中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
符号说明 | 第12-13页 |
第一部分 前言 | 第13-22页 |
第一章 硝基呋喃类药物概述 | 第13-14页 |
第二章 硝基呋喃类药物检测方法 | 第14-22页 |
第一节 仪器法 | 第14-16页 |
·高效液相色谱法(HPLC) | 第14-15页 |
·液相-质谱联用法(LC-MS) | 第15-16页 |
第二节 生物免疫检测法 | 第16-22页 |
·酶联免疫吸附测定法(ELISA)基本原理 | 第16页 |
·ELISA的特点 | 第16-17页 |
·ELISA的检测类型 | 第17-18页 |
·免疫原的制备 | 第18-20页 |
·载体的选择 | 第18页 |
·免疫原连接方法 | 第18-19页 |
·免疫原的鉴定方法 | 第19-20页 |
·硝基呋喃类药物酶联免疫检测的研究现状 | 第20-21页 |
·本论文设计目的和思路 | 第21-22页 |
第二部分 实验部分 | 第22-39页 |
第一章 实验材料 | 第22-24页 |
第一节 实验材料与设备 | 第22-24页 |
·实验试剂及实验耗材 | 第22-23页 |
·主要仪器设备 | 第23页 |
·主要缓冲溶液的配制 | 第23-24页 |
第二章 偶联物的制备 | 第24-31页 |
第一节 呋喃妥因及其代谢产物的偶联物的制备 | 第24-27页 |
·活化牛血清白蛋白(cBSA)的制备 | 第24页 |
·AHD衍生物的制备 | 第24页 |
·呋喃妥因及其代谢产物(AHD)免疫原的合成 | 第24-26页 |
·呋喃妥因及其代谢产物(AHD)包被抗原的合成 | 第26-27页 |
第二节 呋喃唑酮及其代谢产物的偶联物的制备 | 第27-31页 |
·AOZ衍生物的制备 | 第27页 |
·呋喃唑酮及其代谢产物(AOZ)免疫原的合成 | 第27-30页 |
·呋喃唑酮及其代谢产物(AOZ)包被抗原的合成 | 第30-31页 |
第三章 呋喃妥因和呋喃唑酮及其代谢产物多克隆抗体的制备 | 第31-33页 |
第一节 抗体的制备过程 | 第31-33页 |
·免疫方案 | 第31-32页 |
·心脏采血 | 第32页 |
·抗体的纯化与保存 | 第32-33页 |
第四章 抗体检测 | 第33-39页 |
第一节 呋喃妥因及其代谢产物(AHD)多克隆抗体的检测 | 第33-36页 |
·呋喃妥因和AHD多克隆抗体最佳测定浓度的选择 | 第33-34页 |
·间接酶联免疫吸附测定法测定呋喃妥因和AHD抗体效价 | 第34页 |
·竞争酶联免疫吸附测定法测定呋喃妥因和AHD抗体灵敏性 | 第34-35页 |
·呋喃妥因和AHD抗体交叉反应率(特异性)的测定 | 第35页 |
·呋喃妥因回收率的检测 | 第35页 |
·标准曲线的建立 | 第35页 |
·水体系中呋喃妥因残留量的检测 | 第35页 |
·AHD回收率的检测 | 第35-36页 |
·标准曲线的建立 | 第35-36页 |
·生物基质的影响 | 第36页 |
·NPAHD的衍生 | 第36页 |
·回收率和变异系数的测定 | 第36页 |
第二节 呋喃唑酮及其代谢产物(AOZ)多克隆抗体的检测 | 第36-39页 |
·呋喃唑酮和AOZ多克隆抗体最佳测定浓度的选择 | 第36-37页 |
·间接ELISA法测定呋喃唑酮和AOZ多克隆抗体抗体效价 | 第37-38页 |
·竞争ELISA法测定呋喃唑酮和AOZ抗体灵敏性 | 第38页 |
·呋喃唑酮和AOZ抗体交叉反应率(特异性)的测定 | 第38页 |
·呋喃唑酮回收率的检测 | 第38-39页 |
·标准曲线的建立 | 第38页 |
·水体系中呋喃唑酮残留量的检测 | 第38-39页 |
第三部分 结果与讨论 | 第39-68页 |
第一章 免疫原的合成与鉴定 | 第39-42页 |
第一节 呋喃妥因和AHD免疫原的合成与鉴定 | 第39-41页 |
·载体蛋白的选择 | 第39-40页 |
·呋喃妥因和AHD免疫原的合成与鉴定 | 第40-41页 |
第二节 呋喃唑酮和AOZ免疫原的合成与鉴定 | 第41-42页 |
第二章 抗体的制备过程 | 第42-45页 |
第一节 免疫方案 | 第42-44页 |
·免疫动物 | 第42页 |
·免疫过程 | 第42-43页 |
·佐剂的应用 | 第43-44页 |
第二节 抗血清的制备与冻存 | 第44-45页 |
·采血方法 | 第44页 |
·器械灭菌 | 第44页 |
·饱和硫酸铵纯化 | 第44-45页 |
·抗血清的冻存 | 第45页 |
第三章 抗体的检测 | 第45-68页 |
第一节 影响ELISA检测的因素 | 第45-47页 |
第二节 呋喃妥因抗体的检测结果与分析 | 第47-54页 |
·呋喃妥因抗体的效价测定 | 第47-48页 |
·呋喃妥因抗体的间接竞争ELISA的检测 | 第48-50页 |
·呋喃妥因抗体交叉反应率的测定 | 第50-52页 |
·呋喃妥因抗体回收率的测定 | 第52-54页 |
第三节 AHD抗体的检测结果与分析 | 第54-60页 |
·AHD抗体的效价测定 | 第54页 |
·AHD抗体的间接竞争ELISA的检测 | 第54-55页 |
·AHD抗体交叉反应率的测定 | 第55-57页 |
·AHD抗体回收率的测定 | 第57-60页 |
·标准曲线的建立 | 第57页 |
·NPAHD的衍生及生物基质的影响 | 第57-58页 |
·回收率和变异系数的测定 | 第58-60页 |
第四节 呋喃唑酮抗体的检测结果与分析 | 第60-64页 |
·呋喃唑酮抗体的效价测定 | 第60页 |
·呋喃唑酮抗体的间接竞争ELISA的检测 | 第60-62页 |
·呋喃唑酮抗体交叉反应率的测定 | 第62-63页 |
·呋喃唑酮抗体回收率的测定 | 第63-64页 |
第五节 AOZ抗体的检测结果与分析 | 第64-68页 |
·AOZ抗体的效价测定 | 第64-65页 |
·AOZ抗体的间接竞争ELISA的检测 | 第65-66页 |
·AOZ抗体交叉反应率的测定 | 第66-68页 |
第四章 结论 | 第68-70页 |
附图 | 第70-75页 |
参考文献 | 第75-80页 |
本人发表的文章和专利 | 第80-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第82页 |