| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-36页 |
| ·生物界分类、超嗜热古菌及Sulfolobus tokodaii Str.7简介 | 第12-15页 |
| ·生物界分类 | 第12页 |
| ·极端嗜热古菌及其主要类群 | 第12-15页 |
| ·S.tokodaii Str.7简介 | 第15页 |
| ·同源重组在细胞中的作用及研究古菌同源重组修复的意义 | 第15-18页 |
| ·同源重组的过程及其在细胞中的重要作用 | 第15-18页 |
| ·研究古菌同源重组修复的意义 | 第18页 |
| ·同源重组中的重组酶 | 第18-23页 |
| ·重组酶RecA、Rad51和RadA | 第18-22页 |
| ·真核生物特有的重组酶-Dmc1 | 第22-23页 |
| ·单链结合蛋白及其在同源重组中的作用 | 第23-25页 |
| ·细菌及真核生物中的同源重组"辅助"蛋白 | 第25-31页 |
| ·细菌中的同源重组"辅助"蛋白 | 第25-28页 |
| ·真核生物中的同源重组"辅助"蛋白 | 第28-31页 |
| ·广古菌中RadA的同源蛋白-RadB | 第31-32页 |
| ·古菌特有的Holliday junction切割蛋白Hjc | 第32页 |
| ·本试验的立题依据 | 第32-36页 |
| 第二章 Sulfolobus tokodaii RadA及RadA同源物基因的UV诱导性分析 | 第36-44页 |
| 引言 | 第36页 |
| ·实验材料、试剂及实验仪器 | 第36-37页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·试剂 | 第37页 |
| ·实验仪器 | 第37页 |
| ·实验方法和步骤 | 第37-39页 |
| ·S.tokodaii Str.7紫外线(UV)抗性分析 | 第37页 |
| ·RT-PCR分析基因转录的紫外线(UV)诱导性 | 第37-39页 |
| ·结果和讨论 | 第39-42页 |
| ·S.tokodaii Str.7紫外线(UV)抗性分析 | 第39页 |
| ·RT-PCR分析经UV照射后基因转录情况 | 第39-42页 |
| ·小结 | 第42-44页 |
| 第三章 Sulfolobus tokodaii RadA、RadA同源蛋白和SSB的表达、纯化及寡聚体性质分析 | 第44-52页 |
| 引言 | 第44页 |
| ·实验材料、试剂和实验仪器 | 第44-45页 |
| ·实验材料 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44-45页 |
| ·实验仪器 | 第45页 |
| ·实验方法和步骤 | 第45-47页 |
| ·蛋白的表达 | 第45页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第45-46页 |
| ·分子筛层析分析蛋白的寡聚体性质 | 第46-47页 |
| ·结果和讨论 | 第47-51页 |
| ·蛋白的表达、纯化 | 第47-48页 |
| ·蛋白的寡聚体性质分析 | 第48-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第四章 stRad55A的生化性质鉴定 | 第52-66页 |
| 引言 | 第52页 |
| ·实验材料、试剂和仪器 | 第52-53页 |
| ·实验材料 | 第52页 |
| ·试剂 | 第52页 |
| ·实验仪器 | 第52-53页 |
| ·实验方法和步骤 | 第53-56页 |
| ·Western blotting分析rad55A基因表达的诱导性 | 第53-54页 |
| ·DNA结合实验 | 第54-55页 |
| ·ATPase活性检测 | 第55页 |
| ·链交换实验 | 第55-56页 |
| ·蛋白对固定在Sepharose 4B的ssDNA的结合实验 | 第56页 |
| ·Pull down实验检测蛋白间相互作用 | 第56页 |
| ·结果和讨论 | 第56-65页 |
| ·Western blotting分析rad55A基因表达的诱导性 | 第56-57页 |
| ·stRad55A的DNA结合活性 | 第57-58页 |
| ·stRad55A的ATPase活性 | 第58-59页 |
| ·stRad55A对RadA链交换活性的影响 | 第59-61页 |
| ·stRad55A可以帮助RadA结合在SSB饱和的ssDNA | 第61-64页 |
| ·stRad55A与RadA、SSB都具有相互作用 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 第五章 stRad55B的生化性质鉴定 | 第66-72页 |
| 引言 | 第66页 |
| ·实验材料、试剂和仪器 | 第66页 |
| ·实验方法和步骤 | 第66-67页 |
| ·stRad55B与RadA共表达菌株的构建 | 第66页 |
| ·stRad55B的表达纯化 | 第66-67页 |
| ·纯化的stRad55B的热稳定性检测 | 第67页 |
| ·DNA结合活性检测 | 第67页 |
| ·ATPase活性检测 | 第67页 |
| ·链交换实验 | 第67页 |
| ·结果和讨论 | 第67-71页 |
| ·stRad55B的表达纯化 | 第68页 |
| ·stRad55B的热稳定性 | 第68-69页 |
| ·stRad55B的DNA结合活性 | 第69-70页 |
| ·stRad55B的ATPase活性 | 第70-71页 |
| ·stRad55B对RadA链交换活性的影响 | 第71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 第六章 stRad55C的生化性质鉴定 | 第72-82页 |
| 引言 | 第72页 |
| ·实验材料、试剂和仪器 | 第72页 |
| ·实验方法和步骤 | 第72-74页 |
| ·Pull down实验检测蛋白的相互作用 | 第72-73页 |
| ·DNA结合活性检测 | 第73页 |
| ·ATPase活性检测 | 第73页 |
| ·链交换实验 | 第73页 |
| ·Holliday junction切割实验 | 第73-74页 |
| ·结果和讨论 | 第74-80页 |
| ·stRad55C与RadA、Hic具有相互作用 | 第74-76页 |
| ·stRad55C的DNA结合活性 | 第76-77页 |
| ·stRad55C的ATPase活性 | 第77-78页 |
| ·stRad55C抑制RadA的链结合活性 | 第78-79页 |
| ·stRad55C促进Hjc切割Holliday junction的活性 | 第79-80页 |
| ·小结 | 第80-82页 |
| 第七章 总结与展望 | 第82-88页 |
| 附录1 本文所使用的主要实验仪器及试剂 | 第88-89页 |
| 附录2 本文构建重组质粒所使用的引物 | 第89-92页 |
| 参考文献 | 第92-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第111-112页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第112页 |
