摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
文献综述 | 第8-13页 |
1 UROD 的分布 | 第8页 |
2 酶学性质 | 第8-9页 |
3 分子遗传 | 第9页 |
4 重组表达 | 第9页 |
5 空间结构 | 第9-10页 |
6 催化机理 | 第10页 |
7 调节机制 | 第10-11页 |
8 突变体 | 第11页 |
9 尿卟啉原化合物的生物合成途径 | 第11-12页 |
10 应用 | 第12-13页 |
引言 | 第13-14页 |
本实验研究目的与意义 | 第13页 |
本实验研究内容 | 第13-14页 |
材料和方法 | 第14-26页 |
1 材料 | 第14-17页 |
·质粒和菌株 | 第14-16页 |
·试剂 | 第16-17页 |
·仪器设备 | 第17页 |
2 方法 | 第17-26页 |
·玉米UROD 基因的PCR 扩增 | 第17-20页 |
·UROD 表达载体的构建 | 第20-21页 |
·UROD 蛋白的诱导表达与纯化 | 第21-22页 |
·HemB、Hem C 和Hem D 基因的PCR 扩增 | 第22-24页 |
·表达载体pQE80-Hem B、pET28b-Hem C 和pET28b-Hem D 的构建 | 第24-25页 |
·Hem B、Hem C 和Hem D 外源基因的诱导表达与纯化 | 第25页 |
·Hem B、Hem C 和Hem D 的联合酶促反应 | 第25-26页 |
结果与分析 | 第26-35页 |
1 玉米两种UROD 的生物信息学分析 | 第26-29页 |
2 基因扩增分析 | 第29-32页 |
3 蛋白表达 | 第32页 |
4 HemB、HemC 和 HemD 的克隆和表达质粒的构建 | 第32-34页 |
5 pQE80-HemB、pET28b –HemC、pET28b -HemD 在大肠杆菌中的表达 | 第34页 |
6 尿卟啉原III 的体外联合酶促反应 | 第34-35页 |
讨论 | 第35-37页 |
1 UROD 基因扩增的分析 | 第35页 |
2 玉米UROD 基因表达载体及表达菌株的选择及分析 | 第35页 |
3 UROD 的底物联合酶促合成 | 第35-37页 |
结论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
个人简介 | 第43页 |