| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 主要符号对照表 | 第17-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-37页 |
| 1.1 JA信号途径及JAZ蛋白研究进展 | 第18-30页 |
| 1.1.1 JA的作用及在植物体内的合成 | 第18-19页 |
| 1.1.2 JAZ蛋白是JA信号通路中的抑制因子 | 第19-20页 |
| 1.1.3 JAZ蛋白的结构特征 | 第20-22页 |
| 1.1.4 JAZ蛋白功能的冗余性 | 第22-25页 |
| 1.1.5 JAZ蛋白功能的特异性 | 第25-27页 |
| 1.1.6 JAZ蛋白参与调控植物次生代谢产物的合成 | 第27-28页 |
| 1.1.7 JA信号途径的起源和进化 | 第28-29页 |
| 1.1.8 JA信号途径中的负反馈调节机制 | 第29-30页 |
| 1.2 丹参次生代谢产物丹酚酸和丹参酮生源合成及调控研究进展 | 第30-33页 |
| 1.2.1 丹酚酸生源合成途径研究进展 | 第30页 |
| 1.2.2 丹酚酸合成积累调控研究进展 | 第30-32页 |
| 1.2.3 丹参酮生源合成途径研究进展 | 第32-33页 |
| 1.2.4 丹参酮合成积累调控研究进展 | 第33页 |
| 1.3 JA信号途径调控丹参次生代谢产物合成研究进展 | 第33-34页 |
| 1.4 本研究的目的意义 | 第34页 |
| 1.5 本研究的内容与技术路线 | 第34-37页 |
| 第二章 丹参次生代谢物积累组织特异性及其对MeJA的响应 | 第37-49页 |
| 2.1 引言 | 第37页 |
| 2.2 材料、试剂与仪器 | 第37-38页 |
| 2.2.1 丹参不同部位材料的获得 | 第37-38页 |
| 2.2.2 试剂 | 第38页 |
| 2.2.3 培养基 | 第38页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第38页 |
| 2.3 实验方法 | 第38-43页 |
| 2.3.1 诱导子制备与处理 | 第38页 |
| 2.3.2 丹酚酸和丹参酮含量测定 | 第38-39页 |
| 2.3.3 基因表达量测定 | 第39-43页 |
| 2.3.4 数据分析 | 第43页 |
| 2.4 实验结果 | 第43-46页 |
| 2.4.1 丹参不同组织部位丹酚酸和丹参酮积累的规律 | 第43页 |
| 2.4.2 MeJA对丹参毛状根中丹酚酸和丹参酮含量的影响 | 第43页 |
| 2.4.3 MeJA对丹酚酸和丹参酮合成相关基因的影响 | 第43-46页 |
| 2.5 讨论 | 第46-49页 |
| 第三章 丹参SmJAZ基因家族的全基因组鉴定分析 | 第49-61页 |
| 3.1 引言 | 第49页 |
| 3.2 材料、试剂与仪器 | 第49-50页 |
| 3.2.1 丹参毛状根的培养 | 第49页 |
| 3.2.2 菌株与载体 | 第49页 |
| 3.2.3 试剂 | 第49-50页 |
| 3.2.4 培养基 | 第50页 |
| 3.2.5 主要仪器 | 第50页 |
| 3.3 实验方法 | 第50-53页 |
| 3.3.1 丹参SmJAZ家族基因全基因组鉴定 | 第50页 |
| 3.3.2 丹参SmJAZs基因cDNA全长克隆 | 第50-52页 |
| 3.3.3 生物信息学分析 | 第52-53页 |
| 3.4 实验结果 | 第53-58页 |
| 3.4.1 SmJAZs基因全长序列的获得 | 第53页 |
| 3.4.2 SmJAZ家族基因系统进化分析 | 第53-54页 |
| 3.4.3 SmJAZs基因序列分析 | 第54-56页 |
| 3.4.4 SmJAZs启动子区顺式作用元件分析 | 第56-58页 |
| 3.5 讨论 | 第58-61页 |
| 第四章 丹参SmJAZ基因家族成员表达模式分析 | 第61-71页 |
| 4.1 引言 | 第61页 |
| 4.2 材料、试剂与仪器 | 第61-62页 |
| 4.2.1 丹参不同组织材料的获得 | 第61页 |
| 4.2.2 试剂 | 第61页 |
| 4.2.3 培养基 | 第61-62页 |
| 4.2.4 主要仪器 | 第62页 |
| 4.3 实验方法 | 第62-64页 |
| 4.3.1 诱导子制备与处理 | 第62-63页 |
| 4.3.2 基因表达量测定 | 第63页 |
| 4.3.3 数据分析 | 第63-64页 |
| 4.4 实验结果 | 第64-69页 |
| 4.4.1 SmJAZs组织特异性表达 | 第64-66页 |
| 4.4.2 SmJAZs在MeJA诱导下表达量的变化 | 第66页 |
