中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-24页 |
·猪传染性胸膜肺炎的传播途径 | 第9页 |
·传染性胸膜肺炎的危害 | 第9-10页 |
·猪传染性胸膜肺炎病原学 | 第10-16页 |
·胸膜肺炎放线杆菌分类、理化性质及生长特性 | 第10-11页 |
·胸膜肺炎放线杆菌抗原与血清型 | 第11-12页 |
·胸膜肺炎放线杆菌主要毒力因子致病性及免疫原性研究进展 | 第12-16页 |
·猪传染性胸膜肺炎放线杆菌致病机理 | 第16页 |
·猪传染性胸膜肺炎临床症状 | 第16页 |
·猪传染性胸膜肺炎病理学特征 | 第16-17页 |
·猪传染性胸膜肺炎的诊断方法研究进展 | 第17-20页 |
·病原学诊断方法 | 第17-18页 |
·血清学诊断方法 | 第18-20页 |
·APP疫苗研究 | 第20-22页 |
·灭活苗 | 第20页 |
·亚单位疫苗 | 第20-21页 |
·弱毒活疫 | 第21页 |
·噬菌体疫苗 | 第21-22页 |
·口服疫苗 | 第22页 |
·猪传染性胸膜肺炎防治 | 第22-23页 |
·研究外膜脂蛋白的意义 | 第23-24页 |
第二章 APP外膜脂蛋白的克隆和序列分析 | 第24-37页 |
·材料 | 第24-27页 |
·菌种和质粒 | 第24页 |
·酶和试剂盒 | 第24页 |
·主要培养基 | 第24-25页 |
·主要药品与试剂 | 第25页 |
·溶液的配制 | 第25-26页 |
·主要仪器设备 | 第26-27页 |
·方法 | 第27-32页 |
·APP细菌DNA的提取 | 第27页 |
·PCR扩增OMLA基因 | 第27-28页 |
·APP OMLA基因克隆与测序 | 第28-31页 |
·APP OMLA基因生物信息学分析 | 第31-32页 |
·结果 | 第32-36页 |
·OMLA基因PCR产物 | 第32页 |
·pMD18-T-OMLA重组质粒的PCR鉴定 | 第32-33页 |
·pMD18-T-OMLA重组质粒的酶切鉴定 | 第33页 |
·pMD18-T-OMLA重组质粒的序列测定 | 第33-34页 |
·APP SC-A株OMLA基因生物信息学分析 | 第34-36页 |
·讨论 | 第36页 |
·小结 | 第36-37页 |
第三章 OMLA成熟蛋白的原核表达及免疫原性研究 | 第37-58页 |
·材料 | 第37-41页 |
·菌株和载体 | 第37页 |
·试剂 | 第37-38页 |
·溶液配制 | 第38-41页 |
·实验动物 | 第41页 |
·方法 | 第41-47页 |
·OMLA成熟蛋白的表达和纯化 | 第41-45页 |
·OMLA成熟蛋白基因扩增与克隆载体的构建 | 第41-42页 |
·OMLA成熟蛋白基因重组表达质粒的构建 | 第42页 |
·OMLA成熟蛋白基因重组表达质粒的诱导表达 | 第42-43页 |
·OMLA成熟蛋白原核表达条件的优化 | 第43-44页 |
·OMLA重组成熟蛋白的Western-blot鉴定 | 第44-45页 |
·OMLA重组蛋白免疫原性研究 | 第45-47页 |
·结果 | 第47-54页 |
·OMLA成熟蛋白基因扩增及克隆、表达载体的构建 | 第47-49页 |
·OMLA重组成熟蛋白的诱导表达和可溶性检测 | 第49-50页 |
·OMLA重组成熟蛋白的表达条件的优化 | 第50-52页 |
·OMLA重组成熟蛋白Western-blot鉴定 | 第52页 |
·OMLA重组蛋白的纯化 | 第52-53页 |
·APP1型菌的半数致死量(LD_(50))的确定 | 第53页 |
·OMLA表达蛋白的最适包被浓度和待检测血清稀释度的确定 | 第53页 |
·抗体检测 | 第53-54页 |
·攻毒结果 | 第54页 |
·讨论 | 第54-57页 |
·关于OMLA | 第54-55页 |
·关于原核表达系统 | 第55页 |
·关于信号肽 | 第55-56页 |
·关于非变性电泳纯化蛋白质 | 第56页 |
·关于包涵体 | 第56-57页 |
·抗原,抗体最适浓度的测定 | 第57页 |
·小结 | 第57-58页 |
结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
附录 | 第66-67页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第67页 |