| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩写 | 第9-13页 |
| 第一部分 绪论 | 第13-24页 |
| 1.1 金属硫蛋白的概述 | 第13-21页 |
| 1.1.1 金属硫蛋白的发现 | 第13页 |
| 1.1.2 金属硫蛋白的分类 | 第13页 |
| 1.1.3 鼠的金属硫蛋白的分布 | 第13-14页 |
| 1.1.4 鼠的金属硫蛋白的结构特征 | 第14-18页 |
| 1.1.4.1 金属硫蛋白的一级结构特征 | 第14-15页 |
| 1.1.4.2 金属硫蛋白的三维空间结构 | 第15-18页 |
| 1.1.5 四种金属硫蛋白及其在机体的重要功能 | 第18-20页 |
| 1.1.6 研究进展 | 第20-21页 |
| 1.2 多肽固相合成 | 第21-22页 |
| 1.3 金属硫蛋白分离纯化方法选择 | 第22-23页 |
| 1.3.1 反相色谱 | 第22页 |
| 1.3.2 离子交换色谱 | 第22-23页 |
| 1.4 生物质谱 | 第23-24页 |
| 第二部分 实验部分 | 第24-31页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第24-27页 |
| 2.1.1 实验仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.2 实验试剂的配置 | 第25-27页 |
| 2.1.2.1 纯化所需试剂 | 第25页 |
| 2.1.2.2 金属离子滴定所需试剂 | 第25页 |
| 2.1.2.3 蛋白提取试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.2.4 蛋白验证所用试剂 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-31页 |
| 2.2.1 多肽合成 | 第27页 |
| 2.2.2 蛋白合成后鉴定 | 第27-28页 |
| 2.2.3 固相合成金属硫蛋白纯化 | 第28页 |
| 2.2.3.1 检测波长的选择 | 第28页 |
| 2.2.3.2 分离纯化 | 第28页 |
| 2.2.4 鱼胆金属硫蛋白提取 | 第28-29页 |
| 2.2.4.1 样品前处理 | 第28页 |
| 2.2.4.2 蛋白质粗提液的超滤 | 第28-29页 |
| 2.2.4.3 蛋白的三氯醋酸(TCA)沉淀 | 第29页 |
| 2.2.4.4 蛋白质的硫酸铵沉淀 | 第29页 |
| 2.2.4.5 蛋白的乙醇沉淀 | 第29页 |
| 2.2.4.6 SDS-PAGE验证金属硫蛋白分子量 | 第29页 |
| 2.2.5 金属离子紫外吸收光谱测定 | 第29-30页 |
| 2.2.6 金属硫蛋白与不同浓度金属离子结合 | 第30-31页 |
| 2.2.6.1 兔金属硫蛋白结合Cu~(2+)、Cd~(2+)能力 | 第30页 |
| 2.2.6.2 鼠金属硫蛋白结合Cu~(2+)、Cd~(2+)、Gd~(3+)能力 | 第30页 |
| 2.2.6.3 鱼胆金属硫蛋白结合Cu~(2+)能力 | 第30-31页 |
| 第三部分 实验结果与分析 | 第31-58页 |
| 3.1 | 第31-58页 |
| 3.1.1 多肽合成 | 第31页 |
| 3.1.2 蛋白合成后鉴定 | 第31-34页 |
| 3.1.3 固相合成蛋白的纯化 | 第34-41页 |
| 3.1.3.1 检测波长的选择 | 第34-35页 |
| 3.1.3.2 洗脱方法的选择 | 第35-38页 |
| 3.1.3.3 纯化结果分析 | 第38-41页 |
| 3.1.4 蛋白SDS-PAGE检测 | 第41-45页 |
| 3.1.4.1 超滤样品的SDS-PAGE检测 | 第41-42页 |
| 3.1.4.2 TCA沉淀样品的SDS-PAGE检测 | 第42-43页 |
| 3.1.4.3 硫酸铵沉淀样品的SDS-PAGE检测 | 第43-44页 |
| 3.1.4.4 乙醇沉淀样品的SDS-PAGE检测 | 第44-45页 |
| 3.1.5 金属离子紫外吸收光谱测定 | 第45-47页 |
| 3.1.5.1 Cu~(2+)紫外光谱 | 第45-46页 |
| 3.1.5.2 Cd~(2+)紫外光谱 | 第46-47页 |
| 3.1.5.3 Gd~(3+)紫外光谱 | 第47页 |
| 3.1.6 兔金属硫蛋白结合Cu~(2+)、Cd~(2+)紫外光谱分析 | 第47-49页 |
| 3.1.6.1 兔金属硫蛋白结合Cu~(2+)紫外光谱 | 第47-49页 |
| 3.1.6.2 兔金属硫蛋白结合Cd~(2+)紫外光谱 | 第49页 |
| 3.1.7 鼠金属硫蛋白结合Cu~(2+)、Cd~(2+)、Gd~(3+)紫外光谱测定 | 第49-55页 |
| 3.1.7.1 鼠金属硫蛋白结合Cu~(2+)紫外光谱 | 第49-50页 |
| 3.1.7.2 鼠金属硫蛋白结合Cd~(2+)紫外光谱 | 第50-51页 |
| 3.1.7.3 DTNB滴定法分别测定鼠MT-2结合Cd~(2+)和Cu~(2+)能力比较 | 第51-52页 |
| 3.1.7.4 鼠金属硫蛋白结合Cd~(3+)紫外光谱测定 | 第52-55页 |
| 3.1.8 鱼胆金属硫蛋白结合Cu~(2+)紫外光谱测定 | 第55-58页 |
| 第四部分 小结与展望 | 第58-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
