| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第9-15页 |
| 1.1 研究背景 | 第9-10页 |
| 1.1.1 伏马毒素基本性质 | 第9页 |
| 1.1.2 伏马毒素的毒性及危害 | 第9-10页 |
| 1.1.3 伏马毒素的污染概况 | 第10页 |
| 1.2 伏马毒素的防控脱毒技术研究进展 | 第10-13页 |
| 1.2.1 利用农业措施控制伏马毒素 | 第10-11页 |
| 1.2.2 选育抗性作物控制伏马毒素 | 第11页 |
| 1.2.3 利用天然产物控制伏马毒素 | 第11-12页 |
| 1.2.4 利用生物技术伏马毒素 | 第12-13页 |
| 1.3 重组酶降解伏马毒素B_1机制研究进展 | 第13-14页 |
| 1.4 本文研究的意义与主要内容 | 第14-15页 |
| 1.4.1 选题目的意义 | 第14页 |
| 1.4.2 研究内容 | 第14-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-33页 |
| 2.1 材料 | 第15-19页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第15-16页 |
| 2.1.2 实验药品及试剂盒 | 第16-17页 |
| 2.1.3 实验菌种、质粒、酶等 | 第17-18页 |
| 2.1.4 培养基及溶液配制 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-33页 |
| 2.2.1 伏马毒素B_1降解酶YD的诱导表达及其纯化 | 第19-22页 |
| 2.2.2 伏马毒素B_1降解酶YD酶学性质 | 第22-25页 |
| 2.2.3 伏马毒素降解酶YD基因重组载体构建 | 第25-29页 |
| 2.2.4 枯草芽孢杆菌工程菌株构建及验证 | 第29-31页 |
| 2.2.5 枯草芽孢杆菌工程菌株特性分析 | 第31-32页 |
| 2.2.6 枯草芽孢杆菌工程菌的应用研究 | 第32-33页 |
| 3 结果与讨论 | 第33-53页 |
| 3.1 降解酶YD的诱导表达及纯化 | 第33-35页 |
| 3.2 降解酶YD的酶学性质 | 第35-40页 |
| 3.2.1 最适反应温度及温度稳定性 | 第35-36页 |
| 3.2.2 最适反应pH及pH稳定性 | 第36-37页 |
| 3.2.3 酶浓度对酶反应的影响 | 第37-38页 |
| 3.2.4 酶反应产物生成与反应时间的关系 | 第38页 |
| 3.2.5 底物浓度对酶反应速率的影响 | 第38-39页 |
| 3.2.6 金属离子活性影响 | 第39-40页 |
| 3.2.7 EDTA对降解活性的影响 | 第40页 |
| 3.3 降解酶YD基因重组载体构建 | 第40-45页 |
| 3.3.1 目的基因的克隆 | 第41页 |
| 3.3.2 重组载体pSWB980-ypfd构建 | 第41-42页 |
| 3.3.3 阳性转化子的筛选验证 | 第42-45页 |
| 3.4 工程菌pSWB980-ypfd-Bs 168构建及筛选 | 第45-47页 |
| 3.4.1 工程菌pSWB980-ypfd-Bs 168降解活性验证 | 第46页 |
| 3.4.2 FB_1降解产物分析 | 第46-47页 |
| 3.5 工程菌pSWB980-ypfd-Bs 168菌株特性 | 第47-50页 |
| 3.5.1 工程菌分泌蛋白SDS-PAGE分析 | 第47-48页 |
| 3.5.2 工程菌分泌蛋白Western Blot分析 | 第48-49页 |
| 3.5.3 工程菌分泌蛋白降解活性评估 | 第49页 |
| 3.5.4 工程菌发酵浓度测定 | 第49-50页 |
| 3.6 工程菌应用研究 | 第50-53页 |
| 3.6.1 标准曲线的制作 | 第50-51页 |
| 3.6.2 发酵上清液对废醪中FB_1降解 | 第51页 |
| 3.6.3 发酵上清液对DDGS中FB_1降解 | 第51-53页 |
| 4 结论 | 第53-54页 |
| 4.1 全文总结 | 第53页 |
| 4.2 论文的创新点 | 第53页 |
| 4.3 论文的不足之处 | 第53-54页 |
| 5 展望 | 第54-55页 |
| 6 参考文献 | 第55-60页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第60-61页 |
| 8 致谢 | 第61页 |
