| 目录 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 符号说明及缩写词 | 第14-16页 |
| 第一部分 纤维堆囊菌So9733-1木聚糖酶XynB结构域功能研究 | 第16-67页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-26页 |
| ·粘细菌简介 | 第17-19页 |
| ·粘细菌的特点与分类: | 第17-18页 |
| ·纤维堆囊菌的特点 | 第18-19页 |
| ·木聚糖酶研究进展 | 第19-25页 |
| ·木聚糖的结构 | 第20页 |
| ·木聚糖水解酶 | 第20-21页 |
| ·木聚糖酶的理化特点 | 第21页 |
| ·木聚糖酶的分类 | 第21-22页 |
| ·木聚糖酶的结构域 | 第22-23页 |
| ·木聚糖酶基因的克隆和异源表达研究进展 | 第23-24页 |
| ·木聚糖酶的应用 | 第24-25页 |
| ·本实验研究思路 | 第25-26页 |
| 第二章 So9733-1木聚糖酶XynB及其N端、C端结构域的异源表达与纯化 | 第26-58页 |
| ·实验材料 | 第26-28页 |
| ·菌株及质粒 | 第26-27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-41页 |
| ·木聚糖酶XynB序列分析 | 第28页 |
| ·异源表达质粒的构建 | 第28-37页 |
| ·目的蛋白的诱导表达及表达状态检测 | 第37-38页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第38-41页 |
| ·实验结果与讨论 | 第41-56页 |
| ·木聚糖酶XynB序列分析 | 第41-42页 |
| ·表达质粒的构建 | 第42-45页 |
| ·目的蛋白的表达状态检测 | 第45-48页 |
| ·15b-C、15b-XynB的纯化与复性 | 第48-50页 |
| ·GST-N的纯化 | 第50-54页 |
| ·GST-C的纯化 | 第54-55页 |
| ·GST-XynB的纯化 | 第55-56页 |
| ·本章小结 | 第56-58页 |
| 第三章 So9733-1木聚糖酶N端结构域功能研究 | 第58-65页 |
| ·实验材料 | 第58页 |
| ·菌株及质粒 | 第58页 |
| ·培养基 | 第58页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58-60页 |
| ·酶反应动力常数Km值测定 | 第58-59页 |
| ·木聚糖酶最适pH值的测定 | 第59页 |
| ·温度对木聚糖酶水解反应的影响 | 第59-60页 |
| ·15b-C和15b-XynB异源表达菌株的细胞膜的提取 | 第60页 |
| ·实验结果 | 第60-63页 |
| ·木聚糖酶XynB与其C端结构域的酶活力比较 | 第60-61页 |
| ·木聚糖酶XynB与其C端结构域的Km值测定 | 第61-62页 |
| ·温度pH值对木聚糖酶XynB和其C端结构域酶活性的影响 | 第62页 |
| ·15b-C和15b-XynB在其异源表达菌株中与细胞膜的结合能力 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63-65页 |
| 总结与展望 | 第65-67页 |
| 第二部分 四种人源肝脏蛋白的异源表达、纯化和结晶 | 第67-84页 |
| 第一章 文献综述 | 第68-73页 |
| ·结构基因组研究 | 第68-69页 |
| ·蛋白质晶体学研究 | 第69-73页 |
| ·蛋白质晶体制备的基本过程 | 第69-73页 |
| 第二章 四种人源肝脏中蛋白的异源表达、纯化和结晶 | 第73-84页 |
| ·实验材料 | 第73-74页 |
| ·菌株及质粒 | 第73页 |
| ·培养基 | 第73页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第73-74页 |
| ·实验方法 | 第74-78页 |
| ·异源表达质粒的构建 | 第74-77页 |
| ·目的蛋白的诱导表达与纯化 | 第77-78页 |
| ·结晶条件的搜索 | 第78页 |
| ·实验结果 | 第78-83页 |
| ·GA3的纯化与结晶条件筛选 | 第78-80页 |
| ·GA8的纯化与结晶条件筛选 | 第80-81页 |
| ·GA17的纯化与结晶条件筛选 | 第81-82页 |
| ·GA19的纯化与结晶条件筛选 | 第82-83页 |
| ·本章小结 | 第83-84页 |
| 附录 | 第84-89页 |
| 参考文献 | 第89-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第98页 |
