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原生质体转化选育枯草芽孢杆菌产氨肽酶的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
目录第5-8页
第一章 绪论第8-17页
   ·前言第8-14页
     ·蛋白酶类第8页
     ·氨肽酶的来源第8-9页
     ·氨肽酶的作用特点及分类第9-10页
     ·氨肽酶的应用第10-11页
     ·高产菌株的选育第11-13页
     ·发酵过程优化与控制第13-14页
   ·国内外研究现状第14-15页
     ·国外研究现状第14页
     ·国内研究现状第14-15页
   ·立题意义第15-16页
   ·本文研究内容第16-17页
第二章 材料与方法第17-22页
   ·材料第17页
     ·菌种与质粒第17页
     ·主要试剂第17页
     ·主要仪器第17页
   ·方法第17-22页
     ·溶液与培养基第17-18页
     ·菌体生物量的测定第18页
     ·原生质体的制备与再生第18页
     ·原生质体转化第18-19页
     ·转化子鉴定第19页
     ·高产菌株筛选第19页
     ·高产菌株的遗传稳定性研究第19页
     ·氨肽酶酶活测定方法第19页
     ·还原糖的测定第19页
     ·不同表面活性剂及渗透压对细胞通透性及氨肽酶酶活的影响第19-20页
     ·不同表面活性剂及渗透压对枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 产氨肽酶分泌的影响第20页
     ·发酵培养基和发酵条件优化第20页
     ·摇瓶培养第20页
     ·发酵罐发酵条件第20页
     ·原料预处理第20页
     ·蛋白酶活力测定第20-21页
     ·膜通量测定第21页
     ·蛋白质含量的测定方法第21页
     ·水解度(DH 值)测定方法第21-22页
第三章 结果与讨论第22-51页
   ·原生质体制备及再生条件的优化第22-25页
     ·菌体生长状态对原生质体制备的影响第22页
     ·溶菌酶浓度对原生质体制备和再生的影响第22-23页
     ·溶菌酶处理时间对原生质体制备和再生的影响第23-24页
     ·酶解温度对原生质体制备的影响第24-25页
     ·原生质体的电镜观察第25页
   ·原生质体转化条件的优化第25-28页
     ·原生质体浓度对转化的影响第25-26页
     ·不同分子质量及浓度的聚乙二醇对转化的影响第26页
     ·PEG 处理时间对转化的影响第26-27页
     ·转化子鉴定第27-28页
     ·小结一第28页
   ·高产氨肽酶菌株筛选第28-30页
     ·转化子中高产菌株的筛选第28页
     ·高产菌株的摇瓶复筛第28-29页
     ·枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 传代稳定性第29页
     ·枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 的生长曲线第29-30页
     ·小结二第30页
   ·枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 产亮氨酸氨肽酶的发酵培养基优化第30-33页
     ·碳源种类对枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 产酶的影响第30-31页
     ·氮源种类对枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 发酵产酶能力的影响第31-32页
     ·无机盐对产酶的影响第32-33页
   ·培养条件对枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 发酵产酶的影响第33-37页
     ·初始 pH 对枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 产氨肽酶的影响第33-34页
     ·培养温度对枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 产氨肽酶的影响第34-35页
     ·装液量对枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 产氨肽酶的影响第35-36页
     ·摇床转速对枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 产氨肽酶的影响第36-37页
     ·接种量对产酶的影响第37页
     ·小结三第37页
   ·枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 产氨肽酶的发酵策略研究第37-41页
     ·表面活性剂和渗透压对细胞通透性及氨肽酶酶活的影响第38页
     ·表面活性剂和渗透压对枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 产氨肽酶分泌的影响第38-39页
     ·溶氧对发酵产酶的影响第39-40页
     ·两阶段变温培养策略在枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 产氨肽酶中的应用第40页
     ·枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 在 15 L 发酵罐中发酵过程曲线第40-41页
     ·小结四第41页
   ·枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 产亮氨酸氨肽酶提取工艺研究第41-45页
     ·絮凝除菌第41-43页
     ·超滤浓缩第43-44页
     ·枯草芽孢杆菌 ZH-Zj016 产氨肽酶提取工艺的优化结果第44-45页
     ·小结五第45页
   ·本实验室三种产亮氨酸氨肽酶枯草芽孢杆菌的比较第45-51页
     ·菌落形态的比较第45-46页
     ·三种菌生产周期的差异第46页
     ·豆粕利用的差异第46-48页
     ·蛋白酶系的研究第48-49页
     ·小结六第49-51页
主要结论与展望第51-53页
 主要结论第51页
 展望第51-53页
致谢第53-54页
参考文献第54-59页
附录第59页
 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第59页
 申请国家发明专利第59页

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