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表达猪瘟病毒E2蛋白的BacMam病毒的构建及其免疫原性分析

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 绪论第11-25页
   ·猪瘟及猪瘟病毒概述第11-13页
     ·猪瘟第11页
     ·猪瘟病毒及其基因组结构第11-12页
     ·猪瘟病毒结构蛋白的结构和功能第12-13页
   ·猪瘟疫苗的研究进展第13-16页
     ·常规疫苗第13-14页
     ·基因工程亚单位疫苗第14页
     ·病毒活载体疫苗第14-15页
     ·嵌合病毒疫苗第15页
     ·DNA 疫苗第15-16页
   ·昆虫杆状病毒表达系统第16-18页
     ·杆状病毒概述第16页
     ·杆状病毒表达系统概述第16页
     ·杆状病毒表达系统表达外源基因特点第16-17页
     ·Bac-to-Bac 表达系统第17-18页
   ·杆状病毒介导的哺乳动物细胞内基因转移第18-20页
     ·BacMam 病毒的定义第18-19页
     ·BacMam 病毒可转导的细胞第19页
     ·BacMam 病毒的进入及转导哺乳动物细胞的机制第19页
     ·影响BacMam 病毒对哺乳动物细胞转导效率的因素第19-20页
   ·杆状病毒介导的体内基因传递第20-21页
     ·BacMam 病毒介导体内基因转导的障碍第20-21页
     ·克服体内转导障碍的措施第21页
   ·杆状病毒表达系统的应用第21-23页
     ·在基础研究领域的应用第21页
     ·在疫苗研究领域的应用第21-22页
     ·在基因治疗领域的应用第22页
     ·作为生物杀虫剂的应用第22-23页
     ·其它领域的应用第23页
   ·本研究的背景与目的第23-25页
第二章 表达猪瘟病毒 E2 蛋白的 BacMam 病毒的构建及其免疫原性分析第25-42页
   ·材料与方法第25-31页
     ·病毒、细胞和质粒第25页
     ·主要试剂和仪器第25页
     ·PCR 扩增与基因克隆第25-26页
     ·重组转移载体的构建及鉴定第26页
     ·重组杆粒的获得及鉴定第26-27页
     ·重组杆粒的转染第27页
     ·重组杆状病毒的PCR 鉴定第27-28页
     ·重组杆状病毒的滴度测定第28页
     ·应用间接免疫荧光试验检测VSV-G 蛋白及E2 蛋白的表达第28页
     ·Western blot 检测重组杆状病毒中E2 蛋白的表达第28-29页
     ·重组杆状病毒转导哺乳动物细胞第29页
     ·小鼠免疫接种第29页
     ·免疫小鼠血清抗体水平的检测第29页
     ·免疫小鼠血清中和试验第29-30页
     ·淋巴细胞增殖试验第30-31页
   ·结果第31-38页
     ·目的片段的获得第31页
     ·重组转移载体的获得及酶切鉴定第31-32页
     ·重组杆粒的PCR 鉴定第32页
     ·重组杆状病毒的PCR 鉴定第32-33页
     ·重组杆状病毒表达VSV-G 蛋白及E2 蛋白的鉴定第33-34页
     ·BacMam 病毒在哺乳动物细胞中的基因转移第34-35页
     ·免疫小鼠的抗体产生情况第35-36页
     ·免疫小鼠诱导的CSFV 特异性中和抗体第36-37页
     ·免疫小鼠的特异性淋巴细胞增殖水平第37-38页
   ·讨论第38-42页
第三章 结论第42-43页
参考文献第43-50页
致谢第50-51页
作者简历第51页

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