| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第12-31页 |
| 1.1 脂肪氧合酶/氢过氧化物裂解酶催化途径概述 | 第12-13页 |
| 1.2 C6 醛类的应用及合成 | 第13-14页 |
| 1.2.1 C6 醛类的应用 | 第13-14页 |
| 1.2.2 C6 醛类的生物合成 | 第14页 |
| 1.3 氢过氧化物裂解酶概述 | 第14-17页 |
| 1.3.1 氢过氧化物裂解酶的分布及特异性 | 第14-15页 |
| 1.3.2 氢过氧化物裂解酶的稳定性 | 第15-16页 |
| 1.3.3 氢过氧化物裂解酶的分离纯化 | 第16-17页 |
| 1.3.4 氢过氧化物裂解酶的基本酶学性质 | 第17页 |
| 1.4 氢过氧化物裂解酶的结构和催化机理 | 第17-22页 |
| 1.4.1 细胞色素P450 酶—氢过氧化物裂解酶的结构 | 第17-18页 |
| 1.4.2 氢过氧化物裂解酶的活性中心 | 第18-20页 |
| 1.4.3 HPL 的催化机理 | 第20-21页 |
| 1.4.4 限制HPL 反应转化率的因素 | 第21-22页 |
| 1.5 立题背景和意义 | 第22-23页 |
| 1.6 本课题研究的主要内容 | 第23页 |
| 参考文献 | 第23-31页 |
| 第二章 氢过氧化物裂解酶提取原料的筛选及稳定性研究 | 第31-42页 |
| 2.1 前言 | 第31页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第31-32页 |
| 2.2.1 主要材料 | 第31-32页 |
| 2.2.2 主要设备 | 第32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-33页 |
| 2.3.1 HPL 的提取 | 第32页 |
| 2.3.2 氢过氧化物的制备 | 第32页 |
| 2.3.3 表面活性剂剥离 | 第32页 |
| 2.3.4 不同添加剂对HPL 冻干稳定性的影响 | 第32页 |
| 2.3.5 长期稳定性测定 | 第32-33页 |
| 2.3.6 热稳定性测定 | 第33页 |
| 2.3.7 氢过氧化物裂解酶酶活的测定 | 第33页 |
| 2.3.8 数据分析 | 第33页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第33-39页 |
| 2.4.1 不同蔬菜中HPL 的活力 | 第33-35页 |
| 2.4.2 甘油对HPL 长期稳定性的影响 | 第35页 |
| 2.4.3 不同添加剂对HPL 冻干稳定性影响的研究 | 第35-37页 |
| 2.4.4 蔗糖对于冻干HPL 的长期稳定性研究 | 第37页 |
| 2.4.5 不同添加剂对HPL 热稳定性的研究 | 第37-39页 |
| 2.5 本章小结 | 第39页 |
| 参考文献 | 第39-42页 |
| 第三章 苋菜氢过氧化物裂解酶的分离纯化及酶学性质研究 | 第42-53页 |
| 3.1 前言 | 第42页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第42-43页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第42页 |
| 3.2.2 实验仪器与设备 | 第42-43页 |
| 3.3 实验方法 | 第43-45页 |
| 3.3.1 缓冲液的配置 | 第43页 |
| 3.3.2 硫酸铵分级沉淀 | 第43页 |
| 3.3.3 DEAE-Toyopearl 柱层析 | 第43页 |
| 3.3.4 苯基脂糖柱层析 | 第43页 |
| 3.3.5 羟基磷灰石柱层析 | 第43-44页 |
| 3.3.6 氢过氧化物裂解酶酶活的测定 | 第44页 |
| 3.3.7 氢过氧化物裂解酶的蛋白含量测定 | 第44页 |
| 3.3.8 十二烷基硫酸钠凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第44页 |
| 3.3.9 二维凝胶电泳（Two-dimensional gel elcetrophlresis） | 第44页 |
| 3.3.10 最适pH 和温度的测定 | 第44页 |
| 3.3.11 动力学参数的测定 | 第44页 |
| 3.3.12 抑制剂抑制作用的测定 | 第44-45页 |
| 3.3.13 血红蛋白检测 | 第45页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第45-50页 |
| 3.4.1 HPL 的分离纯化 | 第45-46页 |
| 3.4.2 HPL 的纯度鉴定 | 第46-48页 |
| 3.4.3 苋菜HPL 最适温度和pH 的测定 | 第48页 |
