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生麦芽糖α-淀粉酶基因的克隆与鉴定

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
目录第5-7页
1 前言第7-15页
   ·生麦芽糖α-淀粉酶的涵义及性质第7-10页
     ·淀粉水解酶的分类及α-淀粉酶家族成员第7-9页
     ·生麦芽糖α-淀粉酶的基本特性第9-10页
     ·生麦芽糖α-淀粉酶基因的细菌来源第10页
   ·生麦芽糖α-淀粉酶的应用第10-12页
     ·生麦芽糖α-淀粉酶在淀粉糖化工业方面的应用第11页
     ·生麦芽糖α-淀粉酶在面粉工业方面的应用第11-12页
   ·国内外研究进展第12-14页
   ·本文的主要研究内容第14-15页
2 材料和方法第15-25页
   ·材料第15-18页
     ·菌株和质粒第15页
     ·主要分子生物学试剂和化学试剂第15页
     ·常用溶液及培养基的配制第15-17页
     ·实验主要仪器第17-18页
   ·方法第18-25页
     ·芽孢杆菌染色体DNA 的提取第18页
     ·引物设计及生麦芽糖α-淀粉酶基因的扩增第18-19页
     ·生麦芽糖α-淀粉酶基因的克隆第19-20页
     ·生麦芽糖α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的异源表达第20-21页
     ·粗酶液的制备第21页
     ·蛋白质测定和SDS-PAGE 电泳第21页
     ·重组酶酶活力的测定第21-22页
     ·重组酶酶学性质分析第22页
     ·重组酶的水解性质分析第22-23页
     ·重组蛋白复性第23-25页
3 结果第25-43页
   ·B. licheniformis ATCC14580 生麦芽糖α-淀粉酶基因amyM-Bl 的克隆、表达与鉴定第25-34页
     ·amyM-Bl 的扩增第25页
     ·amyM-Bl 在pBlueScriptⅡSK(-)中的亚克隆第25-26页
     ·amyM-Bl 的序列测定及分析第26-32页
     ·重组表达质粒pET-28a-amyM-Bl 的构建第32-33页
     ·amyM-Bl 在E. coli BL21 (DE3)中的表达第33-34页
   ·重组生麦芽糖α-淀粉酶AmyM-Bl 的酶学性质分析和水解性质分析第34-38页
     ·重组酶酶活力的测定第34页
     ·重组酶AmyM-Bl 的基本性质第34-37页
     ·重组酶AmyM-Bl 的水解性质第37-38页
   ·B. cereus CICIM-80627 生麦芽糖α-淀粉酶基因amyM-Bc 的扩增、序列测定与分析第38-40页
     ·amyM-Bc 的扩增第38页
     ·amyM-Bc 基因的序列测定与分析第38-40页
   ·B. cereus CICIM-80627 生麦芽糖α-淀粉酶基因amyM-Bc 的克隆与表达第40-43页
     ·重组质粒pET-28a-amyM-Bc 的构建第40-41页
     ·amyM-Bc 在E. coli BL21 (DE3)中的表达第41-42页
     ·重组蛋白AmyM-Bc 的复性研究第42-43页
4 讨论第43-45页
主要研究结论第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-50页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第50页

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