| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 英文缩写表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 前言 | 第13页 |
| 1.1 TTX的起源及分布 | 第13-16页 |
| 1.1.1 内因起源假说 | 第13-14页 |
| 1.1.2 外因起源假说 | 第14-16页 |
| 1.2 TTX的结构性质及其衍生物 | 第16-18页 |
| 1.3 TTX的中毒及治疗 | 第18-19页 |
| 1.3.1 TTX的毒理作用 | 第18-19页 |
| 1.3.2 TTX中毒的治疗 | 第19页 |
| 1.4 TTX的药用价值 | 第19-20页 |
| 1.5 TTX的检测方法 | 第20-21页 |
| 1.6 研究意义及展望 | 第21-23页 |
| 第二章 TTX多抗血清的制备与检测 | 第23-38页 |
| 引言 | 第23页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-28页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.1.1 主要仪器设备 | 第23页 |
| 2.1.1.2 主要试剂与动物 | 第23页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第23-28页 |
| 2.1.2.1 动物免疫 | 第23-24页 |
| 2.1.2.2 抗血清的采集 | 第24页 |
| 2.1.2.3 间接酶联免疫吸附(iELISA) | 第24-25页 |
| 2.1.2.4 最佳HRP-IgG酶标二抗的确定 | 第25-26页 |
| 2.1.2.5 包被原与抗血清的确定 | 第26页 |
| 2.1.2.6 最佳封闭液的选择 | 第26-27页 |
| 2.1.2.7 一抗稀释液的选择 | 第27页 |
| 2.1.2.8 绘制竞争标准曲线 | 第27页 |
| 2.1.2.9 样品TTX的提取 | 第27-28页 |
| 2.1.2.10 加标样品回收率和变异系数的测定 | 第28页 |
| 2.2 实验结果 | 第28-36页 |
| 2.2.1 免疫抗原的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.2 血清效价的检测 | 第29-30页 |
| 2.2.3 最佳HRP-IgG酶标二抗的确定 | 第30-31页 |
| 2.2.4 最佳包被抗原与抗血清的确定 | 第31页 |
| 2.2.5 最佳封闭液的选择 | 第31-32页 |
| 2.2.6 一抗稀释液的选择 | 第32-33页 |
| 2.2.7 标准曲线的绘制 | 第33-35页 |
| 2.2.8 加标样品的检测 | 第35-36页 |
| 2.3 讨论 | 第36-38页 |
| 2.3.1 动物的选择 | 第36页 |
| 2.3.2 关于免疫 | 第36页 |
| 2.3.3 关于封闭与洗涤 | 第36-37页 |
| 2.3.4 关于TTX的ELISA检测方法 | 第37页 |
| 2.3.5 关于标准曲线的拟合 | 第37-38页 |
| 第三章 TTX单克隆抗体的制备与鉴定 | 第38-54页 |
| 引言 | 第38页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第38-44页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.1.1.1 主要仪器设备 | 第38页 |
| 3.1.1.2 主要试剂与动物 | 第38-39页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第39-44页 |
| 3.1.2.1 细胞的复苏 | 第39页 |
| 3.1.2.2 细胞冻存 | 第39页 |
| 3.1.2.3 饲养细胞的制备 | 第39-40页 |
| 3.1.2.4 骨髓瘤细胞的制备 | 第40页 |
| 3.1.2.5 脾细胞的制备 | 第40页 |
| 3.1.2.6 细胞融合 | 第40页 |
| 3.1.2.7 细胞克隆化 | 第40-41页 |
| 3.1.2.8 细胞染色体分析 | 第41-42页 |
| 3.1.2.9 McAb亚类的鉴定 | 第42页 |
| 3.1.2.10 抗体亲和力的测定 | 第42页 |
| 3.1.2.11 小鼠体内诱生抗体 | 第42页 |
| 3.1.2.12 抗体的纯化 | 第42-43页 |
| 3.1.2.13 SDS-PAGE检测抗体 | 第43页 |
| 3.1.2.14 蛋白浓度的测定 | 第43页 |
| 3.1.2.15 抗体特异性的测定 | 第43-44页 |
| 3.2 结果与分析 | 第44-51页 |
| 3.2.1 细胞融合与筛选 | 第44-47页 |
| 3.2.2 细胞染色体分析 | 第47页 |
| 3.2.3 McAb亚类的鉴定 | 第47-48页 |
| 3.2.4 抗体的纯化结果 | 第48-49页 |
| 3.2.5 抗体特异性的测定 | 第49-50页 |
| 3.2.6 抗体亲和力的测定 | 第50-51页 |
| 3.3 讨论 | 第51-54页 |
| 3.3.1 关于细胞的融合与筛选 | 第51-52页 |
| 3.3.2 关于细胞亚克隆 | 第52页 |
| 3.3.3 关于体内诱生腹水型抗体 | 第52页 |
| 3.3.4 关于McAb的纯化 | 第52-54页 |
| 全文总结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 附录 | 第59-63页 |
| 附录1 培养基的配制 | 第59-60页 |
| 附录2 ELISA试剂的配制 | 第60-61页 |
| 附录3 SDS-PAGE凝胶电泳试剂的配制 | 第61页 |
| 附录4 SDS-PAGE凝胶电泳分离胶与浓缩胶的配制 | 第61-62页 |
| 附录5 透析袋的处理 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |