| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 缩写词表 | 第8-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-31页 |
| ·模式植物拟南芥研究概况 | 第15-18页 |
| ·拟南芥的生物学特性 | 第15页 |
| ·拟南芥的遗传学特性 | 第15-17页 |
| ·影响拟南芥生长的主要因素 | 第17-18页 |
| ·镁离子化学特性及其在植物中的生理作用研究 | 第18-22页 |
| ·镁离子概述 | 第18-20页 |
| ·镁离子的独特化学特性 | 第20页 |
| ·镁离子在植物中的生理作用 | 第20-22页 |
| ·镁离子转运蛋白研究 | 第22-29页 |
| ·原核生物中的CorA镁离子转运蛋白 | 第22-24页 |
| ·原核生物中MgtA及MgtB镁离子转运蛋白 | 第24-25页 |
| ·酵母抗铝毒性ALR1和ALR2镁离子转运蛋白 | 第25-26页 |
| ·酵母线粒体膜上MRS2镁离子转运蛋白 | 第26页 |
| ·植物中Mg~(2+)转运蛋白 | 第26-29页 |
| ·本课题研究的背景和意义 | 第29-31页 |
| ·本课题研究的背景 | 第29页 |
| ·本课题研究的意义 | 第29-31页 |
| 第二章 AtMGT7基因的克隆及序列分析 | 第31-43页 |
| ·前言 | 第31页 |
| ·材料与方法 | 第31-39页 |
| ·实验材料与克隆载体 | 第31-32页 |
| ·各种酶类及试剂、药品 | 第32-33页 |
| ·生物信息学分析的主要软件及数据库 | 第33页 |
| ·cDNA克隆 | 第33-39页 |
| ·结果 | 第39-40页 |
| ·AtMGT7基因cDNA克隆 | 第39-40页 |
| ·分析 | 第40-43页 |
| 第三章 AtMGT7基因功能互补分析 | 第43-59页 |
| ·前言 | 第43页 |
| ·材料与方法 | 第43-50页 |
| ·试验材料与表达载体 | 第43-44页 |
| ·各种试剂与培养基 | 第44页 |
| ·数据分析软件 | 第44页 |
| ·MM281感受态细胞的制备 | 第44-45页 |
| ·pTrc99A-AtMGT7表达载体转化MM281细胞 | 第45-46页 |
| ·菌落的PCR及酶切检测 | 第46页 |
| ·转基因MM281细菌平板培养 | 第46-47页 |
| ·转基因MM281细菌液体培养 | 第47页 |
| ·细菌中Mg~(2+)含量的测定 | 第47页 |
| ·~(63)Ni~(2+)同位素示踪实验 | 第47-48页 |
| ·~(63)Ni~(2+)示踪实验 | 第48-49页 |
| ·其它二价阳离子的转运对MM821生长的影响 | 第49-50页 |
| ·结果 | 第50-57页 |
| ·pTrc-99A-AtMGT7表达载体的构建 | 第50页 |
| ·AtMGT7a互补细菌缺失镁离子转运蛋白功能,AtMGT7b则不能 | 第50-52页 |
| ·AtMGT7a是一种低亲和性镁离子转运蛋白 | 第52-54页 |
| ·AtMGT7a在二价离子中对Zn~(2+)、Mg~(2+)具有高度选择性 | 第54-55页 |
| ·AtMGT7a和AtMGT7b蛋白的表达改变MM281细菌对离子的敏感性 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| 第四章 转AtMGT7基因HEK293细胞的膜片钳分析 | 第59-74页 |
| ·前言 | 第59-61页 |
| ·材料与方法 | 第61-68页 |
| ·试验材料与表达载体 | 第61页 |
| ·pEGFP-N3-AtMGT7表达载体构建 | 第61-62页 |
| ·HEK293细胞的培养 | 第62-63页 |
| ·细胞转染 | 第63-64页 |
| ·荧光共定位分析(Co-locolization) | 第64-65页 |
| ·表达蛋白质的Western分析 | 第65-66页 |
| ·膜片钳观察 | 第66-68页 |
| ·结果 | 第68-72页 |
| ·pEGFP-N3-AtMGT7表达载体的构建 | 第68-69页 |
| ·AtMGT7蛋白在HEK293细胞中的表达 | 第69-70页 |
| ·AtMGT7a在HEK293细胞中调控镁离子转运 | 第70-72页 |
| ·讨论 | 第72-74页 |
| 第五章 AtMGT7基因表达模式分析 | 第74-92页 |
| ·前言 | 第74-75页 |
| ·材料与方法 | 第75-84页 |
| ·试验材料与表达载体 | 第75-76页 |
| ·各种培养基、酶及试剂 | 第76页 |
| ·AtMGT7基因半定量RT-PCR | 第76页 |
| ·AtMGT7基因组织表达 | 第76-80页 |
| ·AtMGT7基因亚细胞定位 | 第80-84页 |
| ·结果 | 第84-90页 |
| ·RT-PCR显示,AtMGT7a和AtMGT7b基因在拟南芥植物的不同组织中转录 | 第84页 |
| ·启动子表达载体构建与转基因植株的获得 | 第84-86页 |
| ·GUS显色分析,AtMGT7基因启动子在转基因植物的多个组织中具有活性 | 第86-88页 |
| ·AtMGT7基因在质膜和亚细胞器膜上表达 | 第88-90页 |
| ·讨论 | 第90-92页 |
| 第六章 AtMGT7基因突变体与过表达植株表形观察 | 第92-107页 |
| ·前言 | 第92-93页 |
| ·材料与方法 | 第93-98页 |
| ·试验材料与表达载体 | 第93页 |
| ·AtMGT7基因突变体植株的筛选 | 第93-95页 |
| ·AtMGT7基因过表达植株的获得 | 第95-97页 |
| ·表型观察 | 第97-98页 |
| ·结果 | 第98-104页 |
| ·AtMGT7基因突变纯合体植株的获得 | 第98-99页 |
| ·过表达转基因植株的获得 | 第99-100页 |
| ·AtMGT7基因突变体植株与过表达植株的RNA转录水平分析 | 第100-102页 |
| ·突变体植株与过表达植株的表型观察 | 第102页 |
| ·突变体植株、过表达植株与野生型植株的镁离子含量比较 | 第102-103页 |
| ·突变体植株、过表达植株与野生型植株的叶绿素含量比较 | 第103-104页 |
| ·讨论 | 第104-107页 |
| 第七章 主要研究结论及进一步研究设想 | 第107-110页 |
| ·主要研究结论 | 第107-108页 |
| ·进一步研究设想 | 第108-110页 |
| 参考文献 | 第110-131页 |
| 论文发表与主持科研课题情况 | 第131-132页 |
| 致谢 | 第132-133页 |
