| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-37页 |
| 1 海洋微生物及其应用 | 第14-18页 |
| ·海洋微生物发展历程 | 第14-16页 |
| ·海洋微生物应用 | 第16-18页 |
| 2 硫酸酯酶 | 第18-21页 |
| ·硫酸酯酶简介 | 第18-20页 |
| ·硫酸酯酶应用 | 第20-21页 |
| 3 琼脂酶和琼脂寡糖 | 第21-31页 |
| ·琼脂酶简介及应用 | 第21-26页 |
| ·琼脂寡糖简介及应用 | 第26-31页 |
| 4 海洋微生物基因组学研究 | 第31-32页 |
| ·海洋微生物基因组学与生物多样性 | 第31页 |
| ·海洋微生物基因组学与代谢 | 第31-32页 |
| 5 琼脂及其生产工艺 | 第32-36页 |
| ·琼脂来源、组成及用途 | 第32-33页 |
| ·琼脂生产工艺 | 第33-34页 |
| ·琼脂工业发展前景及存在问题 | 第34-36页 |
| 6 本论文研究目的与意义 | 第36-37页 |
| 第二章 红树林产硫酸酯酶假单胞菌Pseudomonas sp.S9的筛选及全基因组测序 | 第37-60页 |
| 1 引言 | 第37-38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-44页 |
| ·实验材料 | 第38-40页 |
| ·样品 | 第38页 |
| ·菌株 | 第38页 |
| ·质粒载体 | 第38页 |
| ·试剂盒 | 第38-39页 |
| ·PCR扩增相关引物 | 第39页 |
| ·生化试剂 | 第39页 |
| ·培养基和溶液 | 第39页 |
| ·主要实验仪器 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-44页 |
| ·产硫酸酯酶菌株分离鉴定 | 第40-43页 |
| ·Pseudomonas sp.S9菌株基因组测序 | 第43-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-58页 |
| ·产硫酸酯酶菌株分离鉴定 | 第44-46页 |
| ·菌株筛选 | 第44页 |
| ·表型特征 | 第44-45页 |
| ·生理生化特性 | 第45页 |
| ·系统发育分析 | 第45-46页 |
| ·菌株Pseudomonas sp.S9基因组测序 | 第46-58页 |
| ·基因组DNA检测 | 第46-47页 |
| ·基因组测序分析 | 第47-58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 第三章 红树林假单胞菌Pseudomonas sp.S9硫酸酯酶基因的克隆、表达及功能 | 第60-87页 |
| 1 引言 | 第60页 |
| 2 材料与方法 | 第60-71页 |
| ·实验材料 | 第60-62页 |
| ·样品 | 第60-61页 |
| ·菌株 | 第61页 |
| ·质粒载体 | 第61页 |
| ·试剂盒 | 第61页 |
| ·PCR扩增相关引物 | 第61-62页 |
| ·生化试剂 | 第62页 |
| ·培养基和溶液 | 第62页 |
| ·主要实验仪器 | 第62页 |
| ·实验方法 | 第62-71页 |
| ·芳香族硫酸酯酶基因序列分析 | 第62页 |
| ·重组表达质粒构建与目的蛋白表达纯化 | 第62-66页 |
| ·芳香族硫酸酯酶活检测 | 第66页 |
| ·重组芳香族硫酸酷酶酶学性质 | 第66页 |
| ·芳香族硫酸酯酶降解龙须菜多糖硫酸根 | 第66-67页 |
| ·烷基型硫酸酯酶基因sdsAP克隆与序列分析 | 第67-68页 |
| ·重组表达质粒构建与目的蛋白表达纯化 | 第68-69页 |
| ·烷基型硫酸酯酶酶活检测 | 第69页 |
| ·二聚体检测 | 第69-70页 |
| ·重组烷基型硫酸酯酶酶学性质 | 第70-71页 |
| 3 结果与讨论 | 第71-85页 |
| ·芳香族硫酸酯酶分析 | 第71-75页 |
| ·芳香族硫酸酯酶基因序列分析 | 第71页 |
| ·芳香族硫酸酯酶重组表达纯化及活性检测 | 第71-74页 |
