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丝裂原激活蛋白激酶对金鱼发育的调控作用

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-12页
第一章 前言第12-39页
   ·、MAPK信号通路的成员第12-14页
   ·、MAPK的蛋白结构第14-15页
     ·MAPK的一级结构第14页
     ·MAPK的二级结构和超二级结构特征第14-15页
   ·、MAPK通路模式第15-16页
   ·、MAPK的激活第16页
   ·、哺乳动物MAPK通路第16-31页
     ·ERK通路第17-24页
     ·JNK信号转导通路第24-29页
     ·p38信号转导通路第29-31页
   ·、其他有机体中的MAPK通路第31-34页
     ·秀丽线虫第32页
     ·黑腹果蝇第32-33页
     ·植物中的MAPK通路第33-34页
   ·、MAPK信号转导通路间的关系第34-35页
   ·、结束语第35-39页
第二章 MAPK在金鱼不同组织中表达活性模式第39-52页
   ·、实验材料第39-40页
   ·、实验方法第40-44页
   ·、实验结果第44-49页
   ·、讨论第49-52页
第三章 金鱼ERK基因cDNA的克隆第52-70页
   ·、实验材料第52-53页
     ·实验鱼第52页
     ·菌种与试剂第52-53页
   ·、实验方法第53-62页
     ·总RNA提取第53页
     ·反转录cDNA第一链的合成第53-54页
     ·PCR获得cDNA编码区中间部分第54-56页
     ·金鱼erk基因的3'端克隆第56-59页
     ·金鱼erk基因的5'端克隆第59-62页
   ·、结果第62-67页
     ·金鱼erk2基因部分序列的克隆结果第62-63页
     ·金鱼erk基因的核苷酸序列比较分析第63-66页
     ·金鱼ERK2蛋白质的氨基酸序列比较分析第66-67页
   ·、讨论第67-70页
第四章、ERK和JNK在金鱼不同发育时期及组织中的表达模式第70-83页
   ·、实验材料第70-71页
     ·实验鱼第70页
     ·试剂与仪器第70-71页
   ·、方法第71-72页
     ·总RNA提取第71页
       ·紫外分光光度计检测第71页
     ·反转录cDNA第一链的合成第71页
     ·PCR反应体系和条件第71-72页
   ·、实验结果第72-78页
     ·金鱼不同发育时期胚胎总RNA制备第72-73页
     ·ERK在金鱼不同发育时期RT-PCR结果第73-74页
     ·ERK在金鱼不同组织中RT-PCR结果第74-75页
     ·JNK在金鱼不同发育时期RT-PCR结果第75-77页
     ·JNK在金鱼不同组织中RT-PCR结果第77-78页
   ·、讨论第78-83页
第五章 抑制ERK信号通路对金鱼胚胎发育的影响第83-109页
   ·、实验材料第83页
   ·、实验方法第83-95页
     ·外源基因的制备第83-86页
     ·显微注射第86-89页
     ·抑制剂处理胚胎第89-92页
     ·DAPI染色检测胚胎细胞凋亡第92页
     ·组织切片第92-94页
     ·免疫共沉淀技术第94-95页
   ·、实验结果第95-104页
     ·注射DNM-ERK基因对金鱼胚胎发育影响的表型结果第95-96页
     ·抑制剂U0126浸泡对金鱼胚胎发育影响的表型结果第96-97页
     ·胚胎发育畸形的数据统计第97页
     ·注射DNM-ERK基因对金鱼胚胎发育影响的组织切片结果第97-100页
     ·注射DNM-ERK金鱼胚胎DAPI染色图片第100-102页
     ·western blot检测各组胚胎内源ERK激酶活性结果第102-104页
   ·、讨论第104-109页
第六章 抑制JNK信号通路对金鱼胚胎发育的影响第109-128页
   ·、实验材料第109页
   ·、实验方法第109-114页
     ·DNM-JNK及pCMV外源基因的制备第109页
     ·显微注射第109-111页
     ·抑制剂处理胚胎第111-113页
     ·DAPI染色检测金鱼胚胎中的细胞凋亡第113页
     ·荧光免疫组化技术研究金鱼整体胚胎中JNK的表达第113-114页
     ·组织切片第114页
   ·、实验结果第114-122页
     ·注射了DNM-JNK基因后对金鱼胚胎发育影响的表型结果第114-115页
     ·JNK抑制剂处理对金鱼胚胎发育影响的表型结果第115页
     ·胚胎发育畸形的数据统计第115-116页
     ·注射了DNM-JNK基因后对金鱼胚胎发育影响的组织切片结果第116-118页
     ·整体胚胎荧光免疫组化结果第118-121页
     ·注射DNMJNK金鱼胚胎DAPI染色图片第121-122页
   ·、讨论第122-128页
第七章 结语第128-130页
参考文献第130-154页
缩略词表第154-155页
主要实验试剂和仪器第155-156页
博士学习期间撰写、发表的主要论文及获奖情况第156-157页
致谢第157-159页

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