缩写词 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
英文摘要 | 第10-14页 |
第一部分 前言 | 第14-25页 |
1 文献综述——甘薯的生物工程育种研究进展 | 第14-23页 |
1.1 世界甘薯的生产现状及发展趋势 | 第14-15页 |
1.1.1 甘薯栽培的全球分布 | 第14-15页 |
1.1.2 世界甘薯消费与市场情况 | 第15页 |
1.1.3 甘薯生产中存在的问题和育种目标 | 第15页 |
1.2 甘薯的生物工程技术研究 | 第15-20页 |
1.2.1 甘薯的组织培养技术 | 第16-17页 |
1.2.2 甘薯茎尖培养与脱毒研究 | 第17-18页 |
1.2.3 甘薯花药(或花粉)培养 | 第18页 |
1.2.4 甘薯的原生质体培养 | 第18-19页 |
1.2.5 甘薯体细胞杂交 | 第19页 |
1.2.6 甘薯遗传转化研究 | 第19-20页 |
1.3 生物技术在甘薯品质改良中的应用 | 第20-23页 |
1.3.1 运用脱毒技术提高产量和防止品种退化 | 第20-21页 |
1.3.2 采用诱变技术选育新品种 | 第21页 |
1.3.3 采用细胞工程选育新品种 | 第21页 |
1.3.4 基因工程改良甘薯品质 | 第21-23页 |
2 引言 | 第23-25页 |
2.1 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
2.2 本文的主要研究内容 | 第24页 |
2.3 采用的技术路线 | 第24-25页 |
第二部分 甘薯茎尖脱毒和离体遗传转化体系的优化与应用的研究 | 第25-54页 |
1 材料和方法 | 第25-32页 |
1.1 试验材料 | 第25-26页 |
1.1.1 植物材料 | 第25页 |
1.1.2 细菌菌 | 第25页 |
1.1.3 试剂 | 第25页 |
1.1.4 培养基 | 第25页 |
1.1.5 培养条件 | 第25-26页 |
1.2 研究方法 | 第26-32页 |
1.2.1 甘薯良种脱毒种苗繁育体系的建立 | 第26-28页 |
1.2.1.1 不同茎尖来源对成苗率的影响 | 第26页 |
1.2.1.2 培养基中不同激素配比对茎尖成苗率的影响 | 第26页 |
1.2.1.3 甘薯基因型对茎尖成苗率的影响 | 第26页 |
1.2.1.4 甘薯拟脱毒苗的脱毒效果检测 | 第26-27页 |
1.2.1.4.1 症状学法检测 | 第26-27页 |
1.2.1.4.2 指示植物法检测 | 第27页 |
1.2.1.4.3 硝酸纤维膜-酶联免疫法(NCM-ELISA)检测 | 第27页 |
1.2.1.4.4 甘薯羽状驳斑病毒(SPFMV)的RT—PCR法检测 | 第27页 |
1.2.1.5 脱毒苗快繁 | 第27-28页 |
1.2.1.6 脱毒试管苗生长分析 | 第28页 |
1.2.1.7 培养方式对甘薯试管苗生长的影响 | 第28页 |
1.2.2 甘薯离体遗传转化系统优化的研究 | 第28-30页 |
1.2.2.1 转化试验 | 第28页 |
1.2.2.1.1 改良的叶盘—共培养法转化甘薯 | 第28页 |
1.2.2.2 选择压的确定 | 第28页 |
1.2.2.3 抗生素抑菌浓度的确定 | 第28页 |
1.2.2.4 各种因素对转化频率的影响 | 第28-29页 |
1.2.2.4.1 菌液浓度及浸染时间对转化频率的影响 | 第28-29页 |
1.2.2.4.2 预培养及共培养时间对转化频率的影响 | 第29页 |
1.2.2.4.3 不同光照条件对甘薯遗传转化频率的影响 | 第29页 |
1.2.2.4.4 AgNO_3对遗传转化的影响 | 第29页 |
1.2.2.4.5 乙酰丁香酮对转化频率的影响 | 第29页 |
1.2.2.5 GUS检测 | 第29页 |
1.2.2.6 转化体的再生 | 第29-30页 |
1.2.3 外源10kD玉米醇溶蛋白基因的导入及其在转基因甘薯中表达的研究 | 第30-32页 |
