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抗人酸性成纤维细胞生长因子单链抗体在烟草中的表达

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-8页
1 引言第8-14页
   ·scFv 的优点及其表达体系第8-9页
     ·scFv 的原核表达体系第8-9页
     ·scFv 的真核表达体系第9页
   ·植物生物反应器表达抗体第9-12页
     ·scFv 稳定表达系统第10-11页
     ·scFv 瞬时表达系统第11-12页
   ·立题依据第12-14页
2 材料与方法第14-24页
   ·实验材料第14-15页
     ·植物材料第14页
     ·菌种第14页
     ·质粒第14页
     ·化学药品及试剂第14-15页
     ·培养基第15页
     ·PCR 扩增引物第15页
   ·实验方法第15-19页
     ·p35S-30B-scFv 表达体系构建第15-16页
     ·农杆菌感受态的制备第16页
     ·冻融法转化农杆菌第16-17页
     ·侵染材料烟草幼苗的培养第17页
     ·农杆菌侵染烟草第17页
     ·侵染途径的筛选及GFP 表达的表型观察第17-19页
   ·依据报告基因GFP 的表达,分析评价表达系统工作情况第19页
   ·烟草中外源基因scFv 的检测第19-23页
     ·scFv RNA 水平的检测第19页
     ·scFv 蛋白水平的检测第19-22页
     ·ELISA 检测计算烟草中scFv 表达量第22-23页
   ·ELISA 检测表达的抗aFGF scFv 蛋白与抗原的结合活性第23-24页
3 结果第24-32页
   ·p355-30B-scFv 载体构建第24-25页
   ·EHA105 农杆菌转化第25页
   ·农杆菌生长曲线测定第25页
   ·农杆菌侵染后的烟草病毒症状第25-26页
   ·侵染途径的筛选及GFP 表达的表型观察第26-27页
     ·注射侵染法结果第26-27页
     ·真空侵染法结果第27页
   ·注射法和真空侵染法简单的比较第27-28页
   ·外源基因scFv 在烟草中的表达第28-30页
     ·烟草中表达 scFv RNA 水平检测第28页
     ·烟草中表达抗 aFGF-scFv 蛋白水平检测第28-30页
   ·烟草中表达的scFv 占总可溶性蛋白的量第30-31页
   ·ELASA 检测植物中表达的抗aFGF-scfv 蛋白与抗原的结合活性第31-32页
4 讨论第32-35页
   ·植物病毒表达载体的建立第32-33页
   ·两种侵染方法简单的比较第33页
   ·烟草中scFv 的表达第33-35页
5 结论第35-36页
参考文献第36-40页
致谢第40页

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