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樱桃谷鸭CD8α胞外区多肽的原核表达、抗体制备及初步应用

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第11-12页
第一章 文献综述第12-20页
   ·CD8分子的发育与分布第12-13页
   ·CD8分子结构第13-14页
   ·CD8基因结构第14页
   ·CD8分子功能第14-18页
     ·参与T细胞活化途径第15-16页
     ·CD8~+T细胞的记忆功能第16-17页
     ·CD8~+调节性T细胞的功能第17-18页
   ·CD8抗体应用第18-20页
第二章 樱桃谷鸭CD8α胞外区多肽的原核表达、抗体制备及初步应用第20-49页
 1 试验材料第20-23页
   ·载体及菌株第20-21页
   ·试验动物第21页
   ·主要试剂、抗体和试剂盒第21页
   ·主要的仪器设备第21页
   ·主要溶液及其配制第21-23页
 2 试验方法第23-31页
   ·樱桃谷鸭和麻鸭CD8αORF序列测定及分析第23-26页
     ·樱桃谷鸭和麻鸭脾脏中总RNA的提取第23页
     ·引物设计第23页
     ·RT-PCR反应体系第23-25页
     ·RT-PCR产物的电泳检测第25页
     ·PCR产物的回收与纯化第25页
     ·PCR产物的克隆第25页
     ·大肠杆菌DH5α感受态的制备第25页
     ·质粒的制备第25-26页
     ·质粒的转化第26页
     ·序列测定第26页
     ·樱桃谷鸭CD8αORF胞外区的克隆第26页
   ·樱桃谷鸭CD8α胞外区的原核表达第26-29页
     ·DNA重组技术第26-27页
       ·原核表达载体的构建第27页
       ·大肠杆菌E. coli BL21(DE3)的诱导表达第27-28页
     ·表达蛋白的SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定第28页
     ·重组蛋白的可溶性分析第28页
     ·重组蛋白的表达提取第28-29页
   ·抗樱桃谷鸭CD8α多克隆抗体的制备第29-30页
     ·抗原的制备及纯化第29页
     ·免疫原的乳化第29页
     ·家兔的免疫第29-30页
     ·间接ELISA检测抗樱桃谷鸭CD8α血清效价第30页
   ·鸭瘟病毒感染鸭外周血液中CD8~+T淋巴细胞变化测定第30-31页
     ·感染动物,采血及血涂片的制作第30页
     ·检测方法第30-31页
 3 试验结果第31-45页
   ·樱桃谷鸭和麻鸭CD8αORF基因的测定和序列分析第31-38页
     ·樱桃谷鸭和麻鸭CD8αORF基因的RT-PCR扩增结果第31-32页
     ·樱桃谷鸭和麻鸭CD8αORF基因的克隆与鉴定第32-33页
     ·樱桃谷鸭和麻鸭CD8αORF基因的序列测定与分析第33-38页
   ·樱桃谷鸭CD8α胞外区的原核表达第38-41页
     ·重组质粒pGEX-KG-DuCD8α的构建及鉴定第38-39页
     ·重组蛋白表达产物的SDS-PAGE分析结果第39-40页
     ·重组蛋白表达产物的Western-blot鉴定结果第40-41页
     ·重组蛋白可溶性分析第41页
   ·抗樱桃谷鸭CD8α链胞外区蛋白多克隆抗体的制备及初步应用第41-45页
     ·免疫兔血清效价的测定结果第41页
     ·鸭瘟感染及外周血液中CD8~+T淋巴细胞数量的检测第41-45页
 4 讨论第45-49页
   ·麻鸭和樱桃谷鸭CD8αORF序列克隆和测定第46页
     ·RNA的提取第46页
     ·麻鸭和樱桃谷鸭CD8αORF的序列分析第46页
   ·樱桃谷鸭CD8α胞外区的原核表达第46-47页
   ·鸭瘟感染鸭外周血液中CD8~+T淋巴细胞变化第47-49页
结论第49-50页
参考文献第50-56页
研究生期间发表论文情况第56-57页
致谢第57页

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