1.2.3.1 根癌农杆菌介导外源10kD玉米醇溶蛋白基因的导入 | 第30页 |
1.2.3.2 Kan~r植株的PCR法鉴定 | 第30-31页 |
1.2.3.3 甘薯块根贮藏蛋白基因启动子诱导表达的研究 | 第31页 |
1.2.3.3.1 蔗糖作用浓度 | 第31页 |
1.2.3.3.2 蛋白质含量的测定 | 第31页 |
1.2.3.3.3 蛋白质SDS-PAGE分析 | 第31页 |
1.2.3.4 转基因甘薯植株性状的研究 | 第31-32页 |
1.2.3.4.1 背景性状——转基因植株形态及生长状况分析 | 第31页 |
1.2.3.4.2 目标性状研究 | 第31页 |
1.2.3.4.3 总蛋白含量的变化及蛋白质SDS-PAGE分析 | 第31-32页 |
1.2.3.4.4 氨基酸含量分析 | 第32页 |
2 结果与分析 | 第32-48页 |
2.1 甘薯良种脱毒种苗繁育体系的建立 | 第32-36页 |
2.1.1 不同茎尖来源对成苗率的影响 | 第32页 |
2.1.2 不同激素配比对茎尖成苗率的影响 | 第32-33页 |
2.1.3 不同甘薯基因型对茎尖成苗率的影响 | 第33页 |
2.1.4 甘薯拟脱毒苗的病毒检测 | 第33-36页 |
2.1.4.1 症状学法检测结果 | 第33-34页 |
2.1.4.2 指示植物法检测结果 | 第34页 |
2.1.4.3 NCM-ELISA法检测结果 | 第34页 |
2.1.4.4 RT-PCR法检测SPFMV结果 | 第34-35页 |
2.1.4.5 脱毒甘薯与带毒甘薯无菌试管苗生长比较研究结果 | 第35-36页 |
2.1.5 不同培养方式对脱毒试管苗生长的影响 | 第36页 |
2.2 甘薯离体遗传转化系统优化的研究 | 第36-43页 |
2.2.1 选择压的确定 | 第36-37页 |
2.2.2 抗生素抑菌浓度的确定 | 第37-38页 |
2.2.3 各种因素对转化频率的影响 | 第38-43页 |
2.2.3.1 菌液浓度及浸染时间对Kan~r芽获得率的影响 | 第38-39页 |
2.2.3.2 预培养和共培养时间对遗传转化频率影响 | 第39-40页 |
2.2.3.3 不同光照条件对甘薯遗传转化频率的影响 | 第40-41页 |
2.2.3.4 AgNO_3对遗传转化的影响 | 第41-42页 |
2.2.3.5 乙酰丁香酮处理对遗传转化的影响 | 第42-43页 |
2.2.4 转基因植株GUS组织化学法检测结果 | 第43页 |
2.3 外源10KD玉米醇溶蛋白基因的导入及其在转基因甘薯中的表达研究 | 第43-48页 |
2.3.1 拟转基因甘薯植株的PCR法鉴定 | 第43-44页 |
2.3.2 甘薯块根贮藏蛋白基因启动子诱导表达的研究 | 第44-45页 |
2.3.2.1 蔗糖对甘薯块根贮藏蛋白基因启动子诱导表达的作用 | 第44-45页 |
2.3.2.2 蛋白质SDS-PAGE分析结果 | 第45页 |
2.3.3 转基因甘薯植株的研究 | 第45-48页 |
2.3.3.1 背景性状——转基因植株形态及生长状况分析 | 第45-46页 |
2.3.3.2 目标性状——总蛋白含量的变化 | 第46-47页 |
2.3.3.3 SDS-PAGE分析结果 | 第47页 |
2.3.3.4 目标性状——氨基酸含量分析结果 | 第47-48页 |
3 讨论 | 第48-54页 |
3.1 甘薯良种脱毒种苗繁育体系的建立 | 第48-49页 |
3.2 甘薯离体遗传转化系统优化的研究 | 第49-51页 |
3.3 外源10KD玉米醇溶蛋白基因的导入及其在转基因甘薯中的表达研究 | 第51-54页 |
结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
图版 | 第60-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
在读硕士期间发表学术论文目录 | 第66页 |