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间接ELISA检测副猪嗜血杆菌抗体方法的建立及初步应用

中文摘要第1-7页
Abstract第7-11页
文献综述第11-29页
 1 病原学第11-13页
 2 病理学与发病机理第13-15页
 3 流行病学第15-20页
 4 致病因子第20-22页
 5 诊断方法第22-24页
 6 治疗第24-25页
 7 免疫防治第25-27页
 8 展望第27-28页
 9 本研究目的与意义第28-29页
1. 试验材料第29页
   ·试验菌株与血清第29页
   ·主要试剂第29页
   ·主要仪器第29页
2. 实验方法第29-35页
   ·Hps的培养第29-30页
     ·Hps的复苏第29页
     ·Hps的培养第29-30页
   ·三种抗原的制备与含量的测定第30-31页
     ·耐热抗原的制备与含量的测定第30页
     ·超声波破碎抗原的制备方法与含量的测定第30-31页
     ·全菌抗原的制备方法与含量的测定第31页
   ·免疫血清的制备第31页
     ·阳性血清的制备第31页
     ·阴性血清的制备第31页
   ·间接ELISA方法的建立第31-34页
     ·间接ELISA方法的操作程序第31-32页
     ·间接ELISA方法条件的优化第32-34页
   ·特异性试验第34页
   ·阻断试验第34页
   ·重复性试验第34页
     ·批内重复第34页
     ·批间重复第34页
   ·三种抗原与各型血清间的交叉反应第34-35页
   ·临床猪血清检测第35页
3. 结果第35-51页
   ·Hps的菌体形态第35-36页
   ·三种抗原的浓度测定第36-37页
     ·测定多糖含量标准曲线的制作与浓度的测定第36页
     ·超声波破碎抗原浓度的测定第36-37页
     ·全菌抗原浓度的测定第37页
   ·制备阳性血清的效价第37页
   ·间接ELISA最佳反应条件第37-45页
     ·抗原最适包被浓度和血清最佳稀释倍数的确定第37-39页
     ·抗原最适包被时间的选择第39页
     ·封闭液及封闭时间的确定第39-41页
     ·PBST稀释液中蛋白稳定剂的确定第41页
     ·阴性、阳性血清最适反应时间的选择第41-42页
     ·酶标二抗工作浓度和反应时间的确定第42-44页
     ·底物反应时间的确定第44-45页
     ·间接ELISA方法阴阳性临界值的确定第45页
   ·间接EUSA特异性试验第45-46页
   ·间接ELISA阻断试验第46-48页
   ·间接ELISA重复性试验第48-49页
   ·三种抗原与各型血清间的交叉反应第49-50页
   ·临床检测和间接血凝对照试验第50-51页
4. 讨论第51-56页
   ·阳性血清的制备第51页
   ·抗原的选择第51-52页
   ·间接ELISA条件的优化第52-54页
     ·抗原包被浓度和时间第52-53页
     ·封闭条件的选择第53页
     ·血清反应浓度及时间与温度第53-54页
     ·间接ELISA PBST稀释液中蛋白稳定剂的优化第54页
     ·其他条件的优化第54页
   ·Hps耐热抗原与异型血清之间的交叉反应第54-55页
   ·临床检测第55-56页
5 结论第56-57页
参考文献第57-62页
致谢第62-63页
附录:实验试剂的配置第63页

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