| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-25页 |
| ·白藜芦醇的概况 | 第11-12页 |
| ·白藜芦醇的简介 | 第11页 |
| ·白藜芦醇的分布 | 第11-12页 |
| ·白藜芦醇的药理作用 | 第12-14页 |
| ·抗菌作用 | 第12页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第12-13页 |
| ·防治心血管疾病的作用 | 第13-14页 |
| ·保护肝脏的作用 | 第14页 |
| ·白藜芦醇的制取方法 | 第14-18页 |
| ·从天然植物中提取 | 第14-15页 |
| ·化学合成 | 第15-16页 |
| ·植物细胞培养技术 | 第16-17页 |
| ·芪合酶转基因技术 | 第17-18页 |
| ·白藜芦醇合成酶的概况 | 第18-22页 |
| ·芪合酶的介绍 | 第18页 |
| ·白藜芦醇合成酶研究进展 | 第18-22页 |
| ·大肠杆菌表达系统的概况 | 第22页 |
| ·白藜芦醇的分析测定 | 第22-24页 |
| ·定性检测方法 | 第22-23页 |
| ·定量检测方法 | 第23-24页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-35页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·菌种和质粒 | 第25页 |
| ·酶 | 第25页 |
| ·仪器设备 | 第25-26页 |
| ·实验试剂及试剂盒 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-35页 |
| ·葡萄总 RNA 的提取方法 | 第27-28页 |
| ·cDNA 文库的构建 | 第28页 |
| ·PCR（聚合酶链式反应） | 第28-29页 |
| ·DNA 的快速电泳检测 | 第29页 |
| ·DNA 的纯化回收 | 第29-30页 |
| ·DNA 的限制性酶切 | 第30页 |
| ·质粒与目的片段的连接 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第31页 |
| ·质粒转化大肠杆菌感受态（DH5α和 BL21） | 第31页 |
| ·菌落 PCR | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌的质粒提取 | 第32页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第32-34页 |
| ·HPLC 法测定白藜芦醇的含量 | 第34-35页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第35-49页 |
| ·pET22b 表达载体构建策略 | 第35-36页 |
| ·分泌表达的设计思路 | 第35页 |
| ·酶切位点的选择 | 第35页 |
| ·在 pET22b 表达质粒中插入 RS | 第35-36页 |
| ·构建工程菌 BL21-pET22b-RS | 第36-41页 |
| ·设计克隆白藜芦醇合成酶基因的特异性引物 | 第36-37页 |
| ·PCR 克隆 RS 基因 | 第37页 |
| ·pET22b 与 RS 的双酶切 | 第37-38页 |
| ·pET22b 与 RS 的连接 | 第38页 |
| ·pET22b-RS 转化克隆菌株大肠杆菌 DH5α | 第38-41页 |
| ·pET22b-RS 转化表达菌株大肠杆菌 BL21 | 第41页 |
| ·对工程菌 BL21-pET22b-RS 中 RS 基因的诱导表达 | 第41-49页 |
| ·判断是否有白藜芦醇合成酶的表达 | 第41-42页 |
| ·判断诱导 RS 表达 IPTG 的最佳诱导浓度 | 第42-43页 |
| ·产白藜芦醇工程菌发酵条件的优化 | 第43-49页 |
| 第4章 总结与展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
