摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
引言 | 第11-22页 |
第一章 黄瓜绿斑驳花叶病毒检测技术研究 | 第22-36页 |
·材料与方法 | 第22-28页 |
·材料 | 第22-23页 |
·毒源 | 第22-23页 |
·寄主植物 | 第23页 |
·仪器及试剂 | 第23-24页 |
·仪器 | 第23页 |
·试剂 | 第23页 |
·引物及探针设计 | 第23-24页 |
·方法 | 第24-28页 |
·病毒接种 | 第24页 |
·双抗体夹心-酶联免疫吸附法 | 第24-25页 |
·病毒RNA的提取 | 第25-26页 |
·RT-PCR方法及特异性 | 第26页 |
·实时荧光RT-PCR(Real-time RT-PCR)方法及其特异性 | 第26页 |
·免疫捕获RT-PCR | 第26页 |
·免疫磁珠RT-PCR | 第26-27页 |
·免疫磁珠包被抗体最适浓度的确定 | 第27-28页 |
·不同方法灵敏度试验 | 第28页 |
·结果 | 第28-34页 |
·生物接种得到发病种子 | 第28-29页 |
·RT-PCR方法及特异性 | 第29页 |
·实时荧光RT-PCR方法及特异性 | 第29-30页 |
·DAS-ELISA检测灵敏度 | 第30-31页 |
·RT-PCR检测灵敏度 | 第31页 |
·实时荧光RT-PCR检测灵敏度 | 第31-32页 |
·免疫捕获RT-PCR检测灵敏度 | 第32-33页 |
·免疫磁珠包被抗体浓度确定 | 第33-34页 |
·免疫磁珠RT-PCR的灵敏度 | 第34页 |
·结论与讨论 | 第34-36页 |
第二章 烟草环斑病毒的检测与研究 | 第36-45页 |
·材料与方法 | 第36-39页 |
·材料 | 第36页 |
·仪器及试剂 | 第36-37页 |
·仪器 | 第36页 |
·试剂 | 第36页 |
·引物设计 | 第36-37页 |
·试验方法 | 第37-39页 |
·病毒接种 | 第37页 |
·双抗体夹心-酶联免疫吸附法 | 第37页 |
·病毒RNA的提取 | 第37页 |
·RT-PCR方法及特异性 | 第37-38页 |
·SYBR Green PCR 检测方法 | 第38页 |
·免疫捕获RT-PCR | 第38-39页 |
·结果 | 第39-44页 |
·生物接种获得发病种子 | 第39-40页 |
·RT-PCR和IC-RT-PCR方法及特异性 | 第40-41页 |
·SYBR Green PCR检测方法特异性 | 第41页 |
·DAS-ELISA检测灵敏度 | 第41-42页 |
·RT-PCR检测灵敏度 | 第42-43页 |
·SYBR Green PCR检测灵敏度 | 第43页 |
·免疫捕获RT-PCR的灵敏度 | 第43-44页 |
·结论与讨论 | 第44-45页 |
第三章 黄瓜黑星病菌检测方法研究 | 第45-55页 |
·材料与方法 | 第45-48页 |
·材料 | 第45页 |
·供试菌种 | 第45页 |
·培养基 | 第45页 |
·仪器及试剂 | 第45-46页 |
·仪器及器具 | 第45页 |
·试剂 | 第45页 |
·引物设计 | 第45-46页 |
·方法 | 第46-48页 |
·病菌培养 | 第46页 |
·显微镜观察 | 第46页 |
·病菌接种 | 第46-47页 |
·DNA提取 | 第47页 |
·PCR检测方法 | 第47-48页 |
·结果 | 第48-53页 |
·病原菌形态观察 | 第48-50页 |
·接种试验 | 第50页 |
·几对引物的PCR检测 | 第50-51页 |
·PCR引物特异性试验 | 第51-53页 |
·引物Cc-F/R-560和Cc-F/R-310特异性试验 | 第51-52页 |
·引物ITS4/5特异性试验 | 第52页 |
·巢式PCR引物Cc-W-F/R和Cc-N-F/R特异性试验 | 第52-53页 |
·Cc-F\R引物灵敏度试验 | 第53页 |
·结论与讨论 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
附录 | 第60-62页 |
致谢 | 第62页 |