| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-15页 |
| ·RNAi 简介 | 第9-12页 |
| ·RNAi 的发现 | 第9页 |
| ·RNAi 的作用原理 | 第9页 |
| ·RNAi 的作用机制 | 第9-10页 |
| ·RNAi 的分子生物学特性 | 第10-11页 |
| ·RNAi 的应用 | 第11页 |
| ·RNAi 存在的问题及展望 | 第11-12页 |
| ·Argonaute 蛋白 | 第12-15页 |
| ·Argonaute 亚族蛋白与RNAi 密切相关 | 第12-13页 |
| ·Argonaute 蛋白对干细胞和细胞周期的影响 | 第13页 |
| ·Argonaute 蛋白与人类疾病 | 第13页 |
| ·Argonaute 蛋白存在的问题及展望 | 第13-15页 |
| 2 引言 | 第15页 |
| 3 实验材料与方法 | 第15-30页 |
| ·细胞培养 | 第15-17页 |
| ·细胞培养的基本条件 | 第15-16页 |
| ·细胞传代培养 | 第16页 |
| ·细胞的冻存和复苏 | 第16-17页 |
| ·质粒合成和大量制备 | 第17-18页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-18页 |
| ·质粒 c-flag-ago3 和 si-ago3 的转染 | 第18-19页 |
| ·实验材料 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19页 |
| ·RT-PCR 的检测 | 第19-22页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-22页 |
| ·Western Blotting | 第22-26页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-26页 |
| ·MTT 法 | 第26-27页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-27页 |
| ·流式细胞仪（FCM）测细胞周期 | 第27页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27页 |
| ·PCR 扩增，琼脂糖凝胶电泳检测cyclinD1、p16Ink4a 含量 | 第27-28页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-28页 |
| ·免疫荧光技术 | 第28-30页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-30页 |
| 4 结果与分析 | 第30-40页 |
| ·质粒c-flag-ago3 和si-ago3 在HEK293 中成功转染 | 第30-33页 |
| ·外源 Ago3 成功表达 | 第33页 |
| ·外源Ago3 成功表达 | 第33页 |
| ·Ago3 蛋白下调抑制HEK293 细胞正常生长 | 第33-34页 |
| ·数据分析 | 第34页 |
| ·Ago3 蛋白调控细胞G1/S 期进程 | 第34-36页 |
| ·数据分析 | 第35-36页 |
| ·RT-PCR 检测 cyclin D1、p16INK4a 基因在转入 si-ago3 和 c-flag-ago3 质粒 48h 后的 293 细胞中的变化 | 第36-38页 |
| ·Ago3 蛋白细胞定位 | 第38-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-49页 |
| 附录 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 个人简介 | 第53页 |
