 | 第12页 |
| ·低温酶的适冷机制 | 第12-13页 |
| ·低温酶在应用上的优势 | 第13页 |
| ·低温脂肪酶研究 | 第13-21页 |
| ·脂肪酶的来源及分类 | 第14页 |
| ·脂肪酶的分子结构及催化特征 | 第14-17页 |
| ·低温脂肪酶的特点 | 第17-19页 |
| ·低温脂肪酶的研究热点及方法 | 第19-20页 |
| ·低温脂肪酶的国内外研究现状 | 第20页 |
| ·低温脂肪酶的应用前景及研究意义 | 第20-21页 |
| ·本研究的主要内容和总体目标 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-30页 |
| ·试验材料 | 第23-24页 |
| ·试验菌株 | 第23页 |
| ·主要培养基 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·主要仪器设备 | 第23-24页 |
| ·低温脂肪酶的发酵试验 | 第24页 |
| ·菌种活化 | 第24页 |
| ·低温脂肪酶的10L发酵罐发酵试验 | 第24页 |
| ·低温脂肪酶的纯化 | 第24-26页 |
| ·粗酶液的制备 | 第24-25页 |
| ·超滤浓缩除杂 | 第25页 |
| ·硫酸铵分级盐析 | 第25页 |
| ·Sephadex G-25脱盐 | 第25页 |
| ·离子交换层析 | 第25页 |
| ·分子筛层析 | 第25-26页 |
| ·PAGE电泳鉴定 | 第26页 |
| ·分析测定方法 | 第26-27页 |
| ·溶性蛋白的测定 | 第26-27页 |
| ·脂肪酶活性测定方法 | 第27页 |
| ·低温脂肪酶酶学性质的测定 | 第27-30页 |
| ·温度对酶活性的影响 | 第27-28页 |
| ·酶的热稳定性 | 第28页 |
| ·pH对酶活性的影响 | 第28页 |
| ·酶的pH耐受性 | 第28页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第28页 |
| ·其他试剂对酶活的影响 | 第28页 |
| ·低温脂肪酶动力学常数测定 | 第28-29页 |
| ·低温脂肪酶分子量的测定 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-42页 |
| ·低温脂肪酶的10L发酵罐发酵试验 | 第30页 |
| ·低温脂肪酶的分离纯化 | 第30-35页 |
| ·超滤 | 第30-31页 |
| ·硫酸铵分级盐析 | 第31页 |
| ·脱盐 | 第31页 |
| ·离子交换层析 | 第31-32页 |
| ·分子筛层析 | 第32-33页 |
| ·PAGE电泳鉴定 | 第33页 |
| ·酶的分离纯化结果 | 第33-35页 |
| ·酶学性质 | 第35-42页 |
| ·温度对酶活性的影响 | 第35-36页 |
| ·酶的热稳定性 | 第36页 |
| ·pH对酶活力的影响 | 第36-37页 |
| ·低温脂肪酶蛋白的pH耐受性 | 第37-38页 |
| ·金属离子对酶活性的影响 | 第38-39页 |
| ·Ca~(2+)对酶热稳定性的影响 | 第39页 |
| ·其他试剂对酶活的影响 | 第39-40页 |
| ·低温脂肪酶动力学常数测定 | 第40-41页 |
| ·低温脂肪酶分子量的测定 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| ·假单胞菌Lip35低温脂肪酶的分离纯化 | 第42-43页 |
| ·低温脂肪酶的酶学性质分析 | 第43-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第51-52页 |
| 作者简历 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
