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棉铃虫HaBBP和HaUSH基因的克隆和在幼虫血细胞中的功能研究

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-17页
符号说明第17-19页
第一章 前言第19-42页
 第一节 昆虫蜕皮变态的分子机制第19-29页
  一.蜕皮激素第20-27页
   1. 蜕皮激素的合成第20-21页
   2. 蜕皮激素信号途径第21-27页
  二.保幼激素第27-29页
   1. 保幼激素信号途径第27-28页
   2. 保幼激素和蜕皮激素信号转导的相互作用第28-29页
 第二节 昆虫血细胞的发育第29-35页
  一.鳞翅目昆虫血细胞的分类第29-31页
   1. 原血细胞第29-30页
   2. 浆血细胞第30页
   3. 颗粒细胞第30页
   4. 珠血细胞第30页
   5. 类绛色细胞第30-31页
  二.昆虫血细胞生成第31-35页
   1. GATA转录因子和U-shaped基因第31-32页
   2. RUNX转录因子第32-33页
   3. Glial cells missing(GCM)转录因子第33页
   4. 血细胞发育的调控第33-35页
 第三节 昆虫的先天免疫第35-41页
  一.体液免疫第36-39页
   1. 抗菌肽(AMPs)的合成第36-39页
   2. 黑化反应第39页
  二.细胞免疫第39-41页
 第四节 本研究的方案及意义第41-42页
  一.棉铃虫HaBBP基因第41页
  二.棉铃虫HaUSH基因第41-42页
第二章 HaBBP基因的克隆和功能研究第42-65页
 一.前言第42-43页
 二.材料和方法第43-53页
  1. 材料第43-44页
     ·实验动物第43页
     ·试剂第43-44页
     ·仪器第44页
  2. 方法第44-53页
     ·总RNA提取第44页
     ·反转录合成第一链cDNA第44-45页
   ·基因克隆第45-47页
     ·序列分析第47页
     ·半定量RT-RCR第47-48页
     ·激素对棉铃虫的处理及其对HaBBP基因表达的影响第48页
     ·HaBBP的重组表达第48-51页
     ·免疫印迹第51页
     ·免疫细胞化学第51-52页
     ·RNAi第52-53页
 三.实验结果第53-63页
  1 .克隆到高度保守的编码535个氨基酸的基因命名为HaBBP第53-57页
  2. HaBBP主要在脂肪体和血细胞中表达第57-58页
  3. HaBBP在蜕皮、变态时期表达量升高第58-59页
   ·E能诱导HaBBP的表达第59-61页
  5. 沉默EcR-B1和USP1后影响HaBBP的表达第61页
  6. HaBBP位于血细胞的颗粒细胞和浆血细胞的细胞质中第61页
  7. 大肠杆菌的免疫刺激能诱导HaBBP的表达第61-63页
 四.讨论第63-65页
第三章 HaUSH基因克隆与功能分析第65-79页
 一.前言第65-66页
 二.材料和方法第66-70页
  1. 材料第66-67页
     ·实验动物第66页
     ·试剂第66页
     ·仪器第66-67页
  2. 方法第67-70页
     ·总RNA提取第67页
     ·反转录合成第一链cDNA第67-68页
     ·基因克隆第68页
     ·序列分析第68页
     ·半定量RT-RCR第68-69页
     ·激素对棉铃虫的处理及其对HaUSH基因表达的影响第69页
     ·在表皮细胞系中干扰EcR-B1后对HaUSH的影响第69-70页
 三.实验结果第70-78页
  1. HaUSH基因的克隆及序列分析第70-74页
  2. HaUSH主要在胚胎时期和变态时期高表达第74-76页
   ·E能够诱导HaUSH的表达第76-77页
  4. 沉默EcR-B1后抑制20E对HaUSH的诱导作用第77-78页
 四.讨论第78-79页
参考文献第79-100页
创新点总结与讨论第100-101页
致谢第101-102页
在读期间己发表文章第102-103页
附件第103-117页
学位论文评阅及答辩情况表第117页

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