| 3.4.4 HPL 的底物特异性研究 | 第48-49页 |
| 3.4.5 血红蛋白鉴定 | 第49-50页 |
| 3.4.6 抑制剂测试 | 第50页 |
| 3.5 本章小结 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| 第四章 对氯汞苯甲酸钠对氢过氧化物裂解酶的化学修饰 | 第53-66页 |
| 4.1 引言 | 第53页 |
| 4.2 实验材料与设备 | 第53-54页 |
| 4.2.1 材料与试剂 | 第53-54页 |
| 4.2.2 实验仪器与设备 | 第54页 |
| 4.3 实验方法 | 第54-56页 |
| 4.3.1 氢过氧化物裂解酶的巯基化学修饰 | 第54页 |
| 4.3.2 蛋白含量的测定 | 第54页 |
| 4.3.3 圆二色谱 | 第54页 |
| 4.3.4 ANS 结合荧光光谱 | 第54页 |
| 4.3.5 动力学测定 | 第54-56页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第56-63页 |
| 4.4.1 不同巯基试剂对HPL 活性的影响 | 第56页 |
| 4.4.2 不同PCMB 浓度下的底物反应动力学 | 第56-59页 |
| 4.4.3 不同底物浓度下PCMB 对HPL 的抑制动力学 | 第59-60页 |
| 4.4.4 微观速率常数的确定 | 第60-62页 |
| 4.4.5 PCMB 修饰引起HPL 结构的变化 | 第62-63页 |
| 4.5 本章小结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-66页 |
| 第五章 HPL 的自杀性抑制：催化过程中的自由基检测 | 第66-76页 |
| 5.1 引言 | 第66页 |
| 5.2 实验材料与设备 | 第66-67页 |
| 5.2.1 材料与试剂 | 第66页 |
| 5.2.2 实验仪器与设备 | 第66-67页 |
| 5.3 实验方法 | 第67页 |
| 5.3.1 ANS 结合荧光光谱 | 第67页 |
| 5.3.2 13 位亚油酸氢过氧化物对HPL 的抑制 | 第67页 |
| 5.3.3 13 位亚油酸氢过氧化物对HPL 的抑制动力学 | 第67页 |
| 5.3.4 自由基测定 | 第67页 |
| 5.3.5 不同试剂对HPL 的保护作用 | 第67页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第67-73页 |
| 5.4.1 反应过程中HPL 酶外源荧光光谱 | 第67-68页 |
| 5.4.2 13-HPOD 对HPL 的抑制作用 | 第68-70页 |
| 5.4.3 不同试剂对HPL 的保护作用 | 第70-71页 |
| 5.4.4 HPL 反应的EPR 测定 | 第71-72页 |
| 5.4.5 不同试剂对HPL 反应自由基的清除效果 | 第72-73页 |
| 5.5 本章小结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-76页 |
| 第六章 不同盐溶液对HPL 催化动力学的影响 | 第76-87页 |
| 6.1 引言 | 第76页 |
| 6.2 实验材料与设备 | 第76-77页 |
| 6.2.1 材料与试剂 | 第76页 |
| 6.2.2 实验仪器与设备 | 第76-77页 |
| 6.3 实验方法 | 第77页 |
| 6.3.1 盐离子对HPL 活力的影响 | 第77页 |
| 6.3.2 pH 和温度特异性常数的测定 | 第77页 |
| 6.3.3 动力学测定 | 第77页 |
| 6.3.4 酶稳定性实验 | 第77页 |
| 6.3.5 ANS 结合荧光光谱 | 第77页 |
| 6.3.6 数据分析 | 第77页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第77-84页 |
| 6.4.1 不同盐溶液对HPL 活力的影响 | 第77-79页 |
| 6.4.2 不同盐溶液对HPL 动力学以及最适pH 和温度的影响 | 第79-80页 |
| 6.4.3 不同盐溶液对HPL 稳定性的影响 | 第80-82页 |
| 6.4.3 盐溶液对HPL 结构的影响 | 第82页 |
| 6.4.4 HPL 的阿伦尼乌斯方程 | 第82-84页 |
| 6.5 本章小结 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-87页 |
| 论文主要结论与展望 | 第87-89页 |
| 一、主要结论 | 第87-88页 |
| 二、展望 | 第88-89页 |
| 论文创新点 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第91-92页 |
| 附录 | 第92-94页 |
