中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-12页 |
第一章 前言 | 第12-39页 |
·、MAPK信号通路的成员 | 第12-14页 |
·、MAPK的蛋白结构 | 第14-15页 |
·MAPK的一级结构 | 第14页 |
·MAPK的二级结构和超二级结构特征 | 第14-15页 |
·、MAPK通路模式 | 第15-16页 |
·、MAPK的激活 | 第16页 |
·、哺乳动物MAPK通路 | 第16-31页 |
·ERK通路 | 第17-24页 |
·JNK信号转导通路 | 第24-29页 |
·p38信号转导通路 | 第29-31页 |
·、其他有机体中的MAPK通路 | 第31-34页 |
·秀丽线虫 | 第32页 |
·黑腹果蝇 | 第32-33页 |
·植物中的MAPK通路 | 第33-34页 |
·、MAPK信号转导通路间的关系 | 第34-35页 |
·、结束语 | 第35-39页 |
第二章 MAPK在金鱼不同组织中表达活性模式 | 第39-52页 |
·、实验材料 | 第39-40页 |
·、实验方法 | 第40-44页 |
·、实验结果 | 第44-49页 |
·、讨论 | 第49-52页 |
第三章 金鱼ERK基因cDNA的克隆 | 第52-70页 |
·、实验材料 | 第52-53页 |
·实验鱼 | 第52页 |
·菌种与试剂 | 第52-53页 |
·、实验方法 | 第53-62页 |
·总RNA提取 | 第53页 |
·反转录cDNA第一链的合成 | 第53-54页 |
·PCR获得cDNA编码区中间部分 | 第54-56页 |
·金鱼erk基因的3'端克隆 | 第56-59页 |
·金鱼erk基因的5'端克隆 | 第59-62页 |
·、结果 | 第62-67页 |
·金鱼erk2基因部分序列的克隆结果 | 第62-63页 |
·金鱼erk基因的核苷酸序列比较分析 | 第63-66页 |
·金鱼ERK2蛋白质的氨基酸序列比较分析 | 第66-67页 |
·、讨论 | 第67-70页 |
第四章、ERK和JNK在金鱼不同发育时期及组织中的表达模式 | 第70-83页 |
·、实验材料 | 第70-71页 |
·实验鱼 | 第70页 |
·试剂与仪器 | 第70-71页 |
·、方法 | 第71-72页 |
·总RNA提取 | 第71页 |
·紫外分光光度计检测 | 第71页 |
·反转录cDNA第一链的合成 | 第71页 |
·PCR反应体系和条件 | 第71-72页 |
·、实验结果 | 第72-78页 |
·金鱼不同发育时期胚胎总RNA制备 | 第72-73页 |
·ERK在金鱼不同发育时期RT-PCR结果 | 第73-74页 |
·ERK在金鱼不同组织中RT-PCR结果 | 第74-75页 |
·JNK在金鱼不同发育时期RT-PCR结果 | 第75-77页 |
·JNK在金鱼不同组织中RT-PCR结果 | 第77-78页 |
·、讨论 | 第78-83页 |
第五章 抑制ERK信号通路对金鱼胚胎发育的影响 | 第83-109页 |
·、实验材料 | 第83页 |
·、实验方法 | 第83-95页 |
·外源基因的制备 | 第83-86页 |
·显微注射 | 第86-89页 |
·抑制剂处理胚胎 | 第89-92页 |
·DAPI染色检测胚胎细胞凋亡 | 第92页 |
·组织切片 | 第92-94页 |
·免疫共沉淀技术 | 第94-95页 |
·、实验结果 | 第95-104页 |
·注射DNM-ERK基因对金鱼胚胎发育影响的表型结果 | 第95-96页 |
·抑制剂U0126浸泡对金鱼胚胎发育影响的表型结果 | 第96-97页 |
·胚胎发育畸形的数据统计 | 第97页 |
·注射DNM-ERK基因对金鱼胚胎发育影响的组织切片结果 | 第97-100页 |
·注射DNM-ERK金鱼胚胎DAPI染色图片 | 第100-102页 |
·western blot检测各组胚胎内源ERK激酶活性结果 | 第102-104页 |
·、讨论 | 第104-109页 |
第六章 抑制JNK信号通路对金鱼胚胎发育的影响 | 第109-128页 |
·、实验材料 | 第109页 |
·、实验方法 | 第109-114页 |
·DNM-JNK及pCMV外源基因的制备 | 第109页 |
·显微注射 | 第109-111页 |
·抑制剂处理胚胎 | 第111-113页 |
·DAPI染色检测金鱼胚胎中的细胞凋亡 | 第113页 |
·荧光免疫组化技术研究金鱼整体胚胎中JNK的表达 | 第113-114页 |
·组织切片 | 第114页 |
·、实验结果 | 第114-122页 |
·注射了DNM-JNK基因后对金鱼胚胎发育影响的表型结果 | 第114-115页 |
·JNK抑制剂处理对金鱼胚胎发育影响的表型结果 | 第115页 |
·胚胎发育畸形的数据统计 | 第115-116页 |
·注射了DNM-JNK基因后对金鱼胚胎发育影响的组织切片结果 | 第116-118页 |
·整体胚胎荧光免疫组化结果 | 第118-121页 |
·注射DNMJNK金鱼胚胎DAPI染色图片 | 第121-122页 |
·、讨论 | 第122-128页 |
第七章 结语 | 第128-130页 |
参考文献 | 第130-154页 |
缩略词表 | 第154-155页 |
主要实验试剂和仪器 | 第155-156页 |
博士学习期间撰写、发表的主要论文及获奖情况 | 第156-157页 |
致谢 | 第157-159页 |