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地衣芽孢杆菌ZJU0107热稳定性β-葡聚糖酶的酶学特性及其在啤酒生产中的应用

中文摘要第11-13页
1 文献综述第13-29页
    1.1 大麦β-葡聚糖的结构和性质第13-15页
    1.2 麦芽中水解大麦β-葡聚糖的相关酶系第15-18页
        1.2.1 1,3-1,4-β-葡聚糖内水解酶第15-17页
        1.2.2 1,3-1,4-β-葡聚糖外水解酶第17页
        1.2.3 大麦β-葡聚糖酶分子结构及催化活性位点第17-18页
    1.3 大麦β-葡聚糖的负面影响第18-19页
        1.3.1 对啤酒酿造的影响第18-19页
        1.3.2 在饲料中的抗营养性第19页
    1.4 β-葡聚糖酶研究概况第19-20页
    1.5 微生物源β-1,3-1,4-葡聚糖酶研究进展第20-27页
        1.5.1 产1,3-1,4-β-葡聚糖酶的微生物及其酶基因结构第21-22页
        1.5.2 芽孢杆菌内β-1,3-1,4-葡聚糖酶诱导性表达机理第22-23页
        1.5.3 β-1,3-1,4-葡聚糖酶催化水解机理第23-25页
        1.5.4 酶基因的外源性表达第25-26页
        1.5.5 1,3-1,4-β-葡聚糖酶热稳定性研究第26-27页
    1.6 酶制剂在食饮品工业应用中的安全问题第27-28页
        1.6.1 食饮品工业用酶的来源第27页
        1.6.2 酶制剂来源安全性的评估标准第27-28页
        1.6.3 食饮品用微生物酶制剂的安全问题及应对措施第28页
    1.7 选题依据和达到的预期目标第28-29页
2 热稳定性β-葡聚糖酶菌种选育及培养基和发酵条件优化第29-40页
    2.1 材料与方法第30-33页
        2.1.1 主要试剂和仪器第30页
        2.1.2 培养基第30页
        2.1.3 发酵条件第30页
        2.1.4 菌种分离第30页
        2.1.5 菌种鉴定方法第30页
        2.1.6 菌种选育方法第30-31页
        2.1.7 酶活力测定方法第31-32页
        2.1.8 生物量测定方法第32页
        2.1.9 糖含量测定方法第32页
        2.1.10 产酶培养基配方及发酵条件研究第32-33页
        2.1.11 试验设计和数据分析第33页
    2.2 结果和分析第33-38页
        2.2.1 菌种分离与筛选第33-34页
        2.2.2 菌种鉴定第34页
        2.2.3 菌种选育第34-35页
        2.2.4 β-葡聚糖对β-葡聚糖酶的诱导作用第35页
        2.2.5 菌株ZJU0107产β-葡聚糖酶的条件优化第35-37页
        2.2.6 发酵条件优化第37-38页
        2.2.7 菌株ZJU0107发酵产酶过程第38页
    2.3 讨论第38-40页
3 热稳定性β-葡聚糖酶的纯化、酶学性质及酶促反应动力学第40-49页
    3.1 材料与方法第40-41页
        3.1.1 供试菌株、培养基和培养方法第40页
        3.1.2 主要试剂和仪器第40页
        3.1.3 β-葡聚酶活性测定方法第40页
        3.1.4 蛋白质含量测定方法第40-41页
        3.1.5 β-葡聚糖酶的纯化第41页
        3.1.6 SDS-PAGE凝胶电泳第41页
        3.1.7 等电聚焦第41页
        3.1.8 酶促反应动力学第41页
    3.2 结果与分析第41-48页
        3.2.1 硫酸铵分步盐析浓度的确定第41-42页
        3.2.2 β-1,3-1,4-葡聚糖酶纯化第42-43页
        3.2.3 β-1,3-1,4-葡聚糖酶分子量和等电点第43页
        3.2.4 酶的底物专一性第43-44页
        3.2.5 pH对β-1,3-1,4-葡聚糖酶活性的影响及酶的pH稳定性第44-45页
        3.2.6 反应温度对β-1,3-1,4-葡聚糖酶活性的影响及其热稳定性第45页
        3.2.7 金属离子对β-葡聚糖酶活性的影响第45-46页
        3.2.8 酶促反应动力学第46-48页
    3.3 结论第48-49页
4 酶的下游提取工艺研究和酶的浓缩第49-59页
    4.1 材料与方法第50-52页
        4.1.1 材料第50页
        4.1.2 粗酶液制备第50页
        4.1.3 双水相体系制备第50-51页
        4.1.4 酶的超滤浓缩第51-52页
    4.2 结果与讨论第52-58页
        4.2.1 PEG成相盐及相图第52页
        4.2.2 PEG相对分子量对萃取的影响第52-53页
        4.2.3 PEG6000浓度对萃取的影响第53-54页
        4.2.4 NaH_2PO_4-K_2HPO_4浓度对萃取的影响第54页
        4.2.5 pH对萃取的影响第54-55页
        4.2.6 NaCl浓度对萃取的影响第55-56页
        4.2.7 芽孢杆菌ZJU0107全发酵液中酶的分配行为第56-57页
        4.2.8 β-葡聚糖酶的反萃第57页
        4.2.9 酶的超滤浓缩第57-58页
    4.3 结论第58-59页
5 β-葡聚糖酶应用试验报告第59-65页
    5.1 材料与方法第60-61页
        5.1.1 酶制剂第60页
        5.1.2 麦芽第60页
        5.1.3 酒花第60页
        5.1.4 酵母第60页
        5.1.5 大米第60页
        5.1.6 大麦β-葡聚糖第60页
        5.1.7 分析方法第60-61页
        5.1.8 麦芽糖化方法第61页
    5.2 结果与分析第61-62页
        5.2.1 协定法糖化实验第61页
        5.2.2 糖化小试第61-62页
        5.2.3 生产应用试验第62页
    5.3 结论第62-65页
6 总讨论与展望第65-69页
    6.1 菌种筛选以及培养基和发酵条件的优化第65-66页
    6.2 β-葡聚糖酶的纯化和酶学性质研究第66页
    6.3 酶的下游提取工艺研究第66-67页
    6.4 β-葡聚糖酶在啤酒生产中的应用试验第67页
    6.5 本研究的创新点第67-68页
    6.6 展望第68-69页
参考文献第69-78页
英文摘要第78页

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