| ·重组芳香族硫酸酯酶ArySX3酶学性质 | 第74-75页 |
| ·芳香族硫酸酯酶降解龙须菜硫酸根 | 第75页 |
| ·烷基型硫酸酯酶分析 | 第75-85页 |
| ·Pseudomonas sp.S9基因组部分酶切DNA检测 | 第75-76页 |
| ·Pseudomonas sp.S9菌株中烷基型硫酸酯酶sdsAP序列分析 | 第76-79页 |
| ·目的蛋白表达纯化 | 第79页 |
| ·SdsAP分子量分析 | 第79-80页 |
| ·重组烷基型硫酸酯酶性质分析 | 第80-85页 |
| 4 讨论 | 第85-87页 |
| 第四章 海洋噬琼脂菌Agarivorans sp.LQ48的分离鉴定及其琼脂酶基因的克隆、表达、功能 | 第87-109页 |
| 1 引言 | 第87页 |
| 2 材料与方法 | 第87-94页 |
| ·实验材料 | 第87-89页 |
| ·样品 | 第87页 |
| ·菌株 | 第87-88页 |
| ·质粒载体 | 第88页 |
| ·试剂盒 | 第88页 |
| ·PCR扩增相关引物 | 第88页 |
| ·生化试剂 | 第88页 |
| ·培养基和溶液 | 第88-89页 |
| ·主要实验仪器 | 第89页 |
| ·薄层层析(TLC) | 第89页 |
| ·实验方法 | 第89-94页 |
| ·产琼脂酶菌株分离鉴定 | 第89-91页 |
| ·琼脂酶基因克隆与序列分析 | 第91-92页 |
| ·重组表达质粒构建与目的蛋白表达纯化 | 第92页 |
| ·AgaA酶活检测 | 第92-93页 |
| ·重组琼脂酶AgaA酶学性质 | 第93-94页 |
| 3 结果与分析 | 第94-105页 |
| ·产琼脂酶菌株分离鉴定 | 第94-99页 |
| ·菌株筛选 | 第94页 |
| ·形态特征 | 第94页 |
| ·生理生化特性 | 第94-95页 |
| ·系统发育分析 | 第95-96页 |
| ·DNA-DNA杂交分析 | 第96页 |
| ·脂肪酸成分 | 第96-99页 |
| ·琼脂酶agaA基因克隆与序列分析 | 第99-105页 |
| ·Agarivorans sp.LQ48基因组文库阳性克隆的筛选鉴定 | 第99页 |
| ·阳性克隆pLQ1序列分析 | 第99-102页 |
| ·目的蛋白表达纯化 | 第102-103页 |
| ·重组琼脂酶性质 | 第103-105页 |
| 4 讨论 | 第105-109页 |
| 第五章 新琼脂寡糖的酶法制备及其体外抗氧化功能 | 第109-120页 |
| 1 引言 | 第109页 |
| 2 材料与方法 | 第109-112页 |
| ·实验材料 | 第109-110页 |
| ·菌株 | 第109页 |
| ·生化试剂 | 第109页 |
| ·培养基和溶液 | 第109-110页 |
| ·主要实验仪器 | 第110页 |
| ·薄层层析 | 第110页 |
| ·实验方法 | 第110-112页 |
| ·菌株发酵培养 | 第110页 |
| ·琼脂粗酶制备 | 第110页 |
| ·粗酶活力检测 | 第110页 |
| ·酶法制备新琼寡糖 | 第110-111页 |
| ·新琼寡糖体外抗氧化性功能鉴定 | 第111-112页 |
| 3 结果与分析 | 第112-118页 |
| ·制备琼脂粗酶 | 第112-113页 |
| ·酶法制备新琼寡糖 | 第113-115页 |
| ·酶解终产物检测 | 第113-114页 |
| ·制备新琼寡糖 | 第114页 |
| ·新琼寡糖纯度鉴定 | 第114-115页 |
| ·新琼寡糖NA2、NA4体外抗氧化性鉴定 | 第115-118页 |
| ·DPPH自由基的清除能力 | 第115-116页 |
| ·超氧阴离子自由基清除能力 | 第116-117页 |
| ·羟基自由基清除能力 | 第117-118页 |
| 4 讨论 | 第118-120页 |
| 总结与展望 | 第120-122页 |
| 1. 总结 | 第120-121页 |
| 2. 展望 | 第121-122页 |
| 参考文献 | 第122-140页 |
| 致谢 | 第140-141页 |
| 附录1 芳香族硫酸酯酶核苷酸序列 | 第141-149页 |
| 附录2 博士期间发表的论文 | 第149页 |
