| 摘要 | 第1-10页 |
| 1.中国明对虾C-型凝集素的重组表达和功能分析 | 第7-8页 |
| 2.融合抗菌肽表达载体构建、重组表达和性质分析 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一部分:中国明对虾C-型凝集素的重组表达和功能分析 | 第12-41页 |
| 第一章:综述 | 第12-20页 |
| 1 前言 | 第12-13页 |
| 2 C-型凝集素的糖识别结构域(carbohydrate recognition domain,CRD)的结构以及在糖识别特异性中的作用 | 第13-17页 |
| 3 凝集素的功能 | 第17-20页 |
| 第二章:材料和方法 | 第20-25页 |
| 1 试剂和设备 | 第20页 |
| 2 方法 | 第20-25页 |
| ·pET30a(+)-fc-hsl和pET30a(+)-mfc-hsl重组载体的诱导表达 | 第20-21页 |
| ·融合蛋白大规模表达及包涵体复性 | 第21页 |
| ·pET30a(+)-fc-hsl和pET30a(+)-mfc-hsl重组蛋白的纯化(Ni~(2+)-NTA affinity column) | 第21-22页 |
| ·重组pET30a(+)-fc-hsl和pET30a(+)-mfc-hsl活性检测 | 第22-25页 |
| ·重组蛋白的结合细菌及真菌活性 | 第22页 |
| ·凝集活性 | 第22-23页 |
| ·糖特异性结合实验 | 第23页 |
| ·管碟法检测Fc-hsL抗菌活性 | 第23-24页 |
| ·最小抑菌浓度的测定 | 第24-25页 |
| 第三章:结果 | 第25-32页 |
| 1 rFchsL和rmFc-hsL的重组表达 | 第25页 |
| 2 结合活性 | 第25页 |
| 3 凝集活性 | 第25-27页 |
| 4 糖特异结合能力 | 第27-29页 |
| 5 抗菌活性 | 第29-32页 |
| 第四章:讨论 | 第32-34页 |
| 参考文献 | 第34-41页 |
| 第二部分:对虾素与防御素融合抗菌肽表达载体构建、重组表达和性质分析 | 第41-57页 |
| 第一章:综述 | 第41-47页 |
| 1 抗菌肽的结构 | 第41-42页 |
| 2 抗菌肽的功能 | 第42-43页 |
| 3 对虾素和防御素 | 第43-45页 |
| 4 抗菌肽的应用前景 | 第45-47页 |
| 第二章:材料和方法 | 第47-51页 |
| 1 材料:见第一部分第二章 | 第47页 |
| 2 方法 | 第47-51页 |
| ·重叠延伸PCR | 第47-48页 |
| ·引物设计合成 | 第47页 |
| ·两步PCR扩增 | 第47-48页 |
| ·重组表达 | 第48-49页 |
| ·纯化融合蛋白的活性检测 | 第49-51页 |
| ·管碟法检测penaeidin-Defensin抗菌活性 | 第49页 |
| ·最小抑菌浓度的测定 | 第49-51页 |
| 第三章:结果 | 第51-55页 |
| 1 基因克隆 | 第51-52页 |
| 2 表达纯化 | 第52-53页 |
| 3 融合蛋白的抗菌活性 | 第53-55页 |
| 第四章:讨论 | 第55-57页 |
| 论文总结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 己发表和正在写作的论文 | 第63-64页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第64页 |
