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Bacillus clarkii 7364γ-环糊精葡萄糖基转移酶的重组表达及其应用

摘要第1-4页
Abstract第4-6页
目录第6-8页
第一章 绪论第8-17页
   ·CD 的概述第8-10页
     ·CD 的组成结构第8-9页
     ·CD 的性质第9页
     ·CD 的应用第9-10页
   ·环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)的概述第10-11页
     ·产 CGTase 的菌株来源第10页
     ·CGTase 的结构第10页
     ·CGTase 的催化机理及其应用第10-11页
     ·CGTase 的制备第11页
   ·CD 的制备及研究概况第11-15页
     ·CD 的制备工艺概况第11-12页
     ·影响 CD 转化率的因素第12-15页
     ·国内外 CD 的制备现状第15页
   ·本课题立题依据和意义第15-16页
   ·本课题主要研究内容第16-17页
第二章 材料和方法第17-24页
   ·实验材料第17-18页
     ·菌体和质粒第17页
     ·主要试剂第17-18页
     ·主要仪器第18页
     ·培养基第18页
   ·实验方法第18-24页
     ·基因工程菌的构建第18-19页
     ·基因工程菌的表达方法第19页
     ·基础分子实验操作第19-21页
     ·重组γ-CGTase 的性质鉴定第21-22页
     ·γ-CD 的酶转化工艺第22-24页
第三章 结果和讨论第24-45页
   ·γ-CGTase 在 E. coli 中的克隆表达、纯化及性质研究第24-30页
     ·构建基因工程菌 E. coli BL21(DE3)/pET-24a-γ-CGTase第24-25页
     ·重组菌 E. coli BL21(DE3)/pET-24a-γ-CGTase 的诱导表达第25-26页
     ·重组γ-CGTase 的纯化第26-27页
     ·重组酶的酶学性质第27-30页
   ·重组γ-CGTase 制备γ-CD 影响因素的研究第30-36页
     ·有机溶剂种类对γ-CD 转化率的影响第30-31页
     ·淀粉种类对γ-CD 转化率的影响第31-32页
     ·淀粉浓度对γ-CD 转化率的影响第32页
     ·pH 对γ-CD 转化率的影响第32-33页
     ·温度对γ-CD 转化率的影响第33-34页
     ·加酶量对γ-CD 转化率的影响第34-35页
     ·反应时间对γ-CD 转化率的影响第35页
     ·有机溶剂浓度对γ-CD 转化率的影响第35-36页
   ·γ-CD 的提取和鉴定分析第36-39页
     ·γ-CD 的提取第36页
     ·外观鉴别第36页
     ·HPLC 分析第36-37页
     ·红外光谱分析第37-38页
     ·质谱分析第38-39页
     ·环十二酮残留量分析第39页
   ·γ-CGTase 的突变体 A223K 与异淀粉酶复配制备γ-CD 影响因素的研究第39-45页
     ·制备 CD 能力的比较第40页
     ·淀粉种类对γ-CD 转化率的影响第40-41页
     ·温度对γ-CD 转化率的影响第41-42页
     ·pH 对γ-CD 转化率的影响第42页
     ·加酶量对γ-CD 转化率的影响第42-43页
     ·反应时间对γ-CD 转化率的影响第43-44页
     ·有机溶剂浓度对γ-CD 转化率的影响第44-45页
主要结论与展望第45-46页
 主要结论第45页
 展望第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-50页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第50页

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