摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-15页 |
縮略语表 | 第15-17页 |
第一章 绪论 | 第17-30页 |
1 蛋清抗菌特性 | 第17-18页 |
2 蛋清抗菌作用机制 | 第18-19页 |
3 蛋清抗菌蛋白质成份的发掘与鉴定 | 第19-23页 |
·溶菌酶 | 第19-20页 |
·卵转铁蛋白 | 第20-21页 |
·抗生物素蛋白 | 第21-22页 |
·蛋白酶抑制剂 | 第22页 |
·其它 | 第22-23页 |
4 贮藏过程中蛋清的抗微生物防御特点 | 第23-24页 |
5 禽胚胎发育过程中蛋清的免疫防御特点 | 第24-26页 |
·蛋清的消化和吸收 | 第24-25页 |
·蛋清免疫防御特点 | 第25-26页 |
6 蛋清抗菌活性成份的开发与应用价值 | 第26-27页 |
7 本课题主要研究内容及研究意义 | 第27-30页 |
·主要研究内容 | 第27-28页 |
·技术路线 | 第28-29页 |
·研究意义 | 第29-30页 |
第二章 鸡蛋孵化早期蛋清基本理化性质变化及其体外抗菌活性评价 | 第30-41页 |
1 材料与方法 | 第31-34页 |
·材料与试剂 | 第31页 |
·主要仪器与设备 | 第31-32页 |
·种蛋孵化及蛋清分离取样 | 第32页 |
·蛋清pH值测定 | 第32页 |
·蛋白高度测定 | 第32-33页 |
·不同发育阶段蛋清粘度测定 | 第33页 |
·菌种活化与接种 | 第33页 |
·细菌计数 | 第33页 |
·数据分析 | 第33-34页 |
2 结果与分析 | 第34-40页 |
·蛋清pH变化 | 第34-35页 |
·蛋清蛋白高度变化 | 第35-36页 |
·蛋清粘度变化 | 第36-37页 |
·孵化蛋清对细菌生长曲线的影响 | 第37-40页 |
3 小结 | 第40-41页 |
第三章 鸡蛋孵化早期蛋清主要抗菌蛋白含量及活性变化 | 第41-52页 |
1 材料与方法 | 第42-46页 |
·材料与试剂 | 第42-43页 |
·主要仪器与设备 | 第43-44页 |
·种蛋孵化及蛋清分离取样 | 第44页 |
·SDS-PAGE | 第44页 |
·RP-HPLC | 第44-45页 |
·溶壁活性测定方法 | 第45页 |
·转铁活性测定方法 | 第45-46页 |
·试验设计 | 第46页 |
·数据处理 | 第46页 |
2 结果与分析 | 第46-51页 |
·SDS-PAGE | 第46-47页 |
·孵化过程中蛋清内卵转铁蛋白、溶菌酶含量的变化 | 第47-49页 |
·孵化早期蛋清溶壁活性及转铁活性变化 | 第49-51页 |
3 小结 | 第51-52页 |
第四章 鸡蛋孵化早期蛋清小分子蛋白质组成变化 | 第52-61页 |
1 材料与方法 | 第53-54页 |
·材料与试剂 | 第53页 |
·主要仪器与设备 | 第53-54页 |
·蛋清样品的准备 | 第54页 |
·蛋清蛋白质片段粗分离 | 第54页 |
·MALDI-TOF MS分析 | 第54页 |
2 结果与分析 | 第54-60页 |
3 小结 | 第60-61页 |
第五章 孵化早期蛋清液化及其对蛋清抗菌功能的影响 | 第61-71页 |
1 材料与方法 | 第61-64页 |
·材料与试剂 | 第61-62页 |
·主要仪器与设备 | 第62页 |
·种蛋孵化及蛋清分离取样 | 第62-63页 |
·浓稀蛋清分离 | 第63页 |
·pH值测定 | 第63页 |
·RP-HPLC分析 | 第63页 |
·溶壁活性测定方法 | 第63页 |
·转铁活性测定方法 | 第63页 |
·体外抗菌活性评定 | 第63页 |
·试验设计 | 第63-64页 |
·数据统计 | 第64页 |
2 结果与分析 | 第64-70页 |
·孵化早期浓稀蛋清pH的变化 | 第64-65页 |
·孵化早期浓稀蛋清抗菌蛋白含量的变化 | 第65-67页 |
