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三疣梭子蟹补体样分子结构及免疫功能研究

摘要第4-7页
abstract第7-10页
第1章 绪论第18-36页
    第1节 甲壳动物的免疫防御系统第18-22页
        1 先天免疫第18页
        2 甲壳动物的免疫防御系统第18-22页
            2.1 细胞免疫第18-19页
            2.2 体液免疫第19-20页
            2.3 物理防御第20页
            2.4 免疫识别第20-21页
            2.5 免疫信号的调整和放大第21-22页
            2.6 病原体的清除第22页
    第2节 补体系统第22-32页
        1 脊椎动物的补体系统第22-26页
            1.1 脊椎动物补体系统的组成第23-24页
            1.2 脊椎动物补体系统的激活途径第24-26页
                1.2.1 经典途径第24页
                1.2.2 凝集素途径第24-25页
                1.2.3 替代途径第25页
                1.2.4 终末途径第25页
                1.2.5 不依赖于C3 的凝血酶途径第25-26页
            1.3 补体系统的免疫功能第26页
        2 无脊椎动物的补体系统第26-32页
            2.1 无脊椎动物补体相关分子的发掘第27-32页
                2.1.1 起始分子第27-29页
                2.1.2 核心分子第29-30页
                2.1.3 补体相关含丝氨酸蛋白酶结构域分子第30-31页
                2.1.4 终末成分第31-32页
    第3节 补体分子母源传递研究第32-34页
        1 脊椎动物中补体分子母源传递的研究第32-33页
        2 无脊椎动物中补体分子母源传递的研究第33-34页
    第4节 蟹类补体途径研究目的与意义第34-36页
第2章 三疣梭子蟹gC1qR分子特性与免疫功能研究第36-60页
    1 前言第36-37页
    2 材料和方法第37-48页
        2.1 材料第37-38页
            2.1.1 实验动物和菌株第37-38页
            2.1.2 主要生物试剂和仪器设备第38页
        2.2 实验方法第38-48页
            2.2.1三疣梭子蟹组织分布和免疫刺激实验第38-39页
            2.2.2 RNA提取和c DNA合成第39-41页
            2.2.3 PtgC1qR基因c DNA全长克隆第41-43页
            2.2.4 序列分析和系统进化树构建第43页
            2.2.5 PtgC1qR基因实时荧光定量PCR分析第43-44页
            2.2.6 PtgC1qR重组蛋白的诱导表达、纯化和复性第44-45页
            2.2.7 rPtgC1qR的抗菌活性分析第45页
            2.2.8 rPtgC1qR的微生物结合活性第45-46页
            2.2.9 酚氧化酶抑制活性分析第46页
            2.2.10 siRNA合成RNAi分析第46-47页
            2.2.11 沉默PtgC1qR后免疫相关基因的表达模式第47-48页
            2.2.12 统计分析第48页
    3 结果第48-57页
        3.1 PtgC1qR序列分析第48-49页
        3.2 序列相似性和系统进化分析第49-51页
        3.3 PtgC1qR在成体组织和胚胎中的表达模式第51-52页
        3.4 病原微生物刺激后PtgC1qR的表达模式第52-53页
        3.5 重组蛋白rPtgC1qR的诱导表达和分离纯化第53-54页
        3.6 rPtgC1qR的抗菌活性第54页
        3.7 rPtgC1qR的微生物结合活力第54-55页
        3.8 rPtgC1qR对酚氧化酶的抑制活性第55-56页
        3.9 沉默PtgC1qR基因后免疫相关基因的表达模式第56-57页
    4 讨论第57-60页
第3章 三疣梭子蟹2种A2M基因克隆、表达与免疫功能研究第60-84页
    1 前言第60-61页
    2 材料和方法第61-66页
        2.1 实验动物和免疫刺激实验第61页
