摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
·CD8分子的发育与分布 | 第12-13页 |
·CD8分子结构 | 第13-14页 |
·CD8基因结构 | 第14页 |
·CD8分子功能 | 第14-18页 |
·参与T细胞活化途径 | 第15-16页 |
·CD8~+T细胞的记忆功能 | 第16-17页 |
·CD8~+调节性T细胞的功能 | 第17-18页 |
·CD8抗体应用 | 第18-20页 |
第二章 樱桃谷鸭CD8α胞外区多肽的原核表达、抗体制备及初步应用 | 第20-49页 |
1 试验材料 | 第20-23页 |
·载体及菌株 | 第20-21页 |
·试验动物 | 第21页 |
·主要试剂、抗体和试剂盒 | 第21页 |
·主要的仪器设备 | 第21页 |
·主要溶液及其配制 | 第21-23页 |
2 试验方法 | 第23-31页 |
·樱桃谷鸭和麻鸭CD8αORF序列测定及分析 | 第23-26页 |
·樱桃谷鸭和麻鸭脾脏中总RNA的提取 | 第23页 |
·引物设计 | 第23页 |
·RT-PCR反应体系 | 第23-25页 |
·RT-PCR产物的电泳检测 | 第25页 |
·PCR产物的回收与纯化 | 第25页 |
·PCR产物的克隆 | 第25页 |
·大肠杆菌DH5α感受态的制备 | 第25页 |
·质粒的制备 | 第25-26页 |
·质粒的转化 | 第26页 |
·序列测定 | 第26页 |
·樱桃谷鸭CD8αORF胞外区的克隆 | 第26页 |
·樱桃谷鸭CD8α胞外区的原核表达 | 第26-29页 |
·DNA重组技术 | 第26-27页 |
·原核表达载体的构建 | 第27页 |
·大肠杆菌E. coli BL21(DE3)的诱导表达 | 第27-28页 |
·表达蛋白的SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定 | 第28页 |
·重组蛋白的可溶性分析 | 第28页 |
·重组蛋白的表达提取 | 第28-29页 |
·抗樱桃谷鸭CD8α多克隆抗体的制备 | 第29-30页 |
·抗原的制备及纯化 | 第29页 |
·免疫原的乳化 | 第29页 |
·家兔的免疫 | 第29-30页 |
·间接ELISA检测抗樱桃谷鸭CD8α血清效价 | 第30页 |
·鸭瘟病毒感染鸭外周血液中CD8~+T淋巴细胞变化测定 | 第30-31页 |
·感染动物,采血及血涂片的制作 | 第30页 |
·检测方法 | 第30-31页 |
3 试验结果 | 第31-45页 |
·樱桃谷鸭和麻鸭CD8αORF基因的测定和序列分析 | 第31-38页 |
·樱桃谷鸭和麻鸭CD8αORF基因的RT-PCR扩增结果 | 第31-32页 |
·樱桃谷鸭和麻鸭CD8αORF基因的克隆与鉴定 | 第32-33页 |
·樱桃谷鸭和麻鸭CD8αORF基因的序列测定与分析 | 第33-38页 |
·樱桃谷鸭CD8α胞外区的原核表达 | 第38-41页 |
·重组质粒pGEX-KG-DuCD8α的构建及鉴定 | 第38-39页 |
·重组蛋白表达产物的SDS-PAGE分析结果 | 第39-40页 |
·重组蛋白表达产物的Western-blot鉴定结果 | 第40-41页 |
·重组蛋白可溶性分析 | 第41页 |
·抗樱桃谷鸭CD8α链胞外区蛋白多克隆抗体的制备及初步应用 | 第41-45页 |
·免疫兔血清效价的测定结果 | 第41页 |
·鸭瘟感染及外周血液中CD8~+T淋巴细胞数量的检测 | 第41-45页 |
4 讨论 | 第45-49页 |
·麻鸭和樱桃谷鸭CD8αORF序列克隆和测定 | 第46页 |
·RNA的提取 | 第46页 |
·麻鸭和樱桃谷鸭CD8αORF的序列分析 | 第46页 |
·樱桃谷鸭CD8α胞外区的原核表达 | 第46-47页 |
·鸭瘟感染鸭外周血液中CD8~+T淋巴细胞变化 | 第47-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
研究生期间发表论文情况 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |