| 摘要 | 第6-9页 |
| abstract | 第9-12页 |
| 附录：主要缩略词及中英文对照表 | 第17-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-34页 |
| 1.1 桑叶采收具有经霜的特殊要求 | 第18-20页 |
| 1.2 桑叶化学成分及生物活性的研究进展 | 第20-26页 |
| 1.2.1 桑叶化学成分研究 | 第20-23页 |
| 1.2.2 桑叶的药理作用 | 第23-26页 |
| 1.3 桑叶在食品工业中的应用与开发 | 第26页 |
| 1.4 桑叶功效成分动态变化研究 | 第26-27页 |
| 1.5 黄酮类次生代谢产物生物合成途径研究进展 | 第27-31页 |
| 1.5.1 黄酮类化合物生物合成途径 | 第27-29页 |
| 1.5.2 桑树黄酮类化合物生物合成途径中相关功能基因的研究 | 第29-30页 |
| 1.5.3 温度对植物黄酮类化合物生物合成的影响 | 第30-31页 |
| 1.6 转录组学在药用植物应答温度胁迫中的研究进展 | 第31-33页 |
| 1.6.1 转录组学技术 | 第31-32页 |
| 1.6.2 转录组学在药用植物应答温度胁迫中的应用 | 第32-33页 |
| 1.7 本课题的研究目的和意义 | 第33页 |
| 1.8 本论文研究内容 | 第33-34页 |
| 第二章 经霜前后桑叶黄酮类化学成分动态变化规律研究 | 第34-58页 |
| 2.1 材料与仪器、试剂 | 第34-35页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 2.1.2 仪器、设备 | 第35页 |
| 2.1.3 主要原料、试剂 | 第35页 |
| 2.2 方法 | 第35-37页 |
| 2.2.1 桑叶供试样品溶液制备 | 第35页 |
| 2.2.2 混合对照品溶液的制备 | 第35页 |
| 2.2.3 色谱条件 | 第35-36页 |
| 2.2.4 标准曲线的绘制 | 第36页 |
| 2.2.5 方法学考察 | 第36-37页 |
| 2.2.6 不同生长季节及经霜前后桑叶中6种化学成分含量分析 | 第37页 |
| 2.2.7 气温与桑叶中6种化学成分含量的相关性分析 | 第37页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第37-57页 |
| 2.3.1 LC-MS分析桑叶中化学成分 | 第37-48页 |
| 2.3.2 不同生长季节及经霜前后桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷、乙酰异槲皮苷、紫云英苷和乙酰紫云英苷含量分析 | 第48-55页 |
| 2.3.3 气温与桑叶中6种化学成分含量的相关性分析结果 | 第55-57页 |
| 2.4 本章小结 | 第57-58页 |
| 第三章 经霜对桑叶黄酮类化合物合成途径中关键酶基因表达水平影响的研究 | 第58-81页 |
| 3.1 材料、仪器和试剂 | 第58-60页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第58页 |
| 3.1.2 试剂 | 第58-59页 |
| 3.1.3 仪器 | 第59-60页 |
| 3.2 方法 | 第60-67页 |
| 3.2.1 PAL、4CL和CHS基因在桑叶中的表达 | 第60-64页 |
| 3.2.2 UFGT基因在桑叶中的表达 | 第64-66页 |
| 3.2.3 管家基因β-actin基因在桑叶中的表达 | 第66-67页 |
| 3.2.4 PAL、4CL、CHS和UFGT4个基因在不同生长季节及经霜前后桑叶中的表达水平 | 第67页 |
| 3.2.5 不同生长季节及经霜前后桑叶中PAL、4CL、CHS和UFGT基因表达水平与黄酮醇苷成分积累量的相关性研究 | 第67页 |
| 3.2.6 不同生长季节及经霜前后气候温度与PAL、4CL、CHS和UFGT基因表达水平的相关性研究 | 第67页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第67-79页 |
| 3.3.1 PAL、4CL和CHS基因在桑叶中的表达 | 第67-72页 |
| 3.3.2 UFGT基因在桑叶中的表达 | 第72-73页 |
| 3.3.3 β-actin基因在桑叶中的表达 | 第73-75页 |
| 3.3.4 PAL、4CL、CHS和UFGT4个基因在不同生长季节及经霜前后桑叶中的表达水平 | 第75-78页 |
| 3.3.5 不同生长季节及经霜前后桑叶中PAL、4CL、CHS和UFGT基因表达水平与黄酮醇苷成分积累量的相关性分析结果 | 第78-79页 |
| 3.3.6 不同生长季节及经霜前后气候温度与PAL、4CL、CHS和UFGT基因表达水平的相关性分析结果 | 第79页 |
| 3.4 本章小结 | 第79-81页 |
| 第四章 桑叶类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶基因的克隆、原核表达及功能分析 | 第81-110页 |
| 4.1 材料 | 第81-83页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第81页 |
| 4.1.2 仪器与设备 | 第81-82页 |
| 4.1.3 试剂 | 第82-83页 |
| 4.2 方法 | 第83-90页 |
| 4.2.1 桑叶类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶(MaUFGT)基因的克隆 | 第83-84页 |
| 4.2.2 重组质粒pCzn1-MaUFGT的构建 | 第84-87页 |
| 4.2.3 重组质粒pCzn1-MaUFGT的原核表达 | 第87-88页 |
| 4.2.4 包涵体蛋白的变复性 | 第88页 |
| 4.2.5 融合蛋白的纯化 | 第88-89页 |
| 4.2.6 MaUFGT体外酶活测定 | 第89页 |
| 4.2.7 酶活测定反应条件优化 | 第89-90页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第90-109页 |
| 4.3.1 MaUFGT基因的克隆及鉴定 | 第90-93页 |
| 4.3.2 MaUFGT基因的生物信息学分析 | 第93-99页 |
| 4.3.3 基于密码子修饰的pCzn1-MaUFGT原核表达载体的构建 | 第99-105页 |
| 4.3.4 原核表达结果分析 | 第105页 |
| 4.3.5 表达蛋白分离纯化 | 第105-106页 |
| 4.3.6 表达蛋白体外酶活测定 | 第106-107页 |
| 4.3.7 酶活测定反应条件优化 | 第107-109页 |
| 4.4 本章小结 | 第109-110页 |
| 第五章 研究温度对桑叶黄酮合成途径中关键酶基因表达和成分积累的影响 | 第110-128页 |
| 5.1 材料和方法 | 第110-114页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第110页 |
| 5.1.2 主要仪器设备 | 第110-111页 |
| 5.1.3 主要试剂 | 第111页 |
| 5.1.4 实验方法 | 第111-114页 |
| 5.2 结果与分析 | 第114-127页 |
| 5.2.1 样品测序数据质量分析 | 第114-115页 |
| 5.2.2 转录组与参考基因组比对结果 | 第115页 |
| 5.2.3 Unigene功能注释 | 第115-118页 |
| 5.2.4 差异表达基因分析 | 第118-119页 |
| 5.2.5 差异表达基因功能注释 | 第119-122页 |
| 5.2.6 温度对桑叶黄酮生物合成途径中关键酶基因的影响 | 第122-124页 |
| 5.2.7 差异表达基因的qRT-PCR验证 | 第124-125页 |
| 5.2.8 温度对桑叶黄酮类化学成分的影响 | 第125-127页 |
| 5.3 本章小结 | 第127-128页 |
| 第六章 全文总结与展望 | 第128-131页 |
| 6.1 主要结论 | 第128-130页 |
| 6.1.1 研究了经霜前后桑叶黄酮类化学成分动态变化 | 第128页 |
| 6.1.2 研究了经霜对桑叶黄酮类化合物合成途径中关键酶基因表达水平的影响 | 第128-129页 |
| 6.1.3 对桑叶类黄酮-3-O-葡萄糖基转移酶基因进行了克隆、原核表达及功能分析 | 第129页 |
| 6.1.4 研究了温度对桑叶黄酮合成途径中关键酶基因表达和成分积累的影响 | 第129-130页 |
| 6.2 创新点 | 第130页 |
| 6.3 工作展望 | 第130-131页 |
| 参考文献 | 第131-145页 |
| 致谢 | 第145-146页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第146-147页 |