        2.2 RNA提取、cDNA合成和PtA2Ms基因全长克隆第61-62页
        2.3 多序列比对与系统进化分析第62页
        2.4 qRT-PCR检测基因的表达第62页
        2.5 siRNA合成与RNAi分析第62-63页
        2.6 沉默PtA2Ms基因后免疫相关基因的表达模式第63-65页
        2.7 沉默PtA2Ms基因后三疣梭子蟹血淋巴中酚氧化酶活力第65页
        2.8 沉默PtA2Ms基因后三疣梭子蟹血淋巴中溶菌酶活力第65-66页
        2.9 统计分析第66页
    3 结果第66-81页
        3.1 PtA2Ms结构特点和系统进化分析第66-74页
        3.2 PtA2Ms在成体组织和胚胎中的表达模式第74-75页
        3.3 PtA2Ms在微生物刺激后的表达模式第75-76页
        3.4 沉默PtA2Ms基因后免疫相关基因的表达分析第76-78页
        3.5 沉默PtA2Ms基因后抗菌肽和免疫通路关键基因的表达模式第78-80页
        3.6 沉默PtA2Ms基因对三疣梭子蟹血淋巴PO和溶菌酶活力的影响第80-81页
    4 讨论第81-84页
第4章 三疣梭子蟹TEP基因克隆、表达与免疫功能研究第84-104页
    1 前言第84-85页
    2 材料和方法第85-89页
        2.1 实验动物和免疫刺激实验第85页
        2.2 RNA提取、cDNA合成和PtTEP基因全长克隆第85页
        2.3 多序列比对与系统进化分析第85页
        2.4 qRT-PCR检测基因的表达第85-86页
        2.5 siRNA合成与RNAi分析第86页
        2.6 沉默PtTEP基因后免疫相关基因的表达模式第86-88页
        2.7 沉默PtTEP基因后三疣梭子蟹血淋巴中的酚氧化酶活力第88页
        2.8 沉默PtTEP基因后三疣梭子蟹血淋巴中的溶菌酶活力第88页
        2.9 沉默PtTEP基因后三疣梭子蟹存活率分析第88-89页
        2.10 统计分析第89页
    3 结果第89-101页
        3.1 PtTEP序列分析第89-92页
        3.2 多序列比对和系统进化分析第92-96页
        3.3 PtTEP基因在成体组织和胚胎中的表达分析第96-97页
        3.4 PtTEP在微生物刺激后的表达分析第97-98页
        3.5 沉默PtTEP基因后免疫相关基因的表达分析第98-99页
        3.6 沉默PtTEP基因后抗菌肽和免疫通路的关键基因的表达分析第99-100页
        3.7 沉默PtTEP基因对三疣梭子蟹血淋巴PO和溶菌酶活力的影响第100-101页
        3.8 PtTEP对溶藻弧菌的抗感染作用第101页
    4 讨论第101-104页
第5章 三疣梭子蟹MBL分子特性与免疫功能研究第104-116页
    1 前言第104-105页
    2 材料和方法第105-108页
        2.1 实验动物和免疫刺激实验第105页
        2.2 RNA提取、cDNA合成和PtMBL基因全长克隆第105-106页
        2.3 多序列比对与系统进化分析第106页
        2.4 qRT-PCR检测基因的表达第106页
        2.5 siRNA合成与RNAi分析第106页
        2.6 沉默PtMBL基因后免疫相关基因的表达模式第106-107页
        2.7 沉默PtMBL基因后三疣梭子蟹血淋巴中的酚氧化酶活力第107-108页
        2.8 统计分析第108页
    3 结果第108-114页
        3.1 PtMBL序列分析第108-109页
        3.2 多序列比对和系统进化分析第109-110页
        3.3 PtMBL基因在成体组织和胚胎中的表达分析第110-111页
        3.4 PtMBL基因在微生物刺激后的表达分析第111页
        3.5 沉默PtMBL基因后免疫相关基因的表达分析第111-112页
        3.6 沉默PtMBL基因后抗菌肽和免疫通路的关键基因的表达分析第112-113页
        3.7 沉默PtMBL基因对三疣梭子蟹血淋巴PO活力的影响第113-114页
    4 讨论第114-116页
第6章 结论与创新点总结第116-118页
参考文献第118-138页
致谢第138-140页
作者简历及攻读博士期间发表的学术论文与研究成果第140页

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