| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-20页 |
| 1.1 课题的研究背景与目的意义 | 第11页 |
| 1.2 开菲尔粒中的微生物 | 第11-13页 |
| 1.2.1 开菲尔粒微生物的多样性 | 第11-13页 |
| 1.2.2 开菲尔粒中微生物的分布 | 第13页 |
| 1.3 开菲尔粒中菌体的聚集能力 | 第13-14页 |
| 1.4 开菲尔粒生物膜的研究 | 第14-17页 |
| 1.4.1 生物膜的形成过程 | 第14页 |
| 1.4.2 生物膜的鉴定方法 | 第14-15页 |
| 1.4.3 开菲尔粒菌体生物膜的形成 | 第15页 |
| 1.4.4 生物膜形成的影响因素 | 第15-17页 |
| 1.5 开菲尔粒成粒的研究 | 第17-18页 |
| 1.5.1 人工模拟合成开菲尔粒 | 第17页 |
| 1.5.2 开菲尔粒形成过程的假设 | 第17-18页 |
| 1.6 课题主要研究内容 | 第18页 |
| 1.7 技术路线 | 第18-20页 |
| 第2章 材料和方法 | 第20-34页 |
| 2.1 材料及仪器 | 第20-22页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第21页 |
| 2.1.3 开菲尔粒来源及活化 | 第21-22页 |
| 2.2 不同来源开菲尔粒的对比 | 第22-24页 |
| 2.2.1 开菲尔粒结构的观察 | 第22页 |
| 2.2.2 开菲尔粒增殖率的测定 | 第22页 |
| 2.2.3 开菲尔粒发酵特性和开菲尔多糖产量的测定 | 第22-23页 |
| 2.2.4 开菲尔粒生物膜形成能力的测定 | 第23-24页 |
| 2.2.5 开菲尔粒生物膜形成最佳天数的确定及微观结构的观察 | 第24页 |
| 2.3 生物膜形成过程的观察 | 第24页 |
| 2.3.1 生物膜形成过程中活菌数与死菌数变化 | 第24页 |
| 2.3.2 生物膜形成过程中多糖与蛋白质含量的变化 | 第24页 |
| 2.4 高通量法分析开菲尔粒及开菲尔粒生物膜上微生物多样性 | 第24-27页 |
| 2.4.1 开菲尔粒及开菲尔粒生物膜上基因组的提取 | 第24-25页 |
| 2.4.2 PCR扩增 | 第25-26页 |
| 2.4.3 PCR产物检测与回收 | 第26-27页 |
| 2.4.4 上机测序及数据分析 | 第27页 |
| 2.5 生物膜上微生物的分离鉴定 | 第27-28页 |
| 2.6 分离自生物膜上微生物生物膜形成能力的测定 | 第28-29页 |
| 2.6.1 微生物生长曲线的测定 | 第28页 |
| 2.6.2 微生物疏水性的测定 | 第28页 |
| 2.6.3 微生物zeta电位的测定 | 第28页 |
| 2.6.4 微生物自聚集和共聚集能力的测定 | 第28-29页 |
| 2.6.5 微生物生物膜形成能力的测定 | 第29页 |
| 2.7 影响生物膜增长因素的实验 | 第29-32页 |
| 2.7.1 单因素实验 | 第29-30页 |
| 2.7.2 Plaekett-Burman实验 | 第30-31页 |
| 2.7.3 最陡爬坡实验 | 第31页 |
| 2.7.4 Box-Behnken Design实验设计和响应面分析 | 第31-32页 |
| 2.7.5 验证实验 | 第32页 |
| 2.8 数据处理及绘图 | 第32-34页 |
| 第3章 不同来源开菲尔粒生物膜形成的对比 | 第34-45页 |
| 3.1 不同来源开菲尔粒结构的观察 | 第34-35页 |
| 3.2 不同来源开菲尔粒增殖率的测定 | 第35-36页 |
| 3.3 不同来源开菲尔粒发酵特性和开菲尔多糖产量的测定 | 第36-38页 |
| 3.3.1 不同来源开菲尔粒发酵特性的测定 | 第36-38页 |
| 3.3.2 不同来源开菲尔粒开菲尔多糖产量的测定 | 第38页 |
| 3.4 不同来源开菲尔粒生物膜形成能力的鉴定 | 第38-39页 |
| 3.5 生物膜形成最佳天数的确定 | 第39-40页 |
| 3.5.1 培养不同天数对生物膜形成能力的影响 | 第39页 |
| 3.5.2 生物膜上活菌数的测定 | 第39-40页 |
| 3.6 开菲尔粒生物膜的微观结构 | 第40-41页 |
| 3.7 开菲尔粒生物膜形成过程的观察 | 第41-43页 |
| 3.7.1 开菲尔粒生物膜形成过程中菌数的变化 | 第42页 |
| 3.7.2 开菲尔粒生物膜形成过程中多糖和蛋白质含量的变化 | 第42-43页 |
| 3.8 本章小结 | 第43-45页 |
| 第4章 开菲尔粒生物膜上微生物多样性的研究 | 第45-60页 |
| 4.1 开菲尔粒及开菲尔粒生物膜上微生物多样性的研究 | 第45-49页 |
| 4.1.1 开菲尔粒及开菲尔粒生物膜上微生物高通量测序分析 | 第45-46页 |
| 4.1.2 开菲尔粒及开菲尔粒生物膜上微生物Alpha多样性分析 | 第46-48页 |
| 4.1.3 开菲尔粒及开菲尔粒生物膜上微生物物种分析 | 第48-49页 |
| 4.2 开菲尔粒生物膜上微生物的分离鉴定 | 第49-50页 |
| 4.3 分离自生物膜上微生物生物膜形成能力的测定 | 第50-58页 |
| 4.3.1 微生物生长曲线的测定 | 第50-51页 |
| 4.3.2 微生物疏水性的测定 | 第51-52页 |
| 4.3.3 微生物zeta电位的测定 | 第52-53页 |
| 4.3.4 微生物聚集能力的测定 | 第53-55页 |
| 4.3.5 微生物生物膜形成能力 | 第55-58页 |
| 4.4 本章小结 | 第58-60页 |
| 第5章 外源物质对开菲尔粒生物膜增长影响的研究 | 第60-69页 |
| 5.1 无机盐离子单因素实验 | 第60-61页 |
| 5.2 乳糖与酪蛋白单因素实验 | 第61-62页 |
| 5.3 pH单因素实验 | 第62-63页 |
| 5.4 PB实验 | 第63-64页 |
| 5.5 最陡爬坡实验 | 第64-65页 |
| 5.6 响应面实验 | 第65-68页 |
| 5.7 验证实验 | 第68页 |
| 5.8 本章小结 | 第68-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
