摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
符号说明 | 第13-15页 |
第一部分 综述:无脊椎动物的先天免疫 | 第15-41页 |
第一章 无脊椎动物的先天免疫 | 第15-29页 |
一、细胞免疫 | 第16-19页 |
1. 血细胞的分类 | 第16-18页 |
2. 吞噬作用 | 第18页 |
3. 调理作用 | 第18-19页 |
4. 包被作用与结节形成 | 第19页 |
二、体液免疫 | 第19-23页 |
1. 凝结 | 第19-20页 |
2. 酚氧化酶原系统与黑化反应 | 第20-22页 |
3. 抗菌肽 | 第22-23页 |
三、无脊椎先天免疫反应的主要信号途径 | 第23-29页 |
1. Toll途径 | 第23-25页 |
2. Imd途径 | 第25-26页 |
3. JAK/STAT途径 | 第26-29页 |
第二章 无脊椎动物抗菌肽的研究 | 第29-39页 |
一、抗菌肽的结构特点 | 第29页 |
二、抗菌肽的作用方式 | 第29-31页 |
三、抗菌肽的合成部位与表达分布 | 第31-32页 |
四、抗菌肽的分类 | 第32-35页 |
1. 具有两亲结构的线性α-螺旋抗菌肽 | 第32-33页 |
2. 由一个或是多个二硫键形成的环状多肽 | 第33-34页 |
3. 富含某一种或两种氨基酸的抗菌肽 | 第34-35页 |
五、甲壳动物抗菌肽研究进展 | 第35-39页 |
1. 抗脂多糖因子 | 第35-36页 |
2. 含WAP结构域蛋白 | 第36-38页 |
3. 溶菌酶 | 第38-39页 |
第三章 论文的研究目的及内容 | 第39-41页 |
一、研究目的及意义 | 第39-40页 |
二、研究内容及技术路线 | 第40-41页 |
第二部分 甲壳动物抗菌肽性质与功能研究 | 第41-89页 |
第一章 中国明对虾甲壳肽类抗菌肽的性质研究 | 第41-65页 |
一、前言 | 第41-43页 |
二、材料和方法 | 第43-54页 |
1. 材料 | 第43-44页 |
·实验材料 | 第43页 |
·菌株和载体 | 第43页 |
·试剂和仪器 | 第43-44页 |
2. 方法 | 第44-54页 |
·序列分析 | 第44页 |
·血细胞的分离 | 第44页 |
·总RNA的提取 | 第44-45页 |
·第一链cDNA合成 | 第45-46页 |
·半定量RT-PCR | 第46页 |
·重组表达 | 第46-54页 |
·最小抑菌浓度测定 | 第54页 |
三、结果 | 第54-61页 |
1. 序列分析 | 第54-59页 |
2. 不同发育阶段的表达模式 | 第59-60页 |
3. 重组表达与纯化 | 第60-61页 |
4. 抑菌活性检测 | 第61页 |
四、讨论 | 第61-65页 |
第二章 克氏原螯虾抗脂多糖因子的性质研究 | 第65-89页 |
一、前言 | 第65-67页 |
二、材料和方法 | 第67-74页 |
1. 材料 | 第67-68页 |
·菌株,病毒和载体 | 第67页 |
·实验材料 | 第67页 |
·试剂和仪器 | 第67-68页 |
2. 方法 | 第68-74页 |
·免疫刺激 | 第68页 |
·血细胞的分离与组织提取 | 第68页 |
·总RNA的提取与第一链cDNA合成 | 第68-69页 |
·序列分析 | 第69页 |
·半定量RT-PCR及Real time-PCR | 第69-70页 |
·重组表达及抗体制备 | 第70-71页 |
·Western blot | 第71页 |
·菌结合实验 | 第71-72页 |
·多糖结合实验 | 第72页 |
·抗菌活性检测 | 第72-73页 |
·体内清除实验 | 第73-74页 |
三、结果 | 第74-85页 |
1. 基因克隆及序列分析 | 第74-79页 |
2. 组织分布及表达模式 | 第79-80页 |
·组织分布 | 第79-80页 |
·病原刺激后的表达模式 | 第80页 |
3. PcALF1的重组表达与纯化 | 第80-81页 |
4. rPcALF1菌结合活性 | 第81页 |
5. rPcALF1与生物多糖的结合活性 | 第81-82页 |
6. rPcALF1的抗菌活性 | 第82-84页 |
7. 体内清除鳗弧菌实验 | 第84-85页 |
四、讨论 | 第85-89页 |
第三部分 中国明对虾信号转导和转录激活因子基因克隆与表达模式研究 | 第89-105页 |
一、前言 | 第89-90页 |
二、材料和方法 | 第90-94页 |
1. 材料 | 第90页 |
2. 方法 | 第90-94页 |
·免疫刺激、总RNA的提取与第一链cDNA合成 | 第90-91页 |
·中国明对虾STAT基因的克隆 | 第91-92页 |
·FcSTAT基因组序列的克隆 | 第92-94页 |
·序列分析 | 第94页 |
·Real time-PCR | 第94页 |
三、结果 | 第94-103页 |
1. FcSTAT cDNA序列克隆与分析 | 第94-98页 |
2. FcSTAT基因结构 | 第98-99页 |
3. FcSTAT组织分布与表达 | 第99页 |
4. 免疫刺激后FcSTAT的表达模式 | 第99-102页 |
5. FcSTAT在不同发育阶段的表达模式 | 第102-103页 |
四、讨论 | 第103-105页 |
总结与创新点 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-127页 |
致谢 | 第127-128页 |
在读期间发表文章 | 第128-129页 |
附件 | 第129-146页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第146页 |