中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-8页 |
1 引言 | 第8-14页 |
·scFv 的优点及其表达体系 | 第8-9页 |
·scFv 的原核表达体系 | 第8-9页 |
·scFv 的真核表达体系 | 第9页 |
·植物生物反应器表达抗体 | 第9-12页 |
·scFv 稳定表达系统 | 第10-11页 |
·scFv 瞬时表达系统 | 第11-12页 |
·立题依据 | 第12-14页 |
2 材料与方法 | 第14-24页 |
·实验材料 | 第14-15页 |
·植物材料 | 第14页 |
·菌种 | 第14页 |
·质粒 | 第14页 |
·化学药品及试剂 | 第14-15页 |
·培养基 | 第15页 |
·PCR 扩增引物 | 第15页 |
·实验方法 | 第15-19页 |
·p35S-30B-scFv 表达体系构建 | 第15-16页 |
·农杆菌感受态的制备 | 第16页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第16-17页 |
·侵染材料烟草幼苗的培养 | 第17页 |
·农杆菌侵染烟草 | 第17页 |
·侵染途径的筛选及GFP 表达的表型观察 | 第17-19页 |
·依据报告基因GFP 的表达,分析评价表达系统工作情况 | 第19页 |
·烟草中外源基因scFv 的检测 | 第19-23页 |
·scFv RNA 水平的检测 | 第19页 |
·scFv 蛋白水平的检测 | 第19-22页 |
·ELISA 检测计算烟草中scFv 表达量 | 第22-23页 |
·ELISA 检测表达的抗aFGF scFv 蛋白与抗原的结合活性 | 第23-24页 |
3 结果 | 第24-32页 |
·p355-30B-scFv 载体构建 | 第24-25页 |
·EHA105 农杆菌转化 | 第25页 |
·农杆菌生长曲线测定 | 第25页 |
·农杆菌侵染后的烟草病毒症状 | 第25-26页 |
·侵染途径的筛选及GFP 表达的表型观察 | 第26-27页 |
·注射侵染法结果 | 第26-27页 |
·真空侵染法结果 | 第27页 |
·注射法和真空侵染法简单的比较 | 第27-28页 |
·外源基因scFv 在烟草中的表达 | 第28-30页 |
·烟草中表达 scFv RNA 水平检测 | 第28页 |
·烟草中表达抗 aFGF-scFv 蛋白水平检测 | 第28-30页 |
·烟草中表达的scFv 占总可溶性蛋白的量 | 第30-31页 |
·ELASA 检测植物中表达的抗aFGF-scfv 蛋白与抗原的结合活性 | 第31-32页 |
4 讨论 | 第32-35页 |
·植物病毒表达载体的建立 | 第32-33页 |
·两种侵染方法简单的比较 | 第33页 |
·烟草中scFv 的表达 | 第33-35页 |
5 结论 | 第35-36页 |
参考文献 | 第36-40页 |
致谢 | 第40页 |