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百岁兰曲霉(Aspergillus welwitschiae)对水稻拟禾本科根结线虫(Meloidogyne graminicola)的作用机理研究

摘要第5-6页
abstract第6-7页
第一章 引言第13-19页
    1.1 前言第13页
    1.2 拟禾本科根结线虫的生物学特性第13-14页
        1.2.1 拟禾本科根结线虫的寄主范围第13页
        1.2.2 拟禾本科根结线虫的生活史第13-14页
        1.2.3 拟禾本科根结线虫的危害特性第14页
    1.3 根结线虫的防治第14-18页
        1.3.1 农业防治第14-15页
        1.3.2 物理防治第15页
        1.3.3 化学防治第15页
        1.3.4 生物防治第15-18页
            1.3.4.1 生防真菌的主要种类第16-18页
            1.3.4.2 黑曲霉防治根结线虫的研究进展第18页
    1.4 研究目的和意义第18-19页
第二章 百岁兰曲霉生防真菌的分离鉴定及其对拟禾本科根结线虫的毒力测定第19-28页
    2.1 材料与方法第19-23页
        2.1.1 供试材料第19页
        2.1.2 拟禾本科二龄幼虫(J2)及卵悬浮液的制备第19-20页
        2.1.3 真菌AW2017孢子悬浮液的制备第20页
        2.1.4 培养基的配制第20页
        2.1.5 主要仪器和耗材第20页
        2.1.6 真菌AW2017的形态学鉴定第20页
        2.1.7 真菌AW2017的分子生物学鉴定第20-23页
            2.1.7.1 真菌AW2017的DNA提取第20-21页
            2.1.7.2 目的菌株ITS区特异性引物检测第21-22页
            2.1.7.3 ITS片段产物的回收、连接和转化第22页
            2.1.7.4 目的菌株DNA测序及系统发育分析第22-23页
        2.1.8 真菌AW2017孢子悬浮液对二龄幼虫的毒杀作用第23页
        2.1.9 真菌AW2017孢子悬浮液对卵囊孵化的影响第23页
    2.2 结果分析第23-27页
        2.2.1 真菌AW2017的形态学鉴定第23-24页
        2.2.2 真菌AW2017的分子生物学鉴定第24-26页
        2.2.3 真菌AW2017孢子悬浮液对二龄幼虫的毒杀作用第26页
        2.2.4 真菌AW2017孢子悬浮液对卵孵化的影响第26-27页
    2.3 总结与讨论第27-28页
第三章 百岁兰曲霉对水稻禾本科根结线虫的作用机制评价第28-36页
    3.1 材料与方法第28-31页
        3.1.1 供试材料第28页
        3.1.2 水稻的培育与管理第28页
        3.1.3 主要试剂和耗材第28-29页
        3.1.4 AW2017孢子悬浮液的制备第29页
        3.1.5 拟禾本科根结线虫悬浮液的制备第29页
        3.1.6 AW2017防治拟禾本科根结线虫的盆栽试验第29页
        3.1.7 AW2017对拟禾本科根结线虫发育的影响第29页
        3.1.8 AW2017对拟禾本科根结线虫诱集作用的影响第29-30页
        3.1.9 AW2017对拟禾本科根结线虫巨细胞的影响第30-31页
    3.2 数据分析与处理第31页
    3.3 结果与分析第31-34页
        3.3.1 AW2017抑制拟禾本科根结线虫的发育第31-32页
        3.3.2 AW2017减少水稻对拟禾本科根结线虫的诱集第32-33页
        3.3.3 AW2017延缓拟禾本科根结线虫巨细胞的发育第33-34页
    3.4 小结与结论第34-36页
第四章 百岁兰曲霉次生代谢产物500L液体发酵的培养工艺优化第36-41页
    4.1 材料与方法第36-38页
        4.1.1 供试材料与试剂第36页
        4.1.2 拟禾本科根结线虫悬浮液的制备第36页
        4.1.3 主要仪器第36页
        4.1.4 接种与培养第36-37页
        4.1.5 发酵过程的设计与取样第37页
        4.1.6 发酵滤液初步浓缩和干燥第37-38页
        4.1.7 500L液体深层发酵的扩大培养第38页
    4.2 结果与分析第38-40页
        4.2.1 摇瓶液体发酵到50L液体深层发酵的扩大培养第38页
        4.2.2 不同培养时间对百岁兰曲霉杀线活性的影响第38-39页
        4.2.3 从50L液体深层发酵到500L液体深层发酵的扩大培养第39-40页
    4.3 小结与结论第40-41页
第五章 百岁兰曲霉代谢产物对水稻防御相关基因表达的影响第41-54页
    5.1 材料与方法第41-44页
        5.1.1 供试材料第41页
        5.1.2 主要仪器与试剂第41页
        5.1.3 水稻的培育与管理第41页
        5.1.4 AW2017孢子悬浮液的制备第41-42页
        5.1.5 拟禾本科根结线虫悬浮液的制备第42页
        5.1.6 水稻根中总RNA的提取第42页
        5.1.7 cDNA第一链的合成第42-43页
        5.1.8 防御相关基因实时荧光定量(qRT-PCR)分析第43-44页
    5.2 结果与分析第44-51页
        5.2.1 鉴定水稻根系总RNA提取的纯度与完整性第44-45页
        5.2.2 实时荧光定量PCR的可靠性分析第45页
        5.2.3 18个相关防御基因的相对表达量分析第45-51页
            5.2.3.1 真菌AW2017发酵液对水稻根系内乙烯信号途径的影响第45-47页
            5.2.3.2 真菌AW2017发酵液对水稻根系内油菜素内酯途径的影响第47页
            5.2.3.3 真菌AW2017发酵液对水稻中苯丙烷代谢的途径影响第47-48页
            5.2.3.4 真菌AW2017发酵液对水稻根系内水杨酸途径的影响第48-49页
            5.2.3.5 真菌AW2017发酵液对水稻根系内茉莉酸途径的影响第49-50页
            5.2.3.6 真菌AW2017发酵液对水稻根系内相关防御物质合成基因途径的影响第50-51页
    5.3 小结与结论第51-54页
第六章 全文结论第54-55页
参考文献第55-63页
附录第63-65页
致谢第65-67页
作者简历第67页

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