| 4.4.3 SmJAZs在不同诱导子处理下表达量的变化 | 第66-69页 |
| 4.5 讨论 | 第69-71页 |
| 第五章 丹参SmJAZ基因家族在丹酚酸和丹参酮合成积累中的作用 | 第71-90页 |
| 5.1 引言 | 第71页 |
| 5.2 材料、试剂与仪器 | 第71-72页 |
| 5.2.1 丹参无菌苗的获得与培养 | 第71页 |
| 5.2.2 菌株与载体 | 第71页 |
| 5.2.3 试剂 | 第71-72页 |
| 5.2.4 培养基 | 第72页 |
| 5.2.5 主要仪器 | 第72页 |
| 5.3 实验方法 | 第72-79页 |
| 5.3.1 Gateway构建植物表达载体 | 第72-75页 |
| 5.3.2 农杆菌介导的植物转化及转基因毛状根的获得 | 第75-77页 |
| 5.3.3 转基因毛状根阳性株系的筛选 | 第77-79页 |
| 5.3.4 数据分析 | 第79页 |
| 5.4 实验结果 | 第79-86页 |
| 5.4.1 转基因毛状根阳性株系的获得与鉴定 | 第79-81页 |
| 5.4.2 转基因毛状根中有效成分含量在MeJA诱导下的变化 | 第81-85页 |
| 5.4.3 转基因毛状根中丹酚酸和丹参酮合成相关基因表达量在MeJA诱导下的变化 | 第85-86页 |
| 5.4.4 转基因毛状根中其他SmJAZs表达量在MeJA诱导下的变化 | 第86页 |
| 5.5 讨论 | 第86-90页 |
| 第六章 丹参SmJAZ-SmJAZ蛋白互作及与SmJAZs互作转录因子的筛选 | 第90-102页 |
| 6.1 引言 | 第90-91页 |
| 6.2 材料、试剂与仪器 | 第91-92页 |
| 6.2.1 丹参不同组织材料的获得 | 第91页 |
| 6.2.2 菌株与载体 | 第91页 |
| 6.2.3 试剂 | 第91页 |
| 6.2.4 培养基 | 第91页 |
| 6.2.5 主要仪器 | 第91-92页 |
| 6.3 实验方法 | 第92-94页 |
| 6.3.1 丹参转录因子cDNA全长克隆 | 第92页 |
| 6.3.2 Gateway构建Y2H载体 | 第92-93页 |
| 6.3.3 Y2H鉴定蛋白互作 | 第93-94页 |
| 6.3.4 基因表达量测定 | 第94页 |
| 6.4 实验结果 | 第94-98页 |
| 6.4.1 转录因子全长基因序列的获得 | 第94-95页 |
| 6.4.2 Y2H分析SmJAZs与转录因子的互作 | 第95-96页 |
| 6.4.3 转录因子组织特异性和MeJA诱导表达分析 | 第96-97页 |
| 6.4.4 Y2H分析SmJAZ-SmJAZ之间的互作 | 第97-98页 |
| 6.5 讨论 | 第98-102页 |
| 第七章 SmJAZ8负反馈调节丹酚酸和丹参酮的合成 | 第102-114页 |
| 7.1 引言 | 第102-103页 |
| 7.2 材料、试剂与仪器 | 第103-104页 |
| 7.2.1 丹参无菌苗的获得与培养 | 第103页 |
| 7.2.2 菌株与载体 | 第103页 |
| 7.2.3 试剂 | 第103页 |
| 7.2.4 培养基 | 第103页 |
| 7.2.5 主要仪器 | 第103-104页 |
| 7.3 实验方法 | 第104-106页 |
| 7.3.1 Gateway构建植物RNAi载体 | 第104-105页 |
| 7.3.2 农杆菌介导的植物转化及转基因毛状根的获得 | 第105页 |
| 7.3.3 转基因毛状根阳性株系的筛选 | 第105页 |
| 7.3.4 RNA-Seq及分析方法 | 第105页 |
| 7.3.5 数据分析 | 第105-106页 |
| 7.4 实验结果 | 第106-111页 |
| 7.4.1 SmJAZ8-RNAi对丹酚酸和丹参酮合成积累的影响 | 第106页 |
| 7.4.2 RNA-Seq分析JA信号途径中受SmJAZ8调控的基因 | 第106-110页 |
| 7.4.3 qRT-PCR验证RNA-Seq中的差异表达基因 | 第110-111页 |
| 7.5 讨论 | 第111-114页 |
| 第八章 结论与展望 | 第114-116页 |
| 8.1 本研究获得的主要结论 | 第114-115页 |
| 8.2 本研究的创新点 | 第115页 |
| 8.3 研究展望 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-133页 |
| 附录A 常用培养基配方和仪器型号 | 第133-138页 |
| 附录B 实验附表和附图 | 第138-151页 |
| 致谢 | 第151-153页 |
| 个人简历 | 第153页 |
