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加替沙星、呋喃西林在食品中残留的酶联免疫检测法的研究

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
符号说明第13-14页
第一章 序言第14-28页
 第一节 加替沙星、呋喃西林概述第14-19页
     ·加替沙星概述第14-16页
     ·呋喃西林概述第16-19页
 第二节 加替沙星、呋喃西林残留检测方法第19-22页
     ·喹诺酮类抗生素残留检测方法第19-21页
       ·微生物法第19-20页
       ·仪器法第20-21页
         ·高效液相色谱法(HPLC)第20页
         ·(高效)液相-质谱联用法((HP)LC-MS)第20-21页
         ·其它仪器方法第21页
       ·酶联免疫吸附法(ELISA)第21页
       ·磁分离酶联免疫检测法(MAIA)第21页
     ·硝基呋喃类药物及其代谢物残留检测方法第21-22页
       ·液相色谱-质谱联用法(LC-MS)第21-22页
       ·(高效)液相色谱-串联质谱法((HP)LC-MS/MS)第22页
       ·酶联免疫法(ELISA)第22页
 第三节 酶联免疫检测方法(ELISA)第22-27页
     ·ELISA基本原理第22-23页
     ·ELISA检测类型第23-26页
     ·ELISA的特点第26页
     ·加替沙星、呋喃西林酶联免疫检测的研究现状第26-27页
       ·加替沙星酶联免疫检测的研究现状第26-27页
       ·呋喃西林酶联免疫吸附检测的研究现状第27页
 第四节 磁分离酶联免疫检测方法(MAIA)第27-28页
     ·MAIA基本原理第27页
     ·MAIA基本操作第27-28页
 第五节 本研究内容、目的、意义第28页
第二章 加替沙星、呋喃西林免疫原及包被抗原的制备与鉴定第28-40页
 第一节 实验材料与设备第28-30页
     ·主要试剂第28-29页
     ·主要仪器设备第29-30页
     ·主要缓冲溶液的配制第30页
 第二节 加替沙星、呋喃西林免疫原及包被抗原的制备第30-34页
     ·活化牛血清白蛋白(cBSA)的制备第30页
     ·加替沙星免疫原、包被抗原及加替沙星酶标记物的制备第30-31页
       ·EDC法加替沙星免疫原(GAT-cBSA)的制备第30-31页
       ·EDC法加替沙星包被抗原(GAT-OVA)的制备第31页
       ·EDC法酶标记加替沙星(GAT-HRP)的制备第31页
     ·呋喃西林免疫原及包被抗原的制备第31-34页
       ·CPSEM与NPSEM的合成(图2-2)第31-32页
       ·呋喃西林免疫原(CPSEM-cBSA)的制备第32-33页
       ·呋喃西林包被抗原(SEM-OVA)的制备第33-34页
 第三节 结果与讨论第34-40页
     ·载体蛋白的选择第34-35页
     ·免疫原的鉴定方法第35页
     ·加替沙星免疫原及包被抗原的紫外吸收谱图(图3-1、图3-2)鉴定分析结果及讨论第35-37页
     ·加替沙星酶标记物的紫外吸收谱图(图3-3)鉴定分析结果及讨论第37-38页
     ·CPSEM、NPSEM结构的鉴定第38-39页
     ·呋喃西林免疫原及包被抗原紫外谱图(图3-6、3-7)鉴定分析结果及讨论第39-40页
     ·小结第40页
第三章 加替沙星、呋喃西林多克隆抗体制备与检测第40-60页
 第一节 实验材料与设备第40-42页
     ·主要试剂及材料第40-41页
     ·主要仪器及设备第41页
     ·主要缓冲溶液的配制第41-42页
 第二节 加替沙星、呋喃西林多克隆抗体的制备第42-44页
     ·免疫方案第42-43页
     ·心脏采血第43页
     ·抗体的纯化及保存第43-44页
       ·饱和硫酸铵纯化抗体及保存第43页
       ·蛋白A亲和层析法纯化抗体及保存第43-44页
 第三节 加替沙星、呋喃西林多克隆抗体的ELISA检测第44-60页
     ·加替沙星多克隆抗体的ELISA评价第44-48页
       ·间接法加替沙星抗体亲和度(效价)、灵敏度、特异性的测定第44-47页
         ·间接法加替沙星抗体效价的测定第44-45页
         ·间接法抗体与包被抗原的优选(方阵)第45-46页
         ·间接法加替沙星抗体灵敏度的测定第46页
         ·间接法加替沙星抗体特异性(交叉率)的测定第46-47页
       ·直接法加替沙星酶标记物的鉴定第47-48页
         ·羊抗兔IgG与抗体浓度的确定第47页
         ·酶标记抗原(GAT-HRP)与抗体浓度的确定第47-48页
         ·直接法加替沙星抗体灵敏度的测定第48页
     ·加替沙星多克隆抗体的MAIA评价第48-50页
       ·磁珠用量与抗体浓度的确定第49页
       ·免疫磁珠灵敏度的测定第49-50页
     ·呋喃西林多克隆抗体的ELISA评价第50页
     ·结果与分析第50-60页
       ·加替沙星抗体的检测结果与分析第50-56页
         ·间接法加替沙星抗体的效价测定第50-51页
         ·间接法加替沙星抗体灵敏度的测定第51-52页
         ·间接法加替沙星抗体特异性(交叉率)的测定第52-54页
         ·直接法加替沙星抗体的灵敏度的测定第54-55页
         ·MAIA法加替沙星抗体的灵敏度的测定第55-56页
       ·呋喃西林抗体的检测结果与分析第56-60页
         ·呋喃西林抗体的效价测定第56-57页
         ·呋喃西林抗体灵敏度的测定第57-58页
         ·呋喃西林抗体特异性的测定第58-60页
第四章 加替沙星、呋喃西林回收率的测定第60-72页
 第一节 实验材料和设备第60页
     ·主要试剂和设备第60页
 第二节 加替沙星、呋喃西林回收率的测定第60-72页
     ·加替沙星回收率测定第61-70页
       ·间接法加替沙星回收率测定第61-64页
         ·标准曲线的建立第61页
         ·生物基质的影响第61-62页
         ·回收率和变异系数的测定第62-63页
         ·结果与讨论第63-64页
       ·直接法加替沙星回收率测定第64-67页
         ·标准曲线的建立第64页
         ·生物基质的影响第64-65页
         ·回收率和变异系数的测定第65-66页
         ·结果与讨论第66-67页
       ·MAIA法加替沙星回收率测定第67-70页
         ·标准曲线的建立第67页
         ·牛奶体系中加替沙星回收率测定第67-69页
           ·基质影响的测定第67-68页
           ·回收率和变异系数的测定第68-69页
         ·猪尿体系中加替沙星回收率测定第69页
           ·回收率及变异系数的测定第69页
         ·结果与讨论第69-70页
     ·呋喃西林回收率测定第70-71页
       ·标准曲线的建立第70页
       ·回收率和变异系数的测定第70-71页
       ·结果与讨论第71页
     ·本章小结第71-72页
第五章 结论第72-74页
附图第74-76页
参考文献第76-83页
本人发表的文章和专利第83-84页
致谢第84-85页
学位论文评阅及答辩情况表第85页

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