·孵化早期浓稀蛋清溶壁活性及转铁活性的变化 | 第67-68页 |
·孵化早期蛋清液化对浓稀蛋清体外抗菌活性的影响 | 第68-70页 |
3 小结 | 第70-71页 |
第六章 孵化早期蛋清内肠炎沙门氏菌活性状态评定 | 第71-83页 |
1 材料与方法 | 第72-75页 |
·材料与试剂 | 第72页 |
·主要仪器与设备 | 第72-73页 |
·种蛋孵化及蛋清分离 | 第73页 |
·菌悬液的准备及接种 | 第73页 |
·细菌分离及荧光染色方法 | 第73-74页 |
·荧光显微镜检测方法 | 第74页 |
·流式细胞仪分析检测方法 | 第74页 |
·细菌计数 | 第74页 |
·试验设计 | 第74-75页 |
·数据分析 | 第75页 |
2 结果与分析 | 第75-82页 |
·肠炎沙门氏菌荧光染色特征 | 第75-77页 |
·孵化早期禽蛋蛋清抑制肠炎沙门氏菌的作用效力 | 第77-79页 |
·孵化温度对肠炎沙门氏菌在蛋清内的活性状态的影响 | 第79-80页 |
·pH对肠炎沙门氏菌在蛋清内的活性状态的影响 | 第80-82页 |
3 小结 | 第82-83页 |
第七章 鸡蛋孵化早期蛋清抗肠炎沙门氏菌机制 | 第83-97页 |
1 材料与方法 | 第84-89页 |
·材料与试剂 | 第84-85页 |
·主要仪器与设备 | 第85页 |
·种蛋孵化及蛋清分离取样 | 第85-86页 |
·菌悬液的活化及接种 | 第86页 |
·细菌分离及荧光染色方法 | 第86页 |
·扫描电镜观察方法 | 第86页 |
·荧光显微镜观察 | 第86页 |
·流式细胞仪检测 | 第86-87页 |
·细菌RNA提取及荧光定量PCR | 第87-88页 |
·总RNA提取 | 第87页 |
·cDNA的合成 | 第87页 |
·荧光定量PCR | 第87-88页 |
·数据分析 | 第88页 |
·细菌黏附细胞毒性评定 | 第88-89页 |
·Caco-2细胞培养 | 第88页 |
·细菌黏附实验 | 第88-89页 |
·细菌侵染Caco-2细胞试验 | 第89页 |
·数据分析 | 第89页 |
2 结果与分析 | 第89-96页 |
·孵化蛋清对肠炎沙门氏菌显微特征的影响 | 第89-92页 |
·孵化早期蛋清对肠炎沙门氏菌膜结构的破坏作用效力 | 第92-94页 |
·孵化早期蛋清对肠炎沙门氏菌毒性基因的表达影响 | 第94-95页 |
·孵化早期蛋清对肠炎沙门氏菌细胞毒性的影响 | 第95-96页 |
3 小结 | 第96-97页 |
第八章 孵化早期蛋清抗菌蛋白质协同作用效果及其影响因素 | 第97-108页 |
1 材料与方法 | 第97-100页 |
·材料与试剂 | 第97-98页 |
·主要仪器与设备 | 第98页 |
·菌悬液的准备 | 第98页 |
·最小抑菌浓度的测定(MIC) | 第98-99页 |
·蛋白质溶液及抗菌反应体系的配制 | 第99页 |
·细菌的计数 | 第99页 |
·菌液荧光染色及流式细胞仪检测 | 第99页 |
·试验设计 | 第99-100页 |
·数据分析 | 第100页 |
2 结果与分析 | 第100-107页 |
·卵转铁蛋白、溶菌酶抗菌作用效果 | 第100-102页 |
·MIC值测定结果 | 第100页 |
·卵转铁蛋白、溶菌酶抗肠炎沙门氏菌基本特性 | 第100-102页 |
·卵转铁蛋白与溶菌酶协同作用效果及pH的影响 | 第102页 |
·卵白蛋白环境对溶菌酶及卵转铁蛋白协同作用效果的影响 | 第102-107页 |
·卵白蛋白抗肠炎沙门氏菌基本特性 | 第102-103页 |
·卵白蛋白对溶菌酶及卵转铁蛋白协同作用效果的影响 | 第103-107页 |
3 小结 | 第107-108页 |
第九章 结论与展望 | 第108-112页 |
1 结论 | 第108-109页 |
2 展望 | 第109-110页 |
3 创新性 | 第110-112页 |
参考文献 | 第112-127页 |
致谢 | 第127-128页 |
作者简介 | 第128-129页 |