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GL-7-ACA酰化酶基因工程菌的发酵工艺优化及酶工程研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
第1章 绪论第9-35页
   ·头孢菌素类抗生素研究背景第9-12页
     ·头孢菌素类抗生素概况第9-10页
     ·头孢菌素的作用机理第10页
     ·头孢菌素的结构及其修饰第10-12页
     ·国内外头孢菌素类抗生素市场状况第12页
   ·7-ACA生产概况第12-18页
     ·化学法生产7-ACA工艺及其特点第13-15页
     ·酶法生产7-ACA工艺及其特点第15-17页
     ·我国7-ACA生产现状第17-18页
   ·GL-7-ACA酰化酶第18-23页
     ·GL-7-ACA酰化酶来源及分类第18-20页
     ·GL-7-ACA酰化酶结构和性质第20-22页
     ·GL-7-ACA酰化酶国内外研究进展第22-23页
   ·重组菌高密度发酵第23-26页
     ·乙酸对重组大肠杆菌生长及外源基因表达的影响第23-25页
     ·高密度发酵补料调控策略第25-26页
   ·固定化酶概述第26-29页
     ·酶的固定化方法第26-28页
     ·固定化酶的应用第28-29页
   ·固定化金属亲和层析第29-33页
     ·亲和层析概述第29页
     ·固定化金属亲和层析原理第29-31页
     ·金属螯合载体的构成与层析标签第31-32页
     ·金属螯合载体的优缺点及应用第32-33页
     ·固定化金属亲和层析技术其他方面的应用第33页
   ·本论文选题意义与研究内容第33-35页
     ·选题意义第33-34页
     ·工作内容第34-35页
第2章 摇瓶分批发酵条件优化第35-41页
 引言第35页
   ·材料与方法第35-36页
     ·材料第35-36页
     ·方法第36页
   ·结果与分析第36-40页
     ·温度对发酵的影响第36-37页
     ·pH对发酵的影响第37-38页
     ·初始葡萄糖浓度对E.coliBL21(DE3)pYW-GA产酶的影响第38-39页
     ·初始乙酸的抑制和同化作用第39-40页
   ·小结第40-41页
第3章 5L自控式发酵罐分批发酵工艺优化第41-48页
 引言第41页
   ·材料与方法第41-42页
     ·材料第41-42页
     ·方法第42页
   ·结果与分析第42-47页
     ·5L发酵罐恒速流加模式第42-44页
     ·5L发酵罐pH反馈流加模式第44-45页
     ·5L发酵罐指数流加模式第45-47页
   ·小结第47-48页
第4章 GL-7-ACA酰化酶的纯化与固定化第48-55页
 引言第48页
   ·材料与方法第48-50页
     ·材料与试剂第48页
     ·方法第48-50页
   ·结果与分析第50-54页
     ·酶的纯化第50页
     ·纯化效果第50-51页
     ·不同酶量与载体比对固定化效果的影响第51-52页
     ·反应体系不同pH对固定化效果的影响第52-53页
     ·不同固定化时间对固定化的影响第53-54页
   ·小结第54-55页
第5章 固定化GL-7-ACA酰化酶的酶学特性第55-60页
 引言第55页
   ·材料与方法第55页
     ·材料与试剂第55页
     ·方法第55页
   ·结果与分析第55-59页
     ·固定化酶的最佳反应温度第55-56页
     ·固定化酶的最适反应pH值第56-57页
     ·固定化酶的热稳定性第57-58页
     ·固定化酶和游离酶的米氏常数测定第58页
     ·固定化酶的操作稳定性第58-59页
     ·载体的再生第59页
   ·小结第59-60页
第6章 绪论与展望第60-61页
   ·结论第60页
   ·展望第60-61页
致谢第61-62页
参考文献第62-66页
附录第66-71页
 附录A 实验主要仪器及试剂第66-68页
 附录B 7-ACA标准曲线第68-69页
 附录C 蛋白质标准曲线第69-70页
 附录D 缩略语(Abbreviations)第70-71页
攻读学位期间的研究成果第71页

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