摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
1 太子参概述 | 第12页 |
2 连作障碍和群体感应 | 第12-23页 |
2.1 连作障碍 | 第12-14页 |
2.2 群体感应和群体猝灭 | 第14-15页 |
2.3 群体感应研究概况 | 第15-23页 |
2.3.1 群体感应的研究 | 第15-16页 |
2.3.2 群体感应猝灭的研究 | 第16-17页 |
2.3.3 群体感应系统 | 第17-23页 |
3 信号分子的检测方法 | 第23-26页 |
3.1 生物传感菌生物报告法 | 第23-25页 |
3.2 理化方法检测法 | 第25页 |
3.3 薄层层析法 | 第25-26页 |
4 连作土壤关键微生物的原位检测、互作研究 | 第26-27页 |
5 本实验研究目的及其意义 | 第27-28页 |
第二章 连作太子参根际群体感应菌的筛选 | 第28-40页 |
1 材料与方法 | 第28-32页 |
1.1 菌种 | 第28页 |
1.2 培养基及试剂 | 第28-29页 |
1.3 培养条件 | 第29页 |
1.4 实验仪器 | 第29-30页 |
1.5 方法 | 第30-32页 |
1.5.1 平板划线法筛选群体感应产生菌 | 第30-31页 |
1.5.2 供试菌株的活化 | 第31页 |
1.5.3 待测菌株基因组DNA的提取 | 第31页 |
1.5.4 16S rDNA基因的PCR扩增 | 第31-32页 |
1.5.5 PCR扩增产物的回收 | 第32页 |
1.5.6 PCR扩增产物测序及其系统发育树构建分析 | 第32页 |
2 结果与分析 | 第32-38页 |
2.1 太子参根际群体感应产生菌的筛选 | 第32-36页 |
2.2 待测群体感应产生菌菌株16SrDNA基因PCR扩增 | 第36-37页 |
2.3 群体感应产生菌系统发育树构建 | 第37-38页 |
3 小结与讨论 | 第38-40页 |
第三章 太子参根际土壤群体猝灭菌的筛选与鉴定 | 第40-47页 |
1 材料与方法 | 第40-42页 |
1.1 供试菌株 | 第40页 |
1.2 培养基 | 第40页 |
1.3 试剂 | 第40-41页 |
1.4 仪器 | 第41页 |
1.5 96孔液体培养法筛选群体感应降解菌 | 第41页 |
1.6 供试菌株的活化 | 第41页 |
1.7 待测菌株基因组DNA的提取 | 第41-42页 |
1.8 16SrDNA基因的PCR扩增 | 第42页 |
1.8.1 16SrDNA基因的PCR扩增 | 第42页 |
1.8.2 16SrDNA基因的PCR扩增 | 第42页 |
1.9 PCR扩增产物的回收 | 第42页 |
1.10 PCR扩增产物测序及其系统发育树构建分析 | 第42页 |
2 结果与分析 | 第42-46页 |
2.1 群体感应猝灭菌的筛选 | 第42-43页 |
2.2 待测群体感应猝灭菌菌株16S rDNA基因PCR扩增 | 第43-44页 |
2.3 菌种鉴定结果 | 第44-45页 |
2.4 系统发育树的构建 | 第45-46页 |
3 小结与讨论 | 第46-47页 |
第四章 太子参组培苗体系的构建及太子参根际特异群体感应菌对组培苗的影响 | 第47-56页 |
1 材料与方法 | 第47-50页 |
1.1 菌株及培养基 | 第47-48页 |
1.2 培养条件 | 第48-49页 |
1.3 实验试剂 | 第49页 |
1.4 实验仪器 | 第49页 |
1.5 太子参组培条件优化 | 第49-50页 |
1.5.1 外植体处理 | 第49页 |
1.5.2 芽的诱导 | 第49页 |
1.5.3 丛生芽诱导 | 第49页 |
1.5.4 根诱导培养 | 第49-50页 |
1.6 太子参根际特异性菌株对太子参组培苗的处理 | 第50页 |
2 实验结果 | 第50-55页 |
2.1 太子参组培苗培养条件的优化 | 第50-51页 |
2.1.1 初代培养条件优化 | 第50页 |
2.1.2 初代培养条件优化 | 第50-51页 |
2.2 太子参生长过程 | 第51-52页 |
2.3 T246对太子参组培苗影响 | 第52-53页 |
2.4 T144对太子参组培苗影响 | 第53-54页 |
2.5 Serratia T246和Bacillus thuringiensis T144混合菌液对太子参组培苗的影响 | 第54-55页 |
3 小结与讨论 | 第55-56页 |
第五章 太子参根际群体感应产生菌绿色荧光蛋白工程菌构建 | 第56-70页 |
1 材料与方法 | 第56-63页 |
1.1 菌株、质粒和引物 | 第56页 |
1.2 培养基和抗生素 | 第56-57页 |
1.3 培养条件 | 第57页 |
1.4 试剂 | 第57页 |
1.5 实验仪器 | 第57页 |
1.6 荧光重组质粒pPBUD-cat-gfp的构建及转化 | 第57-63页 |
1.6.1 含有绿色荧光蛋白基因重组质粒pPBUD-cat-gfp构建 | 第57-58页 |
1.6.2 cat基因片段的扩增 | 第58-59页 |
1.6.3 gfp基因片段的扩增 | 第59-60页 |
1.6.4 cat基因载体的构建 | 第60页 |
1.6.5 连接产物的转化 | 第60-61页 |
1.6.6 cat基因载体鉴定 | 第61页 |
1.6.7 gfp基因载体的构建 | 第61-62页 |
1.6.8 连接产物的转化 | 第62页 |
1.6.9 gfp基因载体鉴定 | 第62页 |
1.6.10 Serratia T246电转感受态的制备 | 第62-63页 |
1.6.11 重组质粒转化 | 第63页 |
2 结果与分析 | 第63-69页 |
2.1 cat基因片段扩增 | 第63-64页 |
2.2 重组质粒pPBUD-cat构建 | 第64-65页 |
2.3 gfp基因片段扩增 | 第65-66页 |
2.4 重组质粒pPBUD-cat-gfp构建 | 第66-68页 |
2.5 荧光标记Serratia T246 | 第68-69页 |
3 小结与讨论 | 第69-70页 |
第六章 结论 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
附录 | 第81页 |