| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-32页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第10-11页 |
| 1.2 SMC复合物的介绍 | 第11-19页 |
| 1.2.1 SMC复合物的发现 | 第11-12页 |
| 1.2.2 SMC复合物的组成 | 第12-14页 |
| 1.2.3 SMC复合物的分类 | 第14-17页 |
| 1.2.4 SMC5/6复合物的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3 Nse5-Nse6复合物的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 拟南芥中Nse5,Nse6同源蛋白ASAP1,SNI1的研究进展 | 第20-30页 |
| 1.4.1 SNI1在植物系统获得性抗性中的研究进展 | 第20-26页 |
| 1.4.2 SNI1在DNA损伤修复中的研究进展 | 第26-30页 |
| 1.4.3 ASAP1的研究进展 | 第30页 |
| 1.5 本研究的意义 | 第30-32页 |
| 2 实验材料及方法 | 第32-58页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-41页 |
| 2.1.1 实验研究对象 | 第32页 |
| 2.1.2 实验所用菌株 | 第32-33页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第33-34页 |
| 2.1.4 实验所用载体 | 第34-35页 |
| 2.1.5 实验常用化学试剂及耗材 | 第35页 |
| 2.1.6 主要溶液的配方 | 第35-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-58页 |
| 2.2.1 感受态制备 | 第41-43页 |
| 2.2.2 载体构建 | 第43-50页 |
| 2.2.3 蛋白的表达纯化 | 第50-54页 |
| 2.2.4 共表达验证蛋白的相互作用 | 第54页 |
| 2.2.5 蛋白二级结构的预测 | 第54-55页 |
| 2.2.6 限制性蛋白酶水解目的蛋白 | 第55-56页 |
| 2.2.7 半胱氨酸的突变 | 第56页 |
| 2.2.8 蛋白晶体的筛选及优化 | 第56-58页 |
| 3 结果及分析 | 第58-98页 |
| 3.1 ASAP1-SNI1相互作用的验证 | 第59-74页 |
| 3.1.1 克隆构建 | 第59-63页 |
| 3.1.2 ASAP1和SNI1的生物信息学分析 | 第63-68页 |
| 3.1.3 单独纯化体外孵育验证ASAP1-SNI1的相互作用 | 第68-69页 |
| 3.1.4 共表达验证ASAP1-SNI1的相互作用 | 第69-71页 |
| 3.1.5 ASAP1-SNI1复合物的质谱鉴定 | 第71-74页 |
| 3.2 ASAP1-SNI1复合物的表达优化 | 第74-78页 |
| 3.2.1 亲和标签的优化 | 第74-77页 |
| 3.2.2 ASAP1-SNI1复合物诱导条件的优化 | 第77-78页 |
| 3.3 ASAP1-SNI1复合物的晶体初筛 | 第78-98页 |
| 3.3.1 野生型ASAP1-SNI1复合物的晶体初筛 | 第78-85页 |
| 3.3.2 含半胱氨酸突变ASAP1-SNI1复合物的晶体初筛 | 第85-98页 |
| 4 讨论 | 第98-101页 |
| 4.1 总结 | 第98-99页 |
| 4.2 讨论展望 | 第99-101页 |
| 4.2.1 ASAP1,SNI1内部序列的取代 | 第99-100页 |
| 4.2.2 ASAP1-SNI1复合物互作蛋白的筛选 | 第100-101页 |
| 参考文献 | 第101-115页 |
| 附录 | 第115-124页 |
| 附录一：克隆编号表 | 第115-122页 |
| 附录二：晶体初筛汇总 | 第122-123页 |
| 附录三：个人简历,在学期间参与发表学术论文与研究成果 | 第123-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
