中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-12页 |
第一章 前言 | 第12-30页 |
·基因表达与蛋白可逆磷酸化 | 第12-15页 |
·真核生物的蛋白激酶与蛋白磷酸酶 | 第15-24页 |
·蛋白激酶的重要性及其分类 | 第15-17页 |
·蛋白磷酸酶 | 第17-24页 |
·真核生物基因表达调控及转录因子参与调控简介 | 第24-30页 |
·真核生物基因表达调控 | 第24-26页 |
·转录因子参与基因表达调控 | 第26-30页 |
第二章 实验部分之材料与方法 | 第30-60页 |
·材料与试剂 | 第30-31页 |
·材料 | 第30页 |
·试剂与仪器 | 第30-31页 |
·方法 | 第31-60页 |
·小鼠基因组DNA(genomic DNA)的提取 | 第31-33页 |
·小鼠PP2A-Aα基因启动子的克隆 | 第33页 |
·小鼠PP2A-Aα基因启动子删除突变质粒的构建 | 第33-34页 |
·PCR产物的克隆及序列分析 | 第34-35页 |
·小鼠PP2A-Aα基因启动子体外定点突变质粒的构建 | 第35-38页 |
·转染用高纯质粒的提取及其浓度的测定 | 第38-39页 |
·WESTERN BLOT技术检测ARPE-19和FHL124细胞系中ETS-1,CREB,AP-2α和SP1的表达水平 | 第39-43页 |
·ARPE-19和FHL124细胞的培养及其共转染分析 | 第43-44页 |
·小鼠PP2A-Aα基因核心启动子A5活性与转录因子ETS-1,CREB,AP-2A或SP1剂量的关系 | 第44-46页 |
·用双荧光素酶试剂盒检测细胞转染后其荧光素酶的活性 | 第46-47页 |
·ARPE和FHL124细胞核蛋白的提取 | 第47-49页 |
·凝胶迁移滞后方法分析ARPE-19和FHL124核蛋白中各转录因子与PP2A-Aα基因启动子序列的体外相互作用 | 第49-56页 |
·染色质免疫沉降法分析转录因子ETS-1,CREB与小鼠PP2A-AA基因启动子序列的体内结合情况 | 第56-60页 |
第三章 实验结果 | 第60-92页 |
·小鼠PP2A-Aα基因启动子的克隆 | 第60-62页 |
·小鼠PP2A-Aα基因启动子序列的初步分析及从5′端删除部分序列质粒的构建 | 第62-64页 |
·用高纯质粒A1,A2,A3,A4,A5和A6转染ARPE-19细胞及双荧光报告基因系统定义PP2A-Aα基础启动子与核心启动子区 | 第64-66页 |
·PP2A-Aα核心启动子中多个顺式作用元件的软件预测结果 | 第66-67页 |
·WESTERN BLOT结果证实多个转录因子在不同的视觉细胞ARPE-19和FHL124细胞系中都有表达 | 第67-69页 |
·小鼠PP2A-Aα基因核心启动子A5与突变转录因子ETS-1,CREB,AP-2α或SP1结合序列后其相对荧光素酶活性 | 第69-74页 |
·小鼠PP2A-Aα基因核心启动子A5活性与转录因子ETS-1,CREB,AP-2α或SP1不同剂量间的关系 | 第74-79页 |
·凝胶迁移滞后实验检测转录因子ETS-1,CREB,AP-2A或SP1在体外与小鼠PP2A-Aα基因启动子序列的结合 | 第79-89页 |
·染色质免疫沉降分析证实ETS-1和CREB在体内能结合到PP2A-A基因的启动子上 | 第89-92页 |
第四章 讨论 | 第92-115页 |
·蛋白磷酸酶2A(PP2A)是一个三聚体蛋白复合物 | 第92-93页 |
·蛋白磷酸酶2A(PROTEIN PHOSPHATASE 2A,PP2A)的重要作用 | 第93-101页 |
·PP2A参与Rb蛋白家族的活性调节 | 第94-95页 |
·PP2A在Wnt信号通路中的作用 | 第95-96页 |
·PP2A在MAP激酶通路中的作用 | 第96-97页 |
·PP2A在肿瘤发生中的作用 | 第97-99页 |
·PP2A在细胞凋亡中的作用 | 第99-101页 |
·PP2AA(PR65/A)亚基突变导致人的多种肿瘤发生 | 第101-105页 |
·转录因子ETS-1及其在调节小鼠PP2A-Aα基因表达中的作用 | 第105-108页 |
·转录因子CREB在调节PP2A-Aα基因表达中亦起着非常重要的作用 | 第108-111页 |
·转录因子AP-2α也参与PP2A-Aα基因表达的调控 | 第111-114页 |
·转录因子SP1负向调节PP2A-Aα基因的表达 | 第114-115页 |
第五章 研究总结与展望 | 第115-118页 |
参考文献 | 第118-129页 |
博士学习期间撰写、发表的主要论文 | 第129-131页 |
致谢 | 第131-133页 |