| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 1 前言 | 第10-25页 |
| ·L-谷氨酰胺的理化性质 | 第10页 |
| ·L-谷氨酰胺的应用 | 第10-11页 |
| ·在食品保健品方面的应用 | 第10-11页 |
| ·在临床医疗方面的应用 | 第11页 |
| ·谷氨酰胺在动物饲料方面的应用 | 第11页 |
| ·L-谷氨酰胺生产概况 | 第11-13页 |
| ·谷氨酰胺的生产方法 | 第11-12页 |
| ·L-谷氨酰胺的生产现状 | 第12-13页 |
| ·谷氨酸棒杆菌在谷氨酰胺生产中的应用 | 第13-15页 |
| ·谷氨酸棒杆菌在谷氨酰胺生产中的研究实例 | 第13-14页 |
| ·谷氨酸棒杆菌生产L-谷氨酰胺的菌种特性 | 第14-15页 |
| ·L-谷氨酰胺的生物合成途径及代谢调控机制 | 第15-20页 |
| ·L-谷氨酰胺的生物合成途径 | 第15-17页 |
| ·L-谷氨酰胺的代谢调节机制 | 第17-18页 |
| ·谷氨酰胺合成酶活性的调节 | 第18-20页 |
| ·提高L-谷氨酰胺产量的策略 | 第20-23页 |
| ·菌种的改造 | 第20-22页 |
| ·培养基及发酵工艺的优化 | 第22-23页 |
| ·论文的立题背景和研究内容 | 第23-25页 |
| ·立题背景 | 第23页 |
| ·研究内容 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-41页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·菌株 | 第25页 |
| ·质粒 | 第25-26页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第26-30页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·主要试剂 | 第27-28页 |
| ·主要溶液 | 第28-29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·抗生素 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-37页 |
| ·谷氨酸棒杆菌基因组DNA的提取 | 第30页 |
| ·质粒的小量提取 | 第30-31页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
| ·DNA纯化回收 | 第31-32页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·目的基因扩增 | 第32-35页 |
| ·质粒的构建 | 第35-36页 |
| ·谷氨酸棒杆菌感受态细胞的转化实验 | 第36-37页 |
| ·分析方法 | 第37-39页 |
| ·丙酮酸羧化酶酶活测定 | 第37-38页 |
| ·高效液相色谱法定量检测发酵液中的氨基酸浓度 | 第38页 |
| ·水解法测定谷氨酰胺浓度 | 第38页 |
| ·菌体生长测定 | 第38页 |
| ·菌体干重(DCW)计算 | 第38-39页 |
| ·pH测定 | 第39页 |
| ·残糖浓度测定 | 第39页 |
| ·发酵培养方法 | 第39-41页 |
| ·斜面活化培养 | 第39页 |
| ·摇床种子培养 | 第39页 |
| ·5L罐发酵培养 | 第39页 |
| ·质粒稳定性测定 | 第39-41页 |
| 3 结果与讨论 | 第41-59页 |
| ·谷氨酸棒杆菌GM34△NCgl1221的构建 | 第41-46页 |
| ·△NCgl1221片段的构建 | 第41-42页 |
| ·整合载体pK18mobsacB△NCgl1221的构建 | 第42-43页 |
| ·载体pK18mobsacB△NCgl1221整合C.glutamicum GM34 | 第43-44页 |
| ·谷氨酸棒杆菌GM34ANCgl1221的筛选 | 第44-46页 |
| ·敲除NCgl1221对C.glutamicum GM34谷氨酸分泌的影响 | 第46-47页 |
| ·pyc过表达菌株的构建 | 第47-50页 |
| ·表达载体pXMJ19pyc的构建 | 第48-49页 |
| ·谷氨酸棒杆菌GM34pXMJ19pyc的构建 | 第49-50页 |
| ·pyc过表达对谷氨酰胺发酵的影响 | 第50-52页 |
| ·pyc过表达对丙酮酸羧化酶酶活的影响 | 第50页 |
| ·pXMJ19pyc质粒的稳定性 | 第50-51页 |
| ·pyc过表达对谷氨酰胺发酵的影响 | 第51-52页 |
| ·谷氨酸棒杆菌GM34△ltsA的构建 | 第52-55页 |
| ·△ltsA片段的构建 | 第52-53页 |
| ·整合载体pK18mobsacB△ltsA的构建 | 第53-54页 |
| ·谷氨酸棒杆菌GM34△ltsA的构建 | 第54-55页 |
| ·ltsA基因敲除菌的L-谷氨酰胺发酵 | 第55-56页 |
| ·ltsA基因敲除菌的生长特性 | 第55-56页 |
| ·ltsA基因敲除菌的谷氨酰胺发酵 | 第56页 |
| ·阶段pH控制对L-谷氨酰胺发酵的影响 | 第56-59页 |
| ·pH对L-谷氨酰胺发酵的影响 | 第56-57页 |
| ·三阶段pH控制对谷氨酰胺发酵的影响 | 第57-59页 |
| 4 结论 | 第59-60页 |
| 5 展望 | 第60-61页 |
| 6 参考文献 | 第61-67页 |
| 7 研究生期间发表论文情况 | 第67-68页 |
| 8 致谢 | 第68页 |
