| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-18页 |
| ·概述 | 第8-9页 |
| ·L-山梨糖的性质与应用 | 第8页 |
| ·L-山梨糖的生物合成 | 第8-9页 |
| ·固定化细胞生产 L-山梨糖的研究进展 | 第9-12页 |
| ·固定化细胞的制备方法 | 第9-10页 |
| ·固定化细胞的载体材料 | 第10-12页 |
| ·固定化细胞生产 L-山梨糖的国内外研究现状 | 第12页 |
| ·代谢工程改造 G. oxydans 生产 L-山梨糖的研究进展 | 第12-14页 |
| ·G. oxydans 积累 L-山梨糖的机理 | 第12-13页 |
| ·代谢工程改造 G. oxydans 生产 L-山梨糖的国内外研究现状 | 第13-14页 |
| ·立项依据 | 第14-15页 |
| ·固定化细胞促进 L-山梨糖高效生产 | 第14页 |
| ·强化 D-山梨醇氧化途径促进 L-山梨糖生产 | 第14-15页 |
| ·本课题的研究意义 | 第15页 |
| ·研究内容 | 第15-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-26页 |
| ·菌种和培养基 | 第18页 |
| ·菌种和质粒 | 第18页 |
| ·培养基、仪器及试剂 | 第18页 |
| ·固定化方法 | 第18-19页 |
| ·海藻酸钙包埋法 | 第18-19页 |
| ·海藻酸钠-PVA 包埋法 | 第19页 |
| ·海藻酸钠-明胶包埋法 | 第19页 |
| ·卡拉胶包埋法 | 第19页 |
| ·培养方法 | 第19-20页 |
| ·游离细胞培养方法 | 第19-20页 |
| ·固定化细胞培养方法 | 第20页 |
| ·固定化细胞半连续发酵方法 | 第20页 |
| ·基因操作方法 | 第20-23页 |
| ·DNA 操作方法 | 第20页 |
| ·表达载体的构建 | 第20-22页 |
| ·G. oxydans WSH-003 基因工程菌的构建及验证 | 第22-23页 |
| ·分析方法 | 第23-26页 |
| ·D-山梨醇和 L-山梨糖的测定 | 第23页 |
| ·RNA 的提取和定量 PCR (RT-PCR) | 第23页 |
| ·细胞内粗酶液的提取和酶活的测定 | 第23页 |
| ·其他参数的测定 | 第23-26页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第26-44页 |
| ·固定化材料的筛选与固定化条件优化 | 第26-31页 |
| ·固定化载体材料的筛选 | 第26-28页 |
| ·CaCl2浓度对 L-山梨糖生产的影响 | 第28页 |
| ·固定化成型时间对 L-山梨糖生产的影响 | 第28-29页 |
| ·辅助剂对 L-山梨糖生产的影响 | 第29-30页 |
| ·固定化细胞体积对 L-山梨糖生产的影响 | 第30页 |
| ·小结 | 第30-31页 |
| ·固定化细胞生产 L-山梨糖发酵条件的优化 | 第31-36页 |
| ·氧载体对 L-山梨糖生产的影响 | 第31-33页 |
| ·分批重复发酵对 L-山梨糖生产的影响 | 第33页 |
| ·补料方式对 L-山梨糖生产的影响 | 第33-34页 |
| ·固定化细胞发酵过程底物消耗的数学模拟 | 第34-35页 |
| ·半连续发酵对 L-山梨糖生产的影响 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36页 |
| ·强化 D-山梨醇氧化脱氢途径促进 L-山梨糖的积累 | 第36-41页 |
| ·目的基因的扩增与表达载体的构建 | 第36-37页 |
| ·过量表达 sldhAB 基因重组菌的构建及 PCR 验证 | 第37-38页 |
| ·poly(A/T)尾巴对 sldhAB 基因表达的影响 | 第38页 |
| ·poly(A/T)尾巴对山梨醇脱氢酶活性的影响 | 第38-39页 |
| ·poly(A/T)尾巴对重组菌发酵 L-山梨糖的影响 | 第39页 |
| ·重组菌在 1-L 发酵罐上的发酵性能比较 | 第39-40页 |
| ·固定化重组菌在 1-L 发酵罐上的半连续补料发酵性能验证 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41页 |
| ·本章总结 | 第41-44页 |
| 主要结论与展望 | 第44-46页 |
| 主要结论 | 第44页 |
| 展望 | 第44-46页 |
| 致谢 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |
