| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 外文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-25页 |
| ·TGEV生物学性状 | 第11-12页 |
| ·TGEV基因组及其编码蛋白 | 第12-17页 |
| ·基因组结构 | 第12-13页 |
| ·基因表达方式 | 第13-14页 |
| ·编码的蛋白及其功能 | 第14-17页 |
| ·TGEV的抗原性和变异性 | 第17-18页 |
| ·TGEV与PRCV分子水平差异 | 第18-20页 |
| ·猪传染性胃肠炎分子生物学诊断研究进展 | 第20-24页 |
| ·核酸探针杂交技术检测TGE0 | 第21-22页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR)检测TGE0 | 第22-23页 |
| ·限制性酶切片段长度多态性(RFLP)分析TGE0 | 第23-24页 |
| ·研究目的与意义 | 第24-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-35页 |
| ·实验材料 | 第25-26页 |
| ·病毒与细胞 | 第25页 |
| ·质粒与菌种 | 第25页 |
| ·扩增引物 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-35页 |
| ·TGEV增殖 | 第26-27页 |
| ·TGEV总RNA的提取 | 第27页 |
| ·ts片段的克隆及序列分析 | 第27-29页 |
| ·ts片段在GST原核表达系统中的表达 | 第29-31页 |
| ·tp片段的体外扩增及纯化 | 第31-32页 |
| ·tp片段的纯度测定、浓度测定与标记 | 第32-33页 |
| ·探针tp标记效率的检测 | 第33-34页 |
| ·探针检测样品的初步应用 | 第34-35页 |
| 3 实验结果 | 第35-45页 |
| ·IBR细胞接种TGEV前后显微镜下观察对比 | 第35页 |
| ·TGEV总RNA的提取与cDNA的合成 | 第35-36页 |
| ·含有B和C抗原位点片段ts克隆、序列分析及原核表达 | 第36-42页 |
| ·片段ts PCR扩增结果 | 第36页 |
| ·重组pMD18-T-ts质粒的鉴定结果 | 第36-37页 |
| ·ts片段碱基序列测定及同源性的比较 | 第37-38页 |
| ·ts片段氨基酸序列比较及分析结果 | 第38-39页 |
| ·ts片段与TGEV其它毒株已知序列同源树分析 | 第39页 |
| ·重组质粒pGEX-6P-ts的鉴定 | 第39-40页 |
| ·含重组质粒pGEX-6P-ts菌体诱导及SDS-PAGE鉴定 | 第40-41页 |
| ·优化表达条件后表达蛋白的SDS-PAGE分析 | 第41-42页 |
| ·B和C抗原位点片段蛋白(TS)表达含量的分析 | 第42页 |
| ·核酸探针的制备及应用 | 第42-45页 |
| ·tp片段的PCR扩增结果 | 第42-43页 |
| ·片段tp浓度及纯度的测定 | 第43页 |
| ·核酸探针tp标记效率检测结果 | 第43页 |
| ·核酸探针tp检测样品结果 | 第43-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| ·ts片段的原核表达 | 第45-46页 |
| ·ts基因片段的克隆 | 第45页 |
| ·表达系统的选择 | 第45-46页 |
| ·表达载体的选择 | 第46页 |
| ·核酸探针的制备 | 第46-48页 |
| ·探针片段的选择 | 第47页 |
| ·探针的制备 | 第47-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录 | 第55-59页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
