| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-17页 |
| 1.1 中介体及其研究进展 | 第7-14页 |
| 1.1.1 中介体简介 | 第7-10页 |
| 1.1.2 中介体的作用机制 | 第10-13页 |
| 1.1.3 中介体关于环境胁迫影响的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 酵母中介体的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.1 酵母不同中介体的研究现状 | 第14-15页 |
| 1.2.2 酵母中MED3的研究现状 | 第15页 |
| 1.3 本论文的立题依据和意义 | 第15-16页 |
| 1.4 本论文的主要研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第17-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 培养基 | 第17页 |
| 2.1.3 酶和试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 分子操作 | 第19-22页 |
| 2.2.1 分子操作方法 | 第19页 |
| 2.2.2 待敲基因的的融合 | 第19-20页 |
| 2.2.3 敲除框的构建 | 第20-21页 |
| 2.2.4 缺失菌株的构建与验证 | 第21-22页 |
| 2.2.5 C. glabrata表达质粒构建与验证 | 第22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-24页 |
| 2.3.1 平板生长实验定性测定 | 第22-23页 |
| 2.3.2 生长曲线的定量测定 | 第23页 |
| 2.3.3 细胞膜H~+-ATPase活性的测定 | 第23页 |
| 2.3.4 细胞膜刚性测定 | 第23页 |
| 2.3.5 气质联用测定细胞膜甾醇含量 | 第23页 |
| 2.3.6 气质联用分析细胞膜脂肪酸成分 | 第23-24页 |
| 2.3.7 液质联用分析测定细胞膜磷脂成分 | 第24页 |
| 2.4 转录水平分析方法 | 第24-26页 |
| 2.4.1 RNA-seq对基因表达水平的分析 | 第24-25页 |
| 2.4.2 qPCR的测定 | 第25-26页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第26-43页 |
| 3.1 缺失CgMED3基因对光滑球拟酵母耐受性影响的研究 | 第26-31页 |
| 3.1.1 缺失CgMED3AB基因菌株的构建 | 第26-28页 |
| 3.1.2 缺失CgMED3AB基因影响环境适应性 | 第28-29页 |
| 3.1.3 缺失CgMED3AB基因降低菌株酸胁迫下的生存能力 | 第29-31页 |
| 3.1.4 小结 | 第31页 |
| 3.2 突变菌株Cgmed3ABΔ 的转录组分析 | 第31-37页 |
| 3.2.1 转录组分析酸胁迫对出发菌株wt与Cgmed3ABΔ 菌株的基因表达差异 | 第31-33页 |
| 3.2.2 转录组解析Cgmed3ABΔ 菌株酸胁迫下的生长能力 | 第33-35页 |
| 3.2.3 qPCR验证RNA-seq的准确性 | 第35-36页 |
| 3.2.4 小结 | 第36-37页 |
| 3.3 CgMED3AB对光滑球拟酵母细胞膜成分及功能的影响 | 第37-43页 |
| 3.3.1 缺失CgMED3AB基因影响细胞膜脂肪酸组成 | 第37页 |
| 3.3.2 缺失CgMED3AB基因影响细胞膜甾醇组成 | 第37-38页 |
| 3.3.3 缺失CgMED3AB基因影响细胞膜磷脂组分 | 第38-40页 |
| 3.3.4 缺失CgMED3AB基因降低酸胁迫下细胞膜刚性 | 第40页 |
| 3.3.5 缺失CgMED3AB基因降低酸胁迫下细胞膜质子泵H+-ATPase活性 | 第40-41页 |
| 3.3.6 小结 | 第41-43页 |
| 结论与展望 | 第43-45页 |
| 主要结论 | 第43-44页 |
| 展望 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |
