中文摘要 | 第11-13页 |
1 文献综述 | 第13-29页 |
1.1 大麦β-葡聚糖的结构和性质 | 第13-15页 |
1.2 麦芽中水解大麦β-葡聚糖的相关酶系 | 第15-18页 |
1.2.1 1,3-1,4-β-葡聚糖内水解酶 | 第15-17页 |
1.2.2 1,3-1,4-β-葡聚糖外水解酶 | 第17页 |
1.2.3 大麦β-葡聚糖酶分子结构及催化活性位点 | 第17-18页 |
1.3 大麦β-葡聚糖的负面影响 | 第18-19页 |
1.3.1 对啤酒酿造的影响 | 第18-19页 |
1.3.2 在饲料中的抗营养性 | 第19页 |
1.4 β-葡聚糖酶研究概况 | 第19-20页 |
1.5 微生物源β-1,3-1,4-葡聚糖酶研究进展 | 第20-27页 |
1.5.1 产1,3-1,4-β-葡聚糖酶的微生物及其酶基因结构 | 第21-22页 |
1.5.2 芽孢杆菌内β-1,3-1,4-葡聚糖酶诱导性表达机理 | 第22-23页 |
1.5.3 β-1,3-1,4-葡聚糖酶催化水解机理 | 第23-25页 |
1.5.4 酶基因的外源性表达 | 第25-26页 |
1.5.5 1,3-1,4-β-葡聚糖酶热稳定性研究 | 第26-27页 |
1.6 酶制剂在食饮品工业应用中的安全问题 | 第27-28页 |
1.6.1 食饮品工业用酶的来源 | 第27页 |
1.6.2 酶制剂来源安全性的评估标准 | 第27-28页 |
1.6.3 食饮品用微生物酶制剂的安全问题及应对措施 | 第28页 |
1.7 选题依据和达到的预期目标 | 第28-29页 |
2 热稳定性β-葡聚糖酶菌种选育及培养基和发酵条件优化 | 第29-40页 |
2.1 材料与方法 | 第30-33页 |
2.1.1 主要试剂和仪器 | 第30页 |
2.1.2 培养基 | 第30页 |
2.1.3 发酵条件 | 第30页 |
2.1.4 菌种分离 | 第30页 |
2.1.5 菌种鉴定方法 | 第30页 |
2.1.6 菌种选育方法 | 第30-31页 |
2.1.7 酶活力测定方法 | 第31-32页 |
2.1.8 生物量测定方法 | 第32页 |
2.1.9 糖含量测定方法 | 第32页 |
2.1.10 产酶培养基配方及发酵条件研究 | 第32-33页 |
2.1.11 试验设计和数据分析 | 第33页 |
2.2 结果和分析 | 第33-38页 |
2.2.1 菌种分离与筛选 | 第33-34页 |
2.2.2 菌种鉴定 | 第34页 |
2.2.3 菌种选育 | 第34-35页 |
2.2.4 β-葡聚糖对β-葡聚糖酶的诱导作用 | 第35页 |
2.2.5 菌株ZJU0107产β-葡聚糖酶的条件优化 | 第35-37页 |
2.2.6 发酵条件优化 | 第37-38页 |
2.2.7 菌株ZJU0107发酵产酶过程 | 第38页 |
2.3 讨论 | 第38-40页 |
3 热稳定性β-葡聚糖酶的纯化、酶学性质及酶促反应动力学 | 第40-49页 |
3.1 材料与方法 | 第40-41页 |
3.1.1 供试菌株、培养基和培养方法 | 第40页 |
3.1.2 主要试剂和仪器 | 第40页 |
3.1.3 β-葡聚酶活性测定方法 | 第40页 |
3.1.4 蛋白质含量测定方法 | 第40-41页 |
3.1.5 β-葡聚糖酶的纯化 | 第41页 |
3.1.6 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第41页 |
3.1.7 等电聚焦 | 第41页 |
3.1.8 酶促反应动力学 | 第41页 |
3.2 结果与分析 | 第41-48页 |
3.2.1 硫酸铵分步盐析浓度的确定 | 第41-42页 |
3.2.2 β-1,3-1,4-葡聚糖酶纯化 | 第42-43页 |
3.2.3 β-1,3-1,4-葡聚糖酶分子量和等电点 | 第43页 |
3.2.4 酶的底物专一性 | 第43-44页 |
3.2.5 pH对β-1,3-1,4-葡聚糖酶活性的影响及酶的pH稳定性 | 第44-45页 |
3.2.6 反应温度对β-1,3-1,4-葡聚糖酶活性的影响及其热稳定性 | 第45页 |
3.2.7 金属离子对β-葡聚糖酶活性的影响 | 第45-46页 |
3.2.8 酶促反应动力学 | 第46-48页 |
3.3 结论 | 第48-49页 |
4 酶的下游提取工艺研究和酶的浓缩 | 第49-59页 |
4.1 材料与方法 | 第50-52页 |
4.1.1 材料 | 第50页 |
4.1.2 粗酶液制备 | 第50页 |
4.1.3 双水相体系制备 | 第50-51页 |
4.1.4 酶的超滤浓缩 | 第51-52页 |
4.2 结果与讨论 | 第52-58页 |
4.2.1 PEG成相盐及相图 | 第52页 |
4.2.2 PEG相对分子量对萃取的影响 | 第52-53页 |
4.2.3 PEG6000浓度对萃取的影响 | 第53-54页 |
4.2.4 NaH_2PO_4-K_2HPO_4浓度对萃取的影响 | 第54页 |
4.2.5 pH对萃取的影响 | 第54-55页 |
4.2.6 NaCl浓度对萃取的影响 | 第55-56页 |
4.2.7 芽孢杆菌ZJU0107全发酵液中酶的分配行为 | 第56-57页 |
4.2.8 β-葡聚糖酶的反萃 | 第57页 |
4.2.9 酶的超滤浓缩 | 第57-58页 |
4.3 结论 | 第58-59页 |
5 β-葡聚糖酶应用试验报告 | 第59-65页 |
5.1 材料与方法 | 第60-61页 |
5.1.1 酶制剂 | 第60页 |
5.1.2 麦芽 | 第60页 |
5.1.3 酒花 | 第60页 |
5.1.4 酵母 | 第60页 |
5.1.5 大米 | 第60页 |
5.1.6 大麦β-葡聚糖 | 第60页 |
5.1.7 分析方法 | 第60-61页 |
5.1.8 麦芽糖化方法 | 第61页 |
5.2 结果与分析 | 第61-62页 |
5.2.1 协定法糖化实验 | 第61页 |
5.2.2 糖化小试 | 第61-62页 |
5.2.3 生产应用试验 | 第62页 |
5.3 结论 | 第62-65页 |
6 总讨论与展望 | 第65-69页 |
6.1 菌种筛选以及培养基和发酵条件的优化 | 第65-66页 |
6.2 β-葡聚糖酶的纯化和酶学性质研究 | 第66页 |
6.3 酶的下游提取工艺研究 | 第66-67页 |
6.4 β-葡聚糖酶在啤酒生产中的应用试验 | 第67页 |
6.5 本研究的创新点 | 第67-68页 |
6.6 展望 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-78页 |
英文摘要 | 第78页 |