中文摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
文献综述 | 第11-29页 |
1 病原学 | 第11-13页 |
2 病理学与发病机理 | 第13-15页 |
3 流行病学 | 第15-20页 |
4 致病因子 | 第20-22页 |
5 诊断方法 | 第22-24页 |
6 治疗 | 第24-25页 |
7 免疫防治 | 第25-27页 |
8 展望 | 第27-28页 |
9 本研究目的与意义 | 第28-29页 |
1. 试验材料 | 第29页 |
·试验菌株与血清 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29页 |
·主要仪器 | 第29页 |
2. 实验方法 | 第29-35页 |
·Hps的培养 | 第29-30页 |
·Hps的复苏 | 第29页 |
·Hps的培养 | 第29-30页 |
·三种抗原的制备与含量的测定 | 第30-31页 |
·耐热抗原的制备与含量的测定 | 第30页 |
·超声波破碎抗原的制备方法与含量的测定 | 第30-31页 |
·全菌抗原的制备方法与含量的测定 | 第31页 |
·免疫血清的制备 | 第31页 |
·阳性血清的制备 | 第31页 |
·阴性血清的制备 | 第31页 |
·间接ELISA方法的建立 | 第31-34页 |
·间接ELISA方法的操作程序 | 第31-32页 |
·间接ELISA方法条件的优化 | 第32-34页 |
·特异性试验 | 第34页 |
·阻断试验 | 第34页 |
·重复性试验 | 第34页 |
·批内重复 | 第34页 |
·批间重复 | 第34页 |
·三种抗原与各型血清间的交叉反应 | 第34-35页 |
·临床猪血清检测 | 第35页 |
3. 结果 | 第35-51页 |
·Hps的菌体形态 | 第35-36页 |
·三种抗原的浓度测定 | 第36-37页 |
·测定多糖含量标准曲线的制作与浓度的测定 | 第36页 |
·超声波破碎抗原浓度的测定 | 第36-37页 |
·全菌抗原浓度的测定 | 第37页 |
·制备阳性血清的效价 | 第37页 |
·间接ELISA最佳反应条件 | 第37-45页 |
·抗原最适包被浓度和血清最佳稀释倍数的确定 | 第37-39页 |
·抗原最适包被时间的选择 | 第39页 |
·封闭液及封闭时间的确定 | 第39-41页 |
·PBST稀释液中蛋白稳定剂的确定 | 第41页 |
·阴性、阳性血清最适反应时间的选择 | 第41-42页 |
·酶标二抗工作浓度和反应时间的确定 | 第42-44页 |
·底物反应时间的确定 | 第44-45页 |
·间接ELISA方法阴阳性临界值的确定 | 第45页 |
·间接EUSA特异性试验 | 第45-46页 |
·间接ELISA阻断试验 | 第46-48页 |
·间接ELISA重复性试验 | 第48-49页 |
·三种抗原与各型血清间的交叉反应 | 第49-50页 |
·临床检测和间接血凝对照试验 | 第50-51页 |
4. 讨论 | 第51-56页 |
·阳性血清的制备 | 第51页 |
·抗原的选择 | 第51-52页 |
·间接ELISA条件的优化 | 第52-54页 |
·抗原包被浓度和时间 | 第52-53页 |
·封闭条件的选择 | 第53页 |
·血清反应浓度及时间与温度 | 第53-54页 |
·间接ELISA PBST稀释液中蛋白稳定剂的优化 | 第54页 |
·其他条件的优化 | 第54页 |
·Hps耐热抗原与异型血清之间的交叉反应 | 第54-55页 |
·临床检测 | 第55-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
附录:实验试剂的配置 | 第63页 |