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APP外膜脂蛋白基因克隆、原核表达及免疫原性初步研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 文献综述第9-24页
   ·猪传染性胸膜肺炎的传播途径第9页
   ·传染性胸膜肺炎的危害第9-10页
   ·猪传染性胸膜肺炎病原学第10-16页
     ·胸膜肺炎放线杆菌分类、理化性质及生长特性第10-11页
     ·胸膜肺炎放线杆菌抗原与血清型第11-12页
     ·胸膜肺炎放线杆菌主要毒力因子致病性及免疫原性研究进展第12-16页
     ·猪传染性胸膜肺炎放线杆菌致病机理第16页
   ·猪传染性胸膜肺炎临床症状第16页
   ·猪传染性胸膜肺炎病理学特征第16-17页
   ·猪传染性胸膜肺炎的诊断方法研究进展第17-20页
     ·病原学诊断方法第17-18页
     ·血清学诊断方法第18-20页
   ·APP疫苗研究第20-22页
     ·灭活苗第20页
     ·亚单位疫苗第20-21页
     ·弱毒活疫第21页
     ·噬菌体疫苗第21-22页
     ·口服疫苗第22页
   ·猪传染性胸膜肺炎防治第22-23页
   ·研究外膜脂蛋白的意义第23-24页
第二章 APP外膜脂蛋白的克隆和序列分析第24-37页
   ·材料第24-27页
     ·菌种和质粒第24页
     ·酶和试剂盒第24页
     ·主要培养基第24-25页
     ·主要药品与试剂第25页
     ·溶液的配制第25-26页
     ·主要仪器设备第26-27页
   ·方法第27-32页
     ·APP细菌DNA的提取第27页
     ·PCR扩增OMLA基因第27-28页
     ·APP OMLA基因克隆与测序第28-31页
     ·APP OMLA基因生物信息学分析第31-32页
   ·结果第32-36页
     ·OMLA基因PCR产物第32页
     ·pMD18-T-OMLA重组质粒的PCR鉴定第32-33页
     ·pMD18-T-OMLA重组质粒的酶切鉴定第33页
     ·pMD18-T-OMLA重组质粒的序列测定第33-34页
     ·APP SC-A株OMLA基因生物信息学分析第34-36页
   ·讨论第36页
   ·小结第36-37页
第三章 OMLA成熟蛋白的原核表达及免疫原性研究第37-58页
   ·材料第37-41页
     ·菌株和载体第37页
     ·试剂第37-38页
     ·溶液配制第38-41页
     ·实验动物第41页
   ·方法第41-47页
     ·OMLA成熟蛋白的表达和纯化第41-45页
       ·OMLA成熟蛋白基因扩增与克隆载体的构建第41-42页
       ·OMLA成熟蛋白基因重组表达质粒的构建第42页
       ·OMLA成熟蛋白基因重组表达质粒的诱导表达第42-43页
       ·OMLA成熟蛋白原核表达条件的优化第43-44页
       ·OMLA重组成熟蛋白的Western-blot鉴定第44-45页
     ·OMLA重组蛋白免疫原性研究第45-47页
   ·结果第47-54页
     ·OMLA成熟蛋白基因扩增及克隆、表达载体的构建第47-49页
     ·OMLA重组成熟蛋白的诱导表达和可溶性检测第49-50页
     ·OMLA重组成熟蛋白的表达条件的优化第50-52页
     ·OMLA重组成熟蛋白Western-blot鉴定第52页
     ·OMLA重组蛋白的纯化第52-53页
     ·APP1型菌的半数致死量(LD_(50))的确定第53页
     ·OMLA表达蛋白的最适包被浓度和待检测血清稀释度的确定第53页
     ·抗体检测第53-54页
     ·攻毒结果第54页
   ·讨论第54-57页
     ·关于OMLA第54-55页
     ·关于原核表达系统第55页
     ·关于信号肽第55-56页
     ·关于非变性电泳纯化蛋白质第56页
     ·关于包涵体第56-57页
     ·抗原,抗体最适浓度的测定第57页
   ·小结第57-58页
结论第58-59页
参考文献第59-65页
致谢第65-66页
附录第66-67页
攻读硕士学位期间发表的论文第67页

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