| 目录 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文略语表 | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-19页 |
| 参考资料 | 第15-19页 |
| 第一部分 碳纳米管诱导A549细胞发生自噬 | 第19-27页 |
| 1 实验材料 | 第19-21页 |
| ·质粒 | 第19页 |
| ·细胞株 | 第19页 |
| ·纳米材料 | 第19页 |
| ·主要化学试剂 | 第19-20页 |
| ·细胞培养用耗材 | 第20页 |
| ·试剂盒 | 第20页 |
| ·主要仪器及设备 | 第20页 |
| ·主要溶液配方 | 第20-21页 |
| ·常用缓冲液的配制 | 第21页 |
| ·主要抗体 | 第21页 |
| 2 实验方法 | 第21-23页 |
| ·贴壁细胞培养 | 第21-22页 |
| ·细胞复苏 | 第22页 |
| ·Western Blotting的检测方法 | 第22-23页 |
| 3 实验结果 | 第23-25页 |
| ·Western blotting筛选引起自噬的纳米材料 | 第23-24页 |
| ·透射电镜技术进一步验证AMIDE-CNT和COOH-CNT可引起细胞自噬 | 第24-25页 |
| ·COOH-CNT和Amide-CNT处理细胞后,p-AKT水平下调 | 第25页 |
| 讨论 | 第25-26页 |
| 参考资料 | 第26-27页 |
| 第二部分 多壁碳纳米管诱导A549细胞发生凋亡 | 第27-32页 |
| 1 实验材料 | 第27-28页 |
| ·纳米材料 | 第27页 |
| ·试剂盒 | 第27页 |
| ·主要化学试剂 | 第27页 |
| ·主要溶液配方 | 第27-28页 |
| ·主要仪器及设备 | 第28页 |
| 2 实验方法 | 第28页 |
| ·用MTT法检测多壁碳纳米管对细胞活性的影响 | 第28页 |
| ·用流式细胞术检测细胞凋亡 | 第28页 |
| 3 实验结果 | 第28-31页 |
| ·MTT分析法检测MWCNT对细胞活性的影响 | 第28-29页 |
| ·MWCNT引起A549细胞凋亡的流式细胞术检测结果 | 第29页 |
| ·所引起的凋亡不是通过caspase-3信号通路完成 | 第29-31页 |
| ·用Caspases抑制剂Z-VAD处理细胞,进一步证明上述结论 | 第31页 |
| 讨论 | 第31-32页 |
| 第三部分 SUMO表达载体的构建 | 第32-42页 |
| 1 实验材料 | 第32-34页 |
| ·质粒 | 第32页 |
| ·菌株 | 第32页 |
| ·工具酶、酶切缓冲液及DNA Marker | 第32-33页 |
| ·主要化学试剂 | 第33页 |
| ·试剂盒 | 第33页 |
| ·主要仪器及设备 | 第33页 |
| ·主要溶液配方 | 第33-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-39页 |
| ·酶切消化 | 第34-35页 |
| ·连接 | 第35页 |
| ·转化 | 第35页 |
| ·鉴定 | 第35-36页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| ·质粒DNA的小提 | 第37页 |
| ·质粒DNA的大量提取 | 第37-38页 |
| ·重组质粒DNA浓度的测定 | 第38-39页 |
| 3 实验结果 | 第39-41页 |
| ·优化SUMO1,2的编码基因序列并合成 | 第39页 |
| ·构建SUMO的表达载体 | 第39-40页 |
| ·瞬时转染293T细胞,检测蛋白的表达 | 第40-41页 |
| ·质粒大量提取 | 第41页 |
| ·检测病毒蛋白是否被Sumol修饰 | 第41页 |
| 讨论 | 第41-42页 |
| 综述一 | 第42-56页 |
| 体外检测纳米粒子毒性的方法 | 第42-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 综述二 | 第56-67页 |
| 病毒和Sumo化的研究进展 | 第56-62页 |
| 参考资料 | 第62-67页 |
| 个人简历 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
