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人表皮生长因子(hEGF)在大肠杆菌中的表达及其多克隆抗体的制备

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-6页
目录第6-8页
1 引言第8-16页
   ·表皮生长因子(EGF)概述第8-12页
     ·EGF的结构与功能关系第8-9页
     ·EGF受体第9-10页
     ·EGF家族第10-11页
     ·EGF的生物学效应及应用第11-12页
   ·多克隆抗体技术第12-15页
     ·抗原和抗体第12-14页
     ·多克隆抗体的制备第14页
     ·多克隆抗体与单克隆抗体的比较第14-15页
     ·多克隆抗体的应用第15页
   ·选题依据及意义第15-16页
2 材料与方法第16-23页
   ·实验材料第16-17页
     ·动物材料第16页
     ·质粒和菌种第16页
     ·化学试剂第16页
     ·hEGF引物第16-17页
   ·实验方法第17-23页
     ·原核表达载体pGEX-2T-hEGF的构建第17-21页
       ·目的基因hEGF的人工合成第17-18页
       ·目的基因hEGF与pGEM-T载体的连接第18页
       ·重组质粒pGEM-T-hEGF的鉴定第18-20页
       ·目的基因hEGF与载体pGEX-2T的连接第20页
       ·重组质粒pGEX-2T-hEGF的鉴定第20-21页
     ·GST-hEGF融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达第21页
     ·GST-hEGF融合蛋白抗体的制备及抗体效价的检测第21-23页
       ·利用聚丙烯凝胶电泳纯化的微量GST-hEGF融合蛋白免疫BALB/c小鼠第21-22页
       ·GST-hEGF融合蛋白抗体的Western-blot检测第22-23页
3 结果第23-28页
   ·目的基因hEGF的人工合成第23页
   ·重组质粒pGEM-T-hEGF的构建第23-24页
   ·重组质粒pGEM-T-hEGF的鉴定第24页
   ·原核表达质粒pGEX-2T-hEGF的构建第24-25页
   ·原核表达质粒pGEX-2T-hEGF的鉴定第25页
   ·GST-hEGF融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达第25-26页
     ·IPTG诱导蛋白的表达第25-26页
     ·利用SDS-PAGE聚丙烯凝胶电泳确定GST及GST-hEGF融合蛋白相对分子量第26页
   ·GST-hEGF融合蛋白抗体的制备及抗体检测第26-28页
     ·GST-hEGF融合蛋白抗体的制备第26页
     ·GST-hEGF融合蛋白抗体效价的Western-blot检测第26-28页
4 讨论第28-30页
   ·原核表达质粒pGEX-2T-hEGF的构建第28页
   ·利用SDS-PAGE聚丙烯凝胶电泳制备GST-hEGF融合蛋白的多克隆抗体第28-29页
   ·GST-hEGF融合蛋白抗体的检测第29-30页
5 结论第30-31页
参考文献第31-34页
致谢第34页

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