中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
目录 | 第6-8页 |
1 引言 | 第8-16页 |
·表皮生长因子(EGF)概述 | 第8-12页 |
·EGF的结构与功能关系 | 第8-9页 |
·EGF受体 | 第9-10页 |
·EGF家族 | 第10-11页 |
·EGF的生物学效应及应用 | 第11-12页 |
·多克隆抗体技术 | 第12-15页 |
·抗原和抗体 | 第12-14页 |
·多克隆抗体的制备 | 第14页 |
·多克隆抗体与单克隆抗体的比较 | 第14-15页 |
·多克隆抗体的应用 | 第15页 |
·选题依据及意义 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-23页 |
·实验材料 | 第16-17页 |
·动物材料 | 第16页 |
·质粒和菌种 | 第16页 |
·化学试剂 | 第16页 |
·hEGF引物 | 第16-17页 |
·实验方法 | 第17-23页 |
·原核表达载体pGEX-2T-hEGF的构建 | 第17-21页 |
·目的基因hEGF的人工合成 | 第17-18页 |
·目的基因hEGF与pGEM-T载体的连接 | 第18页 |
·重组质粒pGEM-T-hEGF的鉴定 | 第18-20页 |
·目的基因hEGF与载体pGEX-2T的连接 | 第20页 |
·重组质粒pGEX-2T-hEGF的鉴定 | 第20-21页 |
·GST-hEGF融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第21页 |
·GST-hEGF融合蛋白抗体的制备及抗体效价的检测 | 第21-23页 |
·利用聚丙烯凝胶电泳纯化的微量GST-hEGF融合蛋白免疫BALB/c小鼠 | 第21-22页 |
·GST-hEGF融合蛋白抗体的Western-blot检测 | 第22-23页 |
3 结果 | 第23-28页 |
·目的基因hEGF的人工合成 | 第23页 |
·重组质粒pGEM-T-hEGF的构建 | 第23-24页 |
·重组质粒pGEM-T-hEGF的鉴定 | 第24页 |
·原核表达质粒pGEX-2T-hEGF的构建 | 第24-25页 |
·原核表达质粒pGEX-2T-hEGF的鉴定 | 第25页 |
·GST-hEGF融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第25-26页 |
·IPTG诱导蛋白的表达 | 第25-26页 |
·利用SDS-PAGE聚丙烯凝胶电泳确定GST及GST-hEGF融合蛋白相对分子量 | 第26页 |
·GST-hEGF融合蛋白抗体的制备及抗体检测 | 第26-28页 |
·GST-hEGF融合蛋白抗体的制备 | 第26页 |
·GST-hEGF融合蛋白抗体效价的Western-blot检测 | 第26-28页 |
4 讨论 | 第28-30页 |
·原核表达质粒pGEX-2T-hEGF的构建 | 第28页 |
·利用SDS-PAGE聚丙烯凝胶电泳制备GST-hEGF融合蛋白的多克隆抗体 | 第28-29页 |
·GST-hEGF融合蛋白抗体的检测 | 第29-30页 |
5 结论 | 第30-31页 |
参考文献 | 第31-34页 |
致谢 | 